본 연구는 개의 동결정액제조 시 동결보호 희석액 내에 첨가되는 당의 종류와 조합이 동결융해 후 정자의 생존율 및 운동성에 미치는 영향과 정자동결 시 straw size, 예비동결 시 액체질소표면으로부터 straw까지의 거리 및 융해온도가 생존율에 미치는 영향에 대하여 조사하고자 실시하였다. 포유류의 경우 부생식선의 정낭선에서 분비되는 정장내에는 정자의 체외사출 후 정자의 영양물질인 fructose 가 분비되는데, 동결정액제조 시 회석액내에 첨가되는 당 성분은 fructose 및 glucose를 일반적으로 사용하고 있다. (중략)

Male germ cell apoptosis has been extensively explored in rodent. In contrast, very little is known about their susceptibility to apoptosis stimuli of developing germ cell stages at the time when germ cell depletion after busulfan treatment occurs. Furthermore, it is still unanswered how spermatogonial stem cells are resistant to busulfan treatment. Spontaneous apoptosis of germ cells was observed in the testis of adult mice and experimentally induced busulfan treated mice increased this apoptosis to such an extent that there was a decrease in the weight of the testis. (omitted)

Nucleoside diphosphate kinases (NDPKs) are conserved through evolution and have been shown to be involved in various biological phenomena. By functional screening in yeast, we identified a new member of the NDPK family, ㎚23-M5, which encodes a 211-amino acid protein with 86% identify to the human homolog, ㎚23-H5. Northern blot analysis reveals that ㎚23-M5 encodes two transcripts of 0.8 and 0.7 kb, which are highly and specifically expressed in adult testis. Reverse transcriptase polymerase chain reaction analysis shows that nm23-M5 first appears in pachytene spermatocytes and increase chain reaction in abundance through subsequent stages. (omitted)

This study was conducted to investigate the effect of recipient activation time on the nuclear remodeling, chromatin structure, pronuclear formation and in vitro development of bovine nuclear transfer embryos derived from adult ear skin cells. Somatic cells were transferred to enucleated oocytes after quiescent treatments by serum starvation or culture to confluency. Nuclear transfer embryos were activated with a combination of Ca/sup 2+/-ionophore and cycloheximide at 1, 1.5, 2, 2.5, 3, and 5 h after electrofusion. (omitted)

체세포 복제기법에 의한 복제란 이식우는 수태율이 매우 낮은 것으로 보고되어 있으며, 분만지연 및 유ㆍ사산의 발생율이 높은 실정이므로, 이에 대한 근본적인 원인 분석이 요구되고 있다. 본 연구는 체세포 복제 한우의 수태율이 낮은 원인을 규명하고, 특히 분만직후의 체세포 복제 송아지의 생존율을 증진하기 위해 복제란 이식우의 임신 말기의 생리적 특성을 검토하였다. (중략)

Goats have long history in Korea. But because of small holding, is there no systematic development for breeding and reproduction. The most of goats in Korea have some typical problems, which gradually appeared through inbreeding. The purpose of this study was to evaluate effects of hormonal treatment on estrus synchronisation in non-breeding seasons and to estimate economical aspects of caprine embryo transfer. Otherwise we would like to develop a suitable practical method of field embryo transfer, in order to obtain the more basical breeding materials for high-performance goat. (omitted)

This study was to evaluate the in vitro survival of vitrified-thawed bovine MII enucleated (MIIe) oocytes according to activation timing and minimun volume cooling (MVC) method and their in vitro development after somatic cell nuclear transfer (SONT). Bovine oocytes were recovered from slaughtered bovine ovary and matured in TCM-199 supplemented with 10% FBS. (omitted)

The low efficiency of animal production by nuclear transfer technique is considered to be result of an incomplete reprogramming of the donor cell nucleus, which leads to a lack of, or abnormal expression of developmentally important genes. There are a lot of genes related to embryo development and some of these genes are regulated by imprinting. IGF2 (insulin like growth factor 2) and IGF2R (IGF2 receptor) that play important roles in preimplantation development are included in imprinted genes also. (omitted)

Interspecies nuclear transfer has been interested to determine ability of oocyte cytoplasm to support reprogramming of somatic cell nuclei of different species. In this study, we investigated developmental ability and mRNA expression patterns of developmentally important genes in bovine reconstructed embryos using a mouse fibroblast cell nucleus. While 20% nuclear transferred embryos with bovine fibroblast developed to morulae/blastocysts, a few(2-5%) nuclear transferred bovine embryos with mouse fibroblast developed to morula. (omitted)

난포액은 난자의 성숙을 억제하는 성분을 함유하고 있으나, 억제성분의 화학적 성질은 연구자에 따라 다르게 보고되고 있다. 따라서 본 연구는 난자의 성축과 관련하여 제l극체의 형성을 억제하는 단백성 성분을 화학적으로 규명하기 위하여 실시하였다. 난포액 함유 난자성숙 억제 인자를 분리하기 위하여 난포액을 methanol로 추출한 다음 Superose 12 및 Superdex column 을 이 용하여 gel filtration 을 실시하였다. 회수한 Superdex 분절을 PITC로 처리한 다음, Amino Acid Analysis column을 이용, 억제 인자를 동정하였다. (중략)

수정촉진 peptide(Fertilization Promoting Peptide; FPP) 는 체내에서 정자-난자의 결합시 투명 대내에서 glycoprotein 과 progesterone에 의해 정자침입이 활성화 될 때까지 첨체반응을 억제함으로써 정자의 수정상태 유지를 위하여 필요한 물질로 알려져 있다. 한편, 정자내에 존재하는 lectin과 같은 단백질 및 효소 등은 투명대내에 존재하는 oligosaccharide 잔기를 합성시킨다. 본 연구는 돼지 정자-난자의 체외수정시 투명대내 FITC-labelled 처리된 lection의 결합과 FP의 영향을 검토하고자 수행되었다. (중략)

The purpose of this study was to determine the effect of bST treatment on progesteron concentration, embryo recovery and pregnancy rate following embryo transfer. Donor cows were superovulated with Folltropin-V and PGF₂ α combination method and then inseminated with frozen semen 3 times 12 hrs interval. Donor and recipient cows were assigned to control and bST group, of which was given a single injection of bST (500 ㎎, sc) at insemination or estrus detection. Embryo collection of superovulated cows were flushed nonsurgical method at 7 to 8 days after artificial insemination. (omitted)

Telomere erosion is the earliest chromatin modification in cells entering the apoptotic regime. The purpose of this investigation was to demonstrate that loss of telomeric DNA was involved in the induction of mitotic catastrophe and cell death of Chinese hamster Don cells that were grown continuously without subculturing for several days. Don, which is a diploid male Chinese hamster-derived cell line, was grown without sub-culturing for one to four days at 37℃ and then harvested for cytological preparations. (omitted)

The egg productivity of the chick is represented by the number of egg produced, egg weight, and sexual maturity, which are regulated by various endocrine factors. Although there were some reports that insulin-like growth factor-I (IGF-Ⅰ) affected egg production, studies on any correlation between IGFs and egg productivity were not reported in poultry. The objectives of the present study were to examine the IGFs profile and egg productivity in both KNOC and laying hen (Saver) and to investigate the relationship of IGFs with egg productivity. Whole blood was collected every 10 wk until 60 wks. (omitted)

There are considerable reports that the expression of insulin-like growth factor-Ⅰ (IGF-Ⅰ) is related to ovarian regulation and oviductal development in poultry. Korean Native Ogol Chicken (KNOC) have been inbred to keep a pure line so that there has been limitation in the improvement of egg productivity by genetic studies. Therefore, this study was conducted to investigate the early egg productivity of KNOC pre-selected by IGF-Ⅰ expression. (omitted)

This study was to investigate the effect of neurotrophic factors on neural cell differentiation in vitro derived from human embryonic stem (hES, MB03) cells. For neural progenitor cell formation derived from hES cells, we produced embryoid bodies (EB: for 5 days, without mitogen) from hES cells and then neurospheres (for 7 - 10 days, 20 ng/㎖ of bFGF added N2 medium) from EB. And then finally for the differentiation into mature neuron cells, neural progenitor cells were cultured in ⅰ) N2 medium (without bFGF), ⅱ) N2 supplemented with brain derived neurotrophic factor (BDNF, 5ng/㎖) or ⅲ) N2 supplemented with platelet derived growth factor-bb (PDGF-bb, 20ng/㎖) for 2 weeks. (omitted)

This study was to examine whether the in vitro differentiated neural cells derived from human embryonic stem (hES, MB03) cells can be survived and expressed tyrosin hydroxylase(TH) in grafted normal or PD rat brain. To differentiate in vitro into neural cells, embryoid bodies (EB: for 5 days, without mitogen) were formed from hES cells, neural progenitor cells(neurosphere, for 7-10 days, 20 ng/㎖ of bFGF added N2 medium) were produced from EB, and then finally neurospheres were differentiated into mature neuron cells in N2 medium(without bFGF) for 2 weeks. In normal rat brain, neural progenitor cells or mature neuron cells (1×10/sup 7/ cells/㎖) were grafted to the striatum of normal rats. After 2 weeks, when the survival of grafted hES cells was examined by immunohistochemical analysis, the neural progenitor cell group indicated higher BrdU, NeuN＋, MAP2＋ and GFAP＋ than mature neuron cell group in grafted sites of normal rats. This result demonstrated that the in vivo differentiation of grafted hES cells be increased simultaneously in both of neuronal and glial cell type. Also, neural progenitor cell grafted normal rats expressed more TH pattern than mature neuron cells. Based on this data, as a preliminary test, when the neural progenitor cells were grafted into the striatum of 6-hydroxydopamine lesioned PD rats, we confirmed the cell survival (by double staining of Nissl and NeuN) and TH expression. This result suggested that in vitro differentiated neural progenitor cells derived from hES cells are more usable than mature neuron cells for the neural cell grafting in animal model and those grafted cells were survived and expressed TH in normal or PD rat brain.

This study was to establish the use of parthenogenetic mouse ES (P-mES02) cells as a reproducible differentiation system for mouse cardiomyocytes. To induce differentiation, P-mES02 cells were dispersed by dissociation and the formation of ES cell aggregates in differentiation medium. After 7 days in differentiation culture, the embryoid bodies (EBs) were plated onto gelatin-coated dish. Cultures were observed daily using an inverted light microscope to determine the day of contraction onset and total duration of continuous contractile activity for each contracting focus. (omitted)

사람의 erythropoietin (hEPO) 는 산성 당단백질 호르몬이며 적혈구 생산의 주요조절인자로서 적혈구의 분화와 hemoglobin (Hb) 형성을 촉진하여 빈혈치료제로 이용된다. 사람 EPO 는 166개 아미노산으로 구성되어 있으며, 24, 38, 83 번 아미노산은 N-glycosylation에 의해, 126 번 아미노산은 O-glycosylation에 의해 변형되며, 특히 N-glycosylation은 hEPO 의 세포외 분비 및 활성에 관여한다고 보고된 바 있다. (중략)

Identification of spermatogonial stern cell-specific surface molecules is important in understanding the molecular mechanisms underlying the maintenance and differentiation of these cells. We have found that spermatogonia from busulfan treated mice expressed an autoantigen that distinguishes between undifferentiated and differentiated spermatogonia. Four to six weeks after busulfan treatment, germ cells located in the basal compartment of seminiferous epithelium show isotype-specific IgG deposits that form due to autoimmunity. (omitted)

In vitro matured porcine oocytes have very small volume of perivitellinespace(PVS). In these respect, the effects of sucrose and polybrene on the efficiency of gene transfer were investigated. As a gene (hGH) transfer vehicle, Vesicular stomatitis virus glycoprotein pseudotyped retroviral vector (VSV-G) was used. Sucrose treatment have no detrimental effect on the rates of cleavage and following development and induced the enlargement of PVS resulting the efficient introduction of retroviral vector stocks into PVS. (omitted)

본 연구는 돼지 인공수정 시 1 회 주입하는 정자농도가 번식성적에 미치는 영향을 구명하기 위하여 활력이 70%이상인 정자수 기준으로 80㎖ 병당 30.0×10/sup 8/80㎖, 25.0, 20.0, 17.5, 15.0, 12.5, 10.0 및 7.5로 농도를 각각 조절하여 12시간 간격으로 2회 인공수정하고 분만율 및 산자수를 조사하였다. 본 실험에 사용된 액상정액은 축산기술연구소 돼지 인공수정 센타의 종모돈중 통일품종 정액을 BTS(Beltsville thawing solution) 보존액으로 혼합하여 5개 농장의 암돼지에 인공수정 하였으며, 정자농도는 광전비색계(Spectronic-20, USA)를 이용하여 측정하였다. 분만율은 72.3%-89.3%로 농도별로 통계적인 유의차는 인정되지 않았다. (중략)

본 연구는 종부형태가 이유한 암돼지의 번식성적에 미치는 영향을 조사하기 위하여 이유후 4-6 일경에 자연발정이 발현되어 수정적기라고 판단되는 암돼지에 12시간 간격으로 각각 자연종부 2회, 인공수정 2회 및 혼합교배(자연종부 l회＋인공수정 1회)의 형태로 나누어 종부하고 분만율과 산자수를 조사하였다. 분만율은 자연종부 78.5%, 인공수정 76.3% 및 혼합교배 76.0%로 나타나 종부형태간에 유의적인 차이가 없었으나 총산자수는 자연교배 9.89 두와 인공수정 10.04 두의 단독 종부 형태 보다 혼합종부형태가 10.26두로 높게 나타났다(P<0.01). (중략)

본 연구는 이유한 경산돈의 발정동기화방법이 번식성적에 미치는 영향을 조사하기 위하여 대조구(자연 발정), Tl(Regumate＋PMSG＋hCG), T2(PMSG＋hCG) 및 T3(PG600) 처리구로 발정을 유기한 후 발정발현 상태에 따라 수정적기라고 판단되는 시기에 12시간 간격으로 2회 인공수정 하여 분만율 및 산자수를 조사하였다. 본 실험에 사용된 액상정액은 축산 기술연구소 돼지인공수정센타의 종모돈 5두 정액을 혼합하여 이용하였으며, BTS (Beltsville thawing solution) 보존액으로 l회 주입 정자농도를 3.0×10/sup 9/이 되도록 조절하였다. (중략)

본 연구는 돼지 액상정액의 품질을 간편하게 육안적으로 식별하기 위한 방법을 개발하기 위하여 채취된 정액을 페놀레드(0.5%)가 첨가된 BTS보존액에 정액과 회석액비율을 1:1로 희석하여 1-2시간 17℃까지 냉각시킨 후 최종정자수가 3×10/sup 9/ sperm/80㎖ 되도록 최종 추가조정 희석한 후 17℃에서 1, 3 및 5일 동안 보관한 정액의 활력과 pH를 조사하고 페놀레드 색상변화를 Figure 1과 같이 pH 6.2-8.0까지의 색상을 10등급으로 나누고 pH 7.0 수준을 표준색상으로 하여 색상 변화를 조사한 결과는 다음과 같다. 돼지 액상정액을 17℃에서 1, 3 및 5일 동안 각각 보관하였을 때 정자 활력은 71.9%, 59.8% 및 53.9%였으며, 이 때 pH 는 각각 6.89, 6.84 및 7.06으로 적정 색상을 나타내었다. (중략)

건강보조식품의 홍수와 함께 우유보다 소화흡수가 좋고 건강식을 즐겨하는 현대인들의 취향에 발맞추어 상대적으로 유량과 산육성이 좋은 외래산양의 유입이 급속하게 늘어남으로써, 일부 재래산양 사양 농가들은 생산성 향상을 목적으로 재래산양과 외래산양의 무분별한 교배를 시키므로써 재래산양의 유전자원의 보존문제가 대두됨과 동시에 재래산양의 개량의가속화, 근친교배에 따른 문제점, 계절번식에 따른 산자생산의 한계 등은 재래산양의 인공수정에 대한 깊이 있는 연구로 이어져야 하겠기에 본 연구에서는 38 두의 재래산양을 공시하여 실험한 결과 여름과 겨울에 채정한 정액보다는 봄가을에 채정한 정액의 량이 2.0㎖로 여름과 겨울보다 많았으며, 정자농도는 봄에 21.0×10/sup 8//㎖로 가장 짙었고, 총정자수는 봄에 42.0×10/sup 8/로 가장 많았으며, 운동성은 가을에 90(motility)로 가장 좋았다. (중략)

본 연구는 인공수정용 액상정액을 생산하는 돼지 AI 센터의 종모돈으로부터 채취한 정액내 세균 감염정도를 조사하고 감염율이 높은 세균에 대한 항생제 감수성을 조사하기 위하여 시도되었다. 3개 AI 센터의 원정액내 세균수 (cfu × 10²/㎖)는 각각 8.2±28.8(1 -100), 18.2± 20.0(5-48) 및 33.1±62.l(4-173)로서 평균 23.8±38.l 이었고 AI 센터간, 개체간에 변이 가 컸다. 감염 세 균의 특성은 간균 74%, Gram stain(＋)균 60%, catalase 생산 (＋)균 100% 및 oxidase activity (＋) 균 98%였으며 센터간에 다소 차이가 있었다. 정액샘플내 감연빈도가 높은 세균은 Bacillus sp(조사시료의 75.0%), Pseudomonas sp(67.9%), Proteus sp(53.8%), Staplhylococcus sp(53.6%), E. coli(l5.4%), Klebsiella sp(15.4%), Enterobacter sp(7.7%) 순이었으며 전체 감염세균 종류중 이들 세균의 비율은 각각 25.6%, 20.9%, 16.3%, 18.6%, 4.7% 및 2.3%였다. 액상정액에서 보존 2일과 6일의 세균수 (cfu×10²/㎖)는 2.4± 2.7과 44.0±44.6이었다. 항생제 감수성은 Corynebacterium sp의 경우는 8종 항생제 중 3종 (Streptomycin, polymyxin B, erythromycin)에서 저항성을 나타냈다.(농림기술개발사업 연구결과의 일부)

소난자 체외성숙에 있어 소 태아혈청 (fetal bovine serum: FBS) 첨가시 높은 성숙율을 보이며 핵 이식 후 배 발달율에 있어서도 높다. 하지만 배양액 내에 포함된 소 태아혈청은 수정란 이식 후 태아의 발육 중 및 태어난 직후에 발생되는 송아지에서 나타나는 몇몇 비정상적인 현상들의 원인인 것으로 보고되고 있다 (Walker 등, 1998). 본 실험은 성숙배양시 소 태아혈청과 이의 대체물질로서 BSA 또는 PVA 와 같은 macromolecules의 첨가가 소 난자의 성숙과 핵 이식 후 배 발달에 미치는 효과를 알아보기 위하여 실시하였다. (중략)

핵이식 방법은 형질전환 동물을 생산하기 위한 여러 가지 방법 중 최근에 많이 이용되고 있다. 본 실험은 형광단백질 유전자 (green fluorescence protein, GFP)가 도입된 태아섬유아세포를 이용 핵이식을 하여 형질전환 수정란의 생산효율을 검토하기 위하여 실시하였다. GFP 유전자는 임신 45-55 일령의 태아섬유아세포 (KbFF3)에 electroporation방법으로 transfection을 실시하였다. (중략)

본 연구는 핵이식 기법을 이용하여 고능력 한우의 대량 생산기술을 개발하기 위하여 수행하였다. Donor cell 은 축산기술연구소 남원지소에서 사육, 검정하고 있는 축군에서 육량 육질 국내 100위 이내의 암소에서 귀세포를 채취하여 동결 및 계대배양하여 사용하였다. 도축장에서 채취한 난소에서 난자를 채취하여 22시간 성숙 배양한 후 난구세포를 제거하고, 극체가 존재하는 난자를 선별하여 recipient cytoplasm으로 사용하였다. (중략)

This study was designed to examine the ability of the bovine (MII) oocytes cytoplasm to support several mitotic cell cycles under the direction of differentiated somatic cell nuclei of bovine, human, porcine and mouse. Bovine GV oocytes were matured in TCM-l99 supplemented with l0% FBS. At 22 h after IVM, denuded recipient oocytes were stained with 5 ㎍/㎖ Hoechst and their 1 st polar body (PB) and MII plate were removed by enucleation micropipette under. (omitted)

The success of embryo cloning depends on numerous factors; interaction between recipient ooplasm and donor nucleus, nuclear reprogramming, oocyte activation, and donor cell cycle and type. In this study, the cell cycle and apoptosis of bovine fetal fibroblast as a donor cell for embryo cloning were evaluated following different activation treatments. (omitted)

돼지 체세포 핵이식에 있어서 체외발달률을 재고하기 위하여 공여세포의 종류, 활성화 방법, 배양조건 등이 체외발달에 미치는 영향을 검토하였다. 도축장에서 채취한 난소에서 미성숙난자를 채취하여 NCSU-37 배양액에 10% pFF 와 0.6mM Cystein, 1mM dbcAMP, 0.1 IU/㎖ human menopausal gonadotrophin(hMG)에서 20시간 배양후 dbcAMP 와 hMG 가 없는 배양액에서 18-24 시간 추가배양 성숙 후 성숙된 난자를 핵이식의 수핵난자로 사용하였다. (중략)

The mechanisms underlying the visual assessment and resulting in optimum embryonic development following in vitro maturation, fertilization, and culture are unclear. It is known that in vitro produced embryos show more frequent occurrence of fragmentation, which result in poor developmental potential and decreased implantation rate. The objective of this study was to investigate the apoptotic rates in in vitro fertilization (IVF) and nuclear transferred (NT)bovine blastocyst. (omitted)

Nuclear transfer (NT) has the potential to produce large number of identical progeny and would greatly benefit ongoing research efforts, Cloned animals produced by NT, however, may not be genetically identical to the donor cell. In NT procedures, nucleus genes originate from donor cell, and mitochondrial genes originate from recipient oocytes. (omitted)

Bovine cumulus-oocyte complexes were recovered from ovaries at a slaughter and then divided into five groups: control group(unvitrified oocytes), 0 hr. group(composed of oocytes vitrified before the onset of maturation) and 10, 14, and 20 hrs groups(vitrified respectively at 10, 14 and 20 hrs after the onset of maturation). The oocytes remained vitrified for 24 hrs, and then were thawed in 30℃ water bath. Survival and cleavage rates were defined as development rate on in vitro culture and stained with aceto-orcein or FDA test.

본 연구는 한국 재래산양의 핵이식에 있어서 공여핵은 귀세포를, 수핵난자는 소 및 돼지의 난포란을 이용하여 핵이식을 실시하여 복제수정란의 체외발달율과 이종간의 핵이식 가능성을 검토하였다. 공여핵은 재래산양의 귀세포를 채취하여 10% FBS 가 첨가된 TCM-199 배양액으로 체외 배양을 실시하여 monolayar Confluent 형성후 0.25% Trypsin-EDTA을 처리하여 계대배양을 실시하였다. (중략)

체세포 핵이식에 의한 산자가 양, 소, 염소, 쥐 및 최근에 돼지에서 보고되었지만, 생산된 배반포의 동결보존에 관한 연구결과는 보고되지 않고 있다. 따라서, 본 연구는 체세포 핵이식란의 활용과 산업화 촉진을 위해서 체세포 핵이식 유래 배반포의 동결성 향상에 배양조건이 미치는 영향을 조사하고자 실시하였다. 공여세포는 60일령의 태아세포를 10% FBS 가 첨가된 DMEM 에서 39℃, 5% CO₂의 incubator에서 배양하여 monolayer confluent 형성을 유도한 후 0.25%trypsin 처리하였다. (중략)

본 연구는 돼지의 미성숙 난포란을 체외에서 성숙, 수정시킨 후, 생산된 체외 수정란을 NCSU 23 체외배양액에 항산화제(NAC, ebselen 및 glutathione) 와 성장 인자 (EGF, PDGF)의 첨가가 돼지 체외 수정란의 체외 발육에 미치는 영향을 검토하였다. NAC을 0, 0.5, 1.0 및 2.0 mL 첨가하여 체외배양한 결과, 상실배기 이상 발육된 체외발육성적이 1.0mL과 2.0 mM 첨가구가 여타구보다 유의하게 높은 체외발육성적을 나타냈다.(p〈0.05). (중략)

닭 수정란을 이용한 생명공학 기술은 일반적인 포유류 가축의 수정란에 적용되고 있는 기술과 비교 해 볼 때, 기본적인 배 발생 단계에서부터 개체 탄생에 이르기까지 상당 부분에 걸쳐 상이한 점이 많다. 왜냐하면, 조류는 발생학적 특성상 수정과 초기 배 발생을 제외한 거의 대부분의 개체 발생 과정이 난각 속에서 진행되기 때문이다. 또한, 포유류는 새끼를 낳는 반면, 조류는 몸밖에 알을 낳아 적당한 습도와 온도에서 일정기간 품은 다음 병아리를 부화시키는 동물이다. (중략)

본 연구는 돼지의 미성숙 난포란을 체외에서 성숙, 수정시킨 후, 생산된 체외수정란을 NCSU 23 체외배양액에 항산화제 (NAC, ebselen 및 glutathione) 와 glutathione 합성억제제인 BSO의 첨가가 돼지 체외 수정란의 체외 발육에 미치는 영향을 검토하였다. Glutathione 합성 억제제인 BSO가 돼지 수정란의 체외 발육에 미치는 영향을 검토한 결과, 0, 1.0 및 5.0mM의 BSO 을 첨가하여 상실배기 이상 발육된 체외 발육 성적은 각각 35.9, 15.7 및 8.4%로서 BSO 첨가구가 대조구에 비해 통계적으로 유의하게 낮은 체외배율성적을 나타냈으며 (P＜0.05), NAC 1.0mM, ebselen 10μM 및 glutathione 100μM 과 BSO 1.0 mM 을 각각 첨가하여 체외 배양을 실시한 경우, 상실배 이상 발육된 체외 발육율은 40.5, 44.2, 36.0 및 10.9%로서 항산화제 첨가구가 BSO 첨가구보다 통계적으로 유의하게 높은 체외 발육 성적을 나타냈다 (P＜0.05). 모든 처리구에서 체외 수정 후 생산된 배반포기 수정란의 세포수에는 차이가 인정되지 않았다. (중략)

Porcine zygotes medium(PZM) 은 5%의 산소조건에서 체내생산 된 돼지초기수정란의 배 발달을 증가시킨다고 보고되었다 (Yoshioka 등, Biol. Reprod., 66:112-119, 2002). 본 실험에서는 NCSU23, PZM3 및 PZM4 의 배양액과 5% 및 20%의 산소조건이 돼지 체외수정란의 배 반포기까지 체외발달에 미치는 영향에 관하여 조사하였다. (중략)

Chimerism has become an important tool for investigating fundamental aspects of early embryonic development and differentiation in mammals for producing transgenic animals. The objective of this study was to evaluate the developmental capacity of chimeric embryos reconstructed with parthenotes and IVF bovine embryos into empty zona pellucida. The MII oocytes were activated by two treatment groups [Group 1, 5 μM inomycin, 5min, ＋ 10 ㎍/㎖ cycloheximide (CHX)/5 ㎍/㎖ cytochalasin B (CCB), 3 h; Group 2, 5 μM ionomycin, 5 min ＋ 1.9 mM 6-dimetylaminopurine (6-DMAP), 3 h]. (omitted)

γ - tubulin is an essential, invariant constitutive centrosomal protein, which plays key roles in microtubule patterning and defining the microtubule intrinsic polarity. Although γ-tubulin was also present in cattle oocytes and zygotes, no details have been provided on its recruitment and localization to date. In this study, we determined γ-tubulin distribution chronologically in conjunction with microtubule dynamics during fertilization and parthenogenesis, with a view to understanding the molecular basis of zygotic centrosome reconstitution in cattle. (omitted)

During fertilization, morphological and molecular events in male and female chromatin are precisely controlled in time. However, little information is available on onset of pronuclear formation and first S-phase entry in the pig following intracytoplasmic sperm injection. To assess species specific paternal effect on the pronuclear formation and initiation of first S-phase in the pig, we examined time of onset of male and female pronuclear formation and onset of DNA synthesis in the oocytes following pig or mouse sperm injection. (omitted)

Despite of importance of integrated events of nucleus and microtubule remodeling in nuclear transferred embryos with somatic cells, little information is available on this subject. In this study we compared chromatin, r-tubulin and microtubule organization in porcine oocytes following somatic cell nuclear transfer and parthenogenetically activation in order to clarify nuclear remodeling process and to demonstrate centrosome inheritance during nuclear transfer. (omitted)

The objective of this study was to determine the developmental competence of in vitro matured bovine oocytes after intracytoplasmic sperm injection(ICSI) with frozen-thawed epididymal spermatozoa. The ovaries were obtained from slaughtered Korean native cows. Oocytes matured in vitro for 24 hrs were fertilized by ICSI with frozen-thawed epididymal spermatozoa. After ICSI, one group of oocytes was activated with 7% ethanol for 5 min, and second group was not activated. The follicular oocytes were cultured in TCM-199 medium containing hormones and 10% FCS for 24-30 hrs in a incubator with 5% CO₂ in air at 38.5℃. (omitted)

This study was carried out to verify the incidence of oocytes when vitrified at various maturation stages. Bovine cumulus-oocyte complexes were recovered from ovaries at a slaughter and then divided into five groups: control group(unvitrified oocytes), 0 hr. group(composed of oocytes vitrified before the onset of maturation) and 10, 14, and 20 hrs groups (vitrified respectively at 10, 14 and 20 hrs after the onset of maturation). (omitted)

본 연구에서는 마우스 초기 발생 시스템의 확립과 안정화를 위해 소적배양에 이용되는 미네랄 오일의 종류 및 세정방법이 마우스 초기 발생에 미치는 효과를 검토하였다. 본 연구를 위 해 5주-6주령의 ICR계 마우스를 사용했으며, 과배란 유도를 위하여 5IU PMSG 및 5IU hCG 를 각각 복강에 투여하였다. 과배란을 유도한 암컷 마우스는 수컷과 교배를 시켰으며, 교배 18시간 후 난관으로부터 1-세포기 수정란을 회수하였다. 회수된 수정란은 미네랄 오일이 도포된 CZB 배양액의 소적에서 37 ℃, 5% CO₂ in air 기상하에 138 시간 동안 배양되었다. (중략)

본 연구는 체세포 복제 가축의 정상 분만율이 낮은 원인을 규명하고, 복제란 이식우의 분만전후 생리적인 특성을 검토하기 위하여 혈중 또는 태반내 TGF-β1 과 progesterone 농도를 분석하여 검토하였다. 축산기술연구소에서 자체 생산된 체세포 복제란을 자연 발정이 유기된 수란우에 이식하였으며, 분만 예정일 하루 전에 제왕절개수술을 실시하여 태반 및 혈액을 채취하여 실험에 공시하였으며, 대조구의 시료는 분만직전에 제왕절개수술을 실시하여 공시하였다. (중략)

복제기법을 이용한 체세포 복제우의 생산에 있어서 문제점은 복제란의 이식후 수태율이 매우 낮으며 이에 대한 근본적인 원인을 해석하고, 수태율을 증진시킬 수 있는 새로운 방법이 요구되고 있는 실정이다. 따라서 본 연구는 체세포 복제 가축의 수태율이 낮은 근본적인 원인을 규명하기 위한 기초자료를 확보할 목적으로 복제란 이식우의 임신기간 중혈중 progesterone, cortisol, IGF-Ⅰ 및 IGF-Ⅱ의 농도를 분석하여 복제우의 수태율을 높이기 위하여 시험을 실시하였다. (중략)

멸종위기에 있는 우리나라 재래돼지의 안전한 보존을 위해서는 수정란 동결보존이 필수적이며 동결에 적합한 수정란 생산이 선행되어야 한다. PMSG/hCG 에 의한 돼지 체내수정란 생산 연구는 주로 대형종을 중심으로 이루어져 왔으며 우리나라 재래돼지와 같은 중소형종에 대한 연구는 미미한 실정이다. 본 연구는 다배란를 유도하기 위해 투여하는 PMSG/hCG 에 대한 우리나라 재래돼지의 난소반응과 외과적 채란에 의한 수정란 회수율을 구명함으로써 재래돼지 체내수정란 생산의 효율성을 높이기 위해 수행되었다. 18일 동안 20㎎/day의 Altrenogest(Regumate/sup R/, Intervert)로 발정주기를 동기화 시킨 미경산 재래돼지 11두를 3군으로 나누어 각각 500, 750, 1,000 IU의 PMSG(Folligon/sup R/, Intervert)를 주사하고 80-84시간 후 500 IU의 hCG(Chorulon/sup R/, Intervert)를 주사하여 다배란을 유도하였다. (중략)

Currently, the technique of pronuclear microinjection is the most successful and most widely-used method for producing transgenic animals. Among this technique, surperovulation and embryo transfer are the crucial steps for obtaining a large number of fertilized eggs and birth as much as potential founders from the transferred embryos. (omitted)

돼지에서 스트레스관련 PSS(porcine stress syndrome) 및 HSP70(heat shock protein 70) 유전자형이 번식능력과 관련된 유전특성을 구명하기 위하여 PCR 용 프라이머의 염기서열을 설계하였다. PSS 는 Brenig등 (1992)의 RYR1 유전자 exon17 영역의 DNA에 근거한 18586-18659 영역과 GenBank (accession No. X68213) 의 HSP70 cDNA에 근거하여 290-512, 830-1424 및 1363-2041 영역으로 이루어졌다. (중략)

본 연구는 사람의 조혈촉진유전자가 형질전환된 돼지의 유즙내 hEPO 발현농도를 확인하고 3종의 동물 (mouse, rat, swine)에서 hEPO 의 생리활성을 분석하기 위하여 실시하였다. 새롬이 Fl 암컷의 유즙을 원심분리하여 지방을 제거한 후 hEPO 의 농도를 측정하고, PBS 로 유즙내 hEPO 농도가 100 IU/㎖가 되도록 희석하였다. Mouse (ICR)는 피하주사로 20 IU씩 2일 간격으로 3회 (0, 2, 4 일차 ) 주사하였으며, 주사 후 4회에 걸쳐 (0, 2, 4, 7 일차) 혈액을 채취하여. 분석하였다. (중략)

비 반추동물 특히 돼지의 경우 섬유소 소화율이 극히 낮은 것으로 알려져 있다. 따라서 본 연구는 섬유소분해효소유전자 (CelD) 를 췌장특이 프로모터인 rat Elastase Ⅰ 하류에 연결하여 구축된 벡터를 수정란내 미세주입한 후 생산된 형질전환 돼지를 이용하여 섬유소 소화능력을 측정하기 위하여 실시하였다. 먼저 35두의 수란돈으로 부터 65 두의 산자를 생산하였으며, PCR 분석 결과 4두가 형질전환돼지로 판명되었으며 이중 3두가 죽고, 생존한 l두를 다시 southern blot 분석결과 형질 전환된 것으로 판단하여 같은 복의 6두와 함께 섬유소 소화율을 측정하기 위하여 분리사육을 실시하였다. (중략)

The relationship of Oct-4 to pluripotent cells is suggested by its tightly restricted expression pattern during embryonic development. Just prior to implantation it is limited to pluripotent cells of the inner cell mass (ICM) that will form the embryo proper but is not expressed in the trophectoderm, the structure that will form the extraembryonic tissues. (omitted)

Peroxiredoxin (Prx) has been known to play an important role in the protection against oxidative damage of reactive oxygen species (ROS). Recent reports implied that the ROS may be closely related with the reproductive system. To define the possible roles of Prx family in reproduction, the expression profiles were investigated in reproductive organs of four murine strains. (omitted)

Peroxiredoxins (Prxs) possess protective activity against oxygen radicals generated by thiol-catalyzed oxidative systems. We already reported the genomic structure and its expression of mouse Prx Ⅰ, Ⅱ, and 1-Cys Prx. However, the Prx Ⅲ has not been determined. That was initially defined transiently expressed gene, mouse MER5, of murine erythroleukaemia cell differentiation. In addition, this protein was recently redefined a member of the thiol-specific antioxidant gene family. (omitted)

본 연구는 태아 섬유아세포에 hEPO 를 도입하여 transfedtion된 체세포를 공여핵으로 사용하여 복제수정란을 생산함에 있어서 배반포 발달율을 조사하고자 하였다. 실험에 공시된 공여핵은 임신 30일령의 태아로부터 섬유아 세포를 회수하여 10% FBS 첨가된 ES-DMEM 배지에서 3-4일 동안 배양하여 confluent 를 형성시킨 후 0.25% trypsin을 처리하여 neo-EGFP 와 UPⅢ-hEPO 유전자가 1:9로 함유된 배지에서 electroporation을 실시하였다. (중략)

The efficiency of animal production using cloning technology is relatively low. It is considered that the nuclear transferred (NT) embryos proceed inappropriate reconstruction with donor-recipient cell, which lead to a abnormal embryo development, and differential expression of mRNA transcript. Especially, the expression of mRNA on peri-implantation stage embryos is very important factor to decide success of implantation and ongoing pregnancy. (omitted)

The imbalance between reactive oxygen species(ROS) production and total antioxidant capacity reproduction system is correlated with infertility. Therefore, this study was designed to investigate the expression patterns of peroxiredoxin(Prx), a member of antioxidant family, in reproductive system that includes testis, epididymis ovary, oviduct, and uterus. (omitted)

Positional cloning of hereditary deafness genes is a direct approach to identify molecules and mechanisms underlying auditory function. Nowadays many deafness genes are newly identified by finding the locus for the causative genes. Mutations at many different loci in humans and mice are known to cause hearing impairment. Mouse mutants exhibiting deafness may be useful in identifying some of genes involved. (omitted)

To investigate the effects of two antioxidants, aesculeitin and taurine, expression of apoptosis related genes and antioxidant enzyme gene in preimplantation Hanwoo embryos was determined by modified semi-quantitative single cell RT-PCR. Hanwoo embryos derived from in vitro maturation /in vitro fertilization were cultured in 5% CO₂ and 5% O₂ in CR₁aa medium at 37℃. Aesculeitin and taurine were added to medium at concentration of l㎍/㎖ and 2.5mM, respectively. (omitted)

Sphingosine-1-phosphate(S1P) is one of the sphingolipid metabolites which affect a variety of cellular processes including the proliferation, differentiation, growth, survival, migration and gene expression. The present study was undertaken to investigate the effect of SIP on nuclear maturation of porcine oocytes. In vitro maturation frequency of porcine oocytes were compared in three different media; group Ⅰ: NCSU23＋0.1% PVA, group Ⅱ: NCSU23＋10% PFF(porcine follicular fluid), and group Ⅲ: NCSU23＋10% PFF＋10 ng/㎖ EGF＋2.5 mM β-mercaptoethanol. Each group containing 0.1 ㎎/㎖ cysteine was divided into 4 sub-groups of SIP concentration(0, 50, 500 and 5000nM). Porcine oocytes were incubated in each maturation medium supplemented with hormones(10 IU/㎖ PMSG and 10 IU/㎖ hCG) for 22h and then further cultured in the same medium without the hormones for 22h. After completion of in vitro maturation, the oocytes were fixed and stained to examine nuclear maturation by using a rapid stain method. In the group Ⅰ, the proportions of metaphase Ⅱ stage among oocytes cultured in 0nM(control), 50 nM, 500nM and 5000nM S1P were 45.5%, 66.7%, 56.6% and 48.7%, respectively. (omitted)

Our previous study has suggested that muscarinic receptor present in the mouse oocytes, and Ca/sup 2+/ waves elicited by acetylcholine (ACh) are similar to those induced by sperm. A numerous study reported that ACh could cause early activation events in mouse oocytes overexpressing the Ml muscarinic receptor (Williams et al., 1992; Moore et al., 1993; Kim et al., 1998). However, the physiological role of ACh during mouse embryonic development is poorly understood. (omitted)

Oocytes maturation, characterized by germinal vesicle (GV) breakdown, formation of the first meiotic spindle, expulsion of the first polar body and arrest in metaphase of second meiotic division (MII), occurs in preovulatory follicles in response to the surge of gonadotropin and leads to an ovulated oocyte in vivo. However, meiotic resumption in vitro occurs spontaneously following removal of cumulus-oocytes complexes (COCs) from the follicle. (omitted)

돼지 난포란의 체외성숙, 수정 및 배양에 관한 연구는 생명공학 기술을 도입하기 위한 기반 기술로 최근까지 계속 진행되고 있으나, 돼지 난포란을 이용한 효율적인 수정란 생산은 불규칙적인 웅성전핵 형성율과 높은 다정자 침입율 그리고 체내에서 발달된 배반포에 비하여 적은 세포수는 돼지 체외수정 체계에 있어서 끊임없는 문제점으로 제기되고 있다. 따라서 본 연구에서는 난포란을 이용한 보다 효율적인 수정란 생산을 위하여 돼지난자의 체외수정시 정자의 adenylate cyclase 활성을 조절하여 수정능획득 및 자발적인 첨체반응을 조절하여 정상적인 수정을 돕는 것으로 알려진 ADP를 체외수정 배양액에 첨가했을 때 수정율, 다정자 침입율, 배발달율 및 배반포의 세포수에 미치는 영향을 조사하였다. (중략)

This study was undertaken to evaluate the effects of β-mercaptoethanol on lipid peroxidation and fertilization ability in vitro by xanthine (X)-xanthine oxidase (XO) system in boar spermatozoa frozen-thawed. When spermatozoa were inseminated in medium with X and/or XO, the penetration rates in all conditions were higher in medium with that than without β-mercaptoethanol. However, significant differences were not observed between medium with and without β-mercaptoethanol. The lipid peroxidation of sperm was evaluated on the basis of malondialdehyde (MDA) production. (omitted)

한우의 사육규모가 다두화 된 농가에서 전년도 발정제어 처리에 따라 수태한 임신우의 분만내역과 차기번식에 미치는 영향을 규명하고자 수행하였다. 1. 발정유기방법별 계절번식처리우의 분만율은 PGF₂α구에서 73%(73/100), PRID 구에서 73.3%(22/30), CIDR 구에서 76.6%(23/30), GnRH-PGF₂α-GnRH 처리구에서 81%(81/100)였으며 전체적으로 76.5%(199/260)로 나타났다. 2. 계절번식농가의 자연발정 수정구에서 암송아지는 23.9㎏, 수송아지는 26.2㎏인 반면에 발정유기구에서는 암송아지는 24㎏, 수송아지는 24.9㎏로써 생시체중에 거의 차이를 보이지 않았고, 4개월령 체중에서 자연발정 수정구에서 암송아지 72㎏, 수송아지 75㎏인 반면에 발정유기구에서는 암송아지 75.6㎏, 수송아지 78.3㎏으로 발육상에 특별한 차이가 나타나지 않았다. 3. 다두사육농가의 자연발정 수정구에서 송아지 육성율은 86.5%(251/290)이였으며, 발정제어처리구에서는 87.0%(175/201)로써 유사한 경향을 나타내었으나 농가의 사육경험에 따라 6년 이상에서는 84.0%(105/125)였고, 10년 이상에서 88.4%(146/165)로써 사육경험이 많을수록 육성율이 우수하였다. 4. 발정유기방법별 분만후 발정재귀일수는 대조구에서 80.7일, PGF₂α 구에서 92.3일, PRID 구에서 78.5일, CIDR 구에서 64.5일, GnRH-PGF₂α-GnRH 처리구에서 65.6 일로 나타났고 분만 후 수태일수는 대조구에서 137.1일, PGF₂α 구에서 147.6 일, PRID구에서 141.3일, CIDR구에서 116.6일, GnRH-PGF₂α-GnRH 처리구에서 118일로 나타났으며 평균 134.3일이었다.

본 연구는 Se과 Vit. E 투여수준이 한우 종빈우 번식효율에 미치는 영향을 규명하기 위하여, 한우 종빈우의 임신말기에 적정량의 Se와 Vit .E를 투여하여, 종빈우의 혈액화학치 변화 및 혈중 Vit. E 농도변화를 규명하였다. 1. 분만 1개월 전 Se 과 Vit. E 투여가 한우 종빈우의 혈액성분에 미치는 영향을 검토한 결과, 평균 혈중 albumin 과 calcium 함량은 각각 투여구가 대조구보다 유의적으로 높았으며 (P＜0.05), 평균 혈중 IP 함량은 각각 Se 과 Vit. E 혼합투여구가 여타구보다 높은 성적을 나타냈다 (P＜0.05). 그러나 평균 혈중 BUN, creatinine, glucose, cholesterol 및 triglycerides 의 함량은 처리구간 유의적인 차이가 인정되지 않았다 (P＞0.05). 2. 분만 2개월 전 Se과 Vit. E 투여가 한우 종빈우의 혈액성분에 미치는 영향을 검토한 결과, 혈중 평균 albumin, BUN, cholesterol, creatinine, glucose, IP, TP, triglycerides 및 Ca 함량은 처리구간 유의적인 차이는 인정되지 않았다 (P＞0.05). 3. 한우 종빈우의 분만 l 개월전 Se 및 Vit. E 투여가 한우 종빈우의 혈중 Vit. E 농도에 미치는 영향을 검토한 결과, 평균 혈중 Vit. E 농도는 투여구가 대조구보다 다소 높은 농도를 나타냈으나, 처리구간 유의적인 차이는 인정되지 않았다 (P＞0.05). 4. 한우 종빈우에서 분만 2 개월전 Se 및 Vit. E 투여가 혈중 Vit. E 농도에 미치는 영향을 검토한 결과, 평균 혈중 Vit. E 농도는 처리구간 유의적인 차이가 없었으며 (P＞0.05), 처리구간 투여횟수의 증가에도 불구하고 혈중 Vit. E 농도는 커다란 차이가 없었다.atform by investigating current and future e-business services platforms involved in domestic and global international banks. Several financial interchange standards which are involved in B2B business of e-procurement, e-placement, e-payment are also investigated.. monocytogenes, E. coli 및 S. enteritidis에 대한 키토산의 최소저해농도는 각각 0.1461 mg/mL, 0.2419 mg/mL, 0.0980 mg/mL 및 0.0490 mg/mL로 측정되었다. 또한 2%(v/v) 초산 자체의 최소저해농도를 측정한 결과, B. cereus, L. mosocytogenes, E. eoli에 대해서는 control과 비교시 유의적인 항균효과는 나타나지 않았다. 반면에 S. enteritidis의 경우는 배양시간 4시간까지는 항균활성을 나타내었지만, 8시간 이후부터는 S. enteritidis의 성장이 control 보다 높아져 배양시간 20시간에서는 control 보다 약 2배 이상 균주의 성장을 촉진시켰다.차에 따른 개별화 학습을 가능하게 할 뿐만 아니라 능동적인 참여를 유도하여 학습효율을 높일 수 있을 것으로 기대된다.향은 패션마케팅의 정의와 적용범위를 축소시킬 수 있는 위험을 내재한 것으로 보여진다. 그런가 하면, 많이 다루어진 주제라 할지라도 개념이나 용어가 통일되지 않고 사용되며 검증되어 통용되는 측정도구의 부재로 인하여 연구결과의 축적이 미비한 상태이다. 따라서, 이에 대한 재고와 새로운 방향 모색이 필요하다고 사료된다.로 사료되며, 임신관련 cytokine에 대한 다양한

본 실험은 한우 종빈우의 임신말기에 Se과 Vit. E 투여가 종빈우의 분만 후 번식기능에 미치는 요인을 검토하였고, 임신말기 Se과 Vit. E 를 투여한 한우 종빈우에서 태어난 송아지의 발육능력을 조사하고, 혈액화학치와 혈중 Vit. E 농도에 미치는 영향을 검토하였다. 1. 분만 l 개월전 Se과 Vit E 을 투여한 한우 종빈우에서 태어난 송아지의 발육성적을 조사한 결과, 생시체중은 투여구가 대조구보다 높은 성적을 나타냈다 (P＜0.05). 또한 이유시 체중과 일당증체량도 투여구가 대조구 보다 다소 높은 성적을 나타냈으나 처리구간 유의적인 차이는 인정되지 않았다 (P＞0.05). 한편 종빈우의 번식능력을 조사한 결과, 투여구가 대조구보다 초발정이 빨리 도래하였고, 수태 당 인공수정 횟수도 적었으나, 처리구간 유의적인 차이는 인정되지 않았다 (P＞0.05). 2. Se과 Vit. E를 분만 2 개월전 4 회 투여한 한우 종빈우로부터 태어난 송아지의 발육성적을 조사한 결과, 생시체중, 이유시체중 및 일당증체량은 투여구가 대조구보다 높은 성적을 나타냈으나, 처리구간 유의적인 차이는 인정되지 않았다 (P＞0.05). 한편, 한우 종빈우의 번식능력을 조사한 결과, 분만 후 초발정은 투여구가 대조구보다 초발정 발현이 빨랐으며 수태 당 인공수정 횟수는 투여구가 대조구에 비해 적었으나 처리구간 유의적인 차이는 인정되지 않았다 (P＞0.05). 3. Se과 Vit. E를 분만 1개월전 2 회 투여한 한우 종빈우에서 태어난 송아지의 혈액성분에 미치는 영향을 검토한 결과, 평균 혈중 albumin 은 Vit. E 2000IU 투여구가 여타구보다 높은 성적을 나타냈으며 (P＜0.05), 평균 혈중 cholesterol이 함량 또한 Vit. E 1500IU 투여구가 여타구보다 높게 나타났다 (P＜0.05). 그러나 혈중 BUN, creatinine, glucose, IP, calcium, TP 및 triglycerides 함량은 처 리 구간 유의 적 인 차이 는 없었다 (P＞0.05). 4. Se과 Vit. E를 분만 2 개월 전 4 회 투여한 한우 종빈우에서 태어난 송아지의 혈액성분에 미치는 영향을 검토한 결과, 평균 혈중 albumin, cholesterol, BUN, creatinine, glucose, IP, calcium, TP 및 triglycerides 함량은 모든 처리구에서 유의적인 차이가 인정되지 않았다 (P＞0.05). 5. 분만 l 개월 전 Se과 Vit. E를 투여한 한우 종빈우로부터 태어난 송아지의 혈중 Vit. E 농도를 측정한 결과, 평균 혈중 Vit. E 농도는 투여구가 대조구보다 다소 높은 농도를 나타냈으나 처리구간 유의적인 차이는 없었다 (P＞0.05). 6. 분만 2 개월 전에 Se과 Vit. E를 투여한 한우 종빈우로부터 태어난 송아지의 혈중 Vit. E 농도에 미치는 효과를 검토한 결과, 투여구가 대조구보다 다소 높은 농도를 나타냈으나 처리구간 커다란 차이는 없었다 (P＞0.05).

Meat type 의 돼지 개량으로 체조직내 지방함량의 감소에 의하여 종빈돈의 번식성적 저하 및 경제수명이 단축됨에 따라 후보종빈돈의 등지방 두께가 첫발정 및 첫수정 시기에 미치는 영향을 조사하여 후보종빈돈의 번식관리 기술개발에 기초자료로 활용코자 하였다. 공시축은 충남 천안시 소재 중소규모의 양돈장에서 사육하고 있는 후보종빈돈 47두에 대하여 첫 발정일령 및 첫수정일령의 조사와 등지방 두께를 측정하였다. 첫발정일령은 등지방 두께가 13 -16㎜일 때 생후 182.1±17.3일, 17-20㎜일 때 생후 173.0±18.4일, 21-22㎜일 때 생후 162.2±17.8 일로 등지방 두께가 앓을 수록 첫발정시기가 늦어졌다. 첫수정일령은 등지방 두께가 13-16㎜일 때 생후 211.8±14.8 일, 17-20㎜일 때 생후 203.0±24.3일, 21-23㎜ 일 때 생후 195.4±13.2일로 등지방 두께가 밟을 수록 첫수정 시기가 늦어졌다. (중략)

가축의 개량에 있어서 수정란이식은 인공수정보다 획기적으로 향상시킬 수 있었으며, 첨단기술 이용 가축 생산에 필수도구이다. 그러나 수정란의 상태에 따른 수태율에서 큰 차이를 보이고 있어, 수태율 향상 개발이 시급한 실정이다. 임신중기의 IGF-Ⅰ의 농도는 비임신기보다 증가하고, 산욕기에 급격히 감소하여 비임신기의 농도이하로 떨어지는 특징이 있어 임신관련 기전을 이해하는데 도움이 될 수 있다. (중략)

소의 황체 조직내 임신특이단백질의 유무를 확인하기 위하여 도축장 유래의 난소 황체를 Ireland 등 (1980) 의 방법에 따라 발정주기중의 황체를 CLl(발정주기 1-4 일), CL2( 발정주기 5-10 일), CL3( 발정주기 11-17 일), 및 CL4(발정주기 18-20일)로 분류하였고 임신 황체는 임신일령을 추정하여 분류하였다. 황체 조직의 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis를 위하여 native binding buffer(20mM sodium phosphate, 500mM sodium chloride, pH 7.8) 에서 homogenization 한 후 원심분리하여 상층액을 이용하였다. (중략)

The deer was inseminated at the breeding season, which only shows appearance of the estrus cycles. Early diagnosis of pregnancy is very useful to select non-pregnant does and also very important to decide re-inseminations or mating for producing of calves. Therefore, for the development of techniques on the early diagnosis of pregnancy of deer, the results of this study were summarized as following. (omitted)

The Wnt signaling pathway plays pivotal roles in embryonic development and oncogenesis through various signaling molecules inculding Frizzled receptor, recently characterized LRP5/6 and Dickkopf protein. Although Wnt signaling has been characterized in both developmental and oncogenic processes, little is known about its function in the normal adult. The ability of LRP5 to bind apolipoprotein E(apoE) and the abundant expression of LRP5 transcripts in hepatocytes, raise the possibility that LRP5 plays a role in the hepatic clearance of ApoE-containing chylomicron remonants, a major plasma lipoprotein carrying diet-derived cholesterol. (omitted)

This study was to compare the characteristics of parthenogenetic mES (P-mES) cells and in vitro fertilization mES cells. Mouse oocytes were recovered from superovulated 4wks hybrid F1 (C57BL/6xCBA/N) female mice. The oocytes were treated with 7% ethanol for 5 min and 5 ㎍/㎖ cytochalasin-B for 4 h. For IVF, the oocytes were inseminated with epididymal sperm of hybrid Fl male mice (1×10/sup 6//㎖). IVF and parthenogenetic embryos were cultured in M16 medium for 4 days. Cell number count in blastocysts was carried out differential labelling using propidium iodide (red) and bisbenzimide(blue). (omitted)

This study was to investigate generation of the specific neuronal cell in vitro from the neural progenitors derived from human embryonic stem (hES, MB03) cells. For the neural progenitor cell formation, we produced embryoid bodies (EB: for 5 days, without mitogen) from hES cells and then neurospheres (for 7-10 days, 20 ng/㎖ of bFGF added N2 medium) from EB. And then for the differentiation into neuronal cells, neural progenitor cells were cultured in N2 medium (without bFGF) supplemented with brain derived neurotrophic factor (BDNF, 5 ng/㎖) or platelet derived growth factor-bb (pDGF-bb, 20ng/㎖) for 2 weeks. (omitted)

As an effort to direct differentiation of human embryonic stem cells (hES, MB03) to dopamine-producing neuronal cells, we expressed Nurr-l in hES and examined the expression of tyrosine hydroxylase (TH) after bFGF induction. To introduce Nurr-l, hES cells were maintained in humidified chamber with 5% CO₂ and 95% air in DMEM/Fl2 supplemented with FBS (10%), penicillin (100U/㎖), and streptomycin (100㎍/㎖). (omitted)

To examine the feasibility of using a sperm vector system for gene transfer, we have investigated the binding and the uptaking of foreign DNA into the sperm nucleus by PCR, in situ hybridization and LSC. We have also examined the transportation of exogenous DNA into oocytes by immunofluorescene via PCR. Sperm cells were incubated with DNA/liposome complexes (1:4 ratio) in fertilization medium with BSA or without BSA. (omitted)

Previously, we observed high level expression of goat β-casein/genomic hGH fusion gene in mammary gland of transgenic mice. To develop an expression vector to make a human granulocyte-colony stimulating factor (hG-CSF) protein efficiently produced in milk of transgenic animals, we designed a new bicistronic vector using the goat β-casein/genomic hGH fusion gene as regulation sequences for expression and internal ribosome entry site (IRES) as a mediator for second gene expression. This vector was constructed by insertion of encephalomyocarditis virus (EMCV) IRES-dependent second gene region coupled with hG-CSF cDNA into 3' untranslated region of an intact hGH gene. By microinjcetion, four transgenic mice were generated and three of them transmitted the bicistronic vector to their progeny. (omitted)

Erythropoietin (EPO)는 조혈작용 (erythropoiesis)을 나타내는 호르몬으로서 사람의 빈혈치료제로 사용되며, 포유통물 중 사람, 생쥐 등의 유즙 내에 혈청 EPO 와 동일한 크기로 다량으로 존재한다고 보고된 바 있다. 생쥐의 WAP promoter를 이용하여 사람의 조혈촉진제인 EPO를 유즙으로 생산하는 형질전환돼지 (새롬이)의 유즙을 분석하기 위해 SDS-PAGE와 Western blotting 을 수행하였다. 먼저, 형질전환돼지의 유즙으로부터 원심분리에 의해 지방층을 제거한 후, 16.5% polyacrylamide gel 에서 PAGE를 수행하였다. (중략)

In this study, we examined transmission efficiency and expression level of the transgenes in the transgenic mice. The transgenic lines secreting a considerable amount of human lactoferrin(LF) thrombopoietin(TPO), interleukin-10(IL-10) into their milk were subjected to access the inheritance and maintenance of transgenic phenotype. They were bred through three generations. The transmission frequency for each generations(F9, F10, F11) of 3 lines was 38.03±10.43%(13/35), 48.33±3.76%(19/39) and 31.83±8.88%(9/28) in the LF line, 51.33±18.98%(20/38), 63.70±35.71%(12/20) and 29.57± 15.05%(8/26) in the TPO line, 38.27±17.74%(15/37), 47.47±29.88%(14/28) and 50.87±5.85%(14/28) in the IL-10 line, respectively. (omitted)

In this study, we report the cloning of the porcine UPII genomic DNA, which contains a putative full-length open reading frame encoding the UPII protein. A comparison of the porcine UPII gene coding sequence with the previously published mouse UPII sequence demonstrates that only the exon sequences are partially conserved. Northern and immunohistochemical analyses show that the porcine UPII gene is expressed only in the urothelium and that the protein specifically localizes to urothelial superficial cells. (omitted)

There are many methods to introduce exogenous DNA into embryo for the purpose of producing transgenic animals. Exogenous gene can be integrated into oocyte as a form of sperm vector. In this study, sperm was used as a vector for transgene that is enhanced green fluorescent protein (EGFP). The objective of this study was to investigate the expression of exogenous gene in bovine embryos after injection of spermatozoa cocultured with EGFP fragment. Spermatozoa were plunged into liquid nitrogen and thawed several times or shaked in 0.2% Triton X-100 to remove sperm membrane which followed by DTT treatment. (omitted)

The neuropeptide vasopressin (VP) is a nine- amino acid hormone synthesized as preprohormone in the cell bodies of hypothalamic magnocellular neurons. The tumor in magnocellular neurons of the hypothalamus is associated with disfunctions of the cell bodies, leading to the diabetes insipidus. In order to produce the disease models with a defect in VP synthesis and its secretion, we have produced the transgenic mice regulated by VP constructs containing 3.8 kbp of the 5'flanking region and all the exons and introns in the mouse VP gene, which was fused at the end of exon 3 to a SV40 Tag. The two VP-transgene constructs differed by the lengths of their VP gene 3' flanking regions (2.1 versus 3.6 kbp). (omitted)

The utility of transgenic animal for studying the function of a particular gene in the breast system has been limited because transgenic typically occurs constitutively throughout development and in most tissue. So we use the inducible gene expression system. Several inducible gene expression system have been developed in vitro in recent years to overcome limitation with transgenic mice. (omitted)

Increasing competition in the livestock industry has forced producers to cut costs by adopting new technologies aimed out increasing production efficiency. Non-ruminant livestock do not express fibrolytic enzymes. The major plant cell wall components of cereals, primarily β-glucans and arabinoxylans, form gel-like structures in the small intestines that trap nutrients. The viscous polysaccharides can also cause severe gastrointestinal disorders. (omitted)

Transgenic rabbits were produced by micoinjection of DNA containing metallothionein promoter ligated to growth hormone receptor (GHR) and IGF-l receptor (IGF-lR) genes. Founder transgenic rabbits transmitted transgenes into pups with Medelian ratio. The mRNA expression of transgenes using Northern blotting with probes of IGF-IR and GHR genes was checked in liver of transgenic rabbits. Transgenic rabbits with IGF-IR and GHR genes more expressed mRNA than control non-transgneic rabbits. (omitted)

상동유전자 재조합기술을 myostatin 유전자에 적용하기 위해 돼지 골격에 붙어 있는 근육으로부터 RNA를 추출하였고 돼지 Myostain Exon 3 부위의 specific primer를 제작하여 RT-PCR 을 수행 한 후 증폭된 342bp DNA 를 추출하여 T vector 에 ligation한 후 sequencing을 실시하여 돼지 genomic DNA 에서 Myostatin gene 의 Exon 3 부위와 100% match 되는 것을 확인하였다. (omitted)

Achieving of in vitro development for mammalian premature spermatogenic cells are very difficult. In-vitro culture of spermatogenic cells were then initiated in an effort to try to study in vivo spermatogenesis and to understand its molecular events. Recently, the morphogenetic changes of spermatocytes or spermatid by in-vitro culture system were achieved. (omitted)