전국의 고추 재배지에서 1999년과 2002년에 채집한 병든 고추로부터 각각 130개와 258개의 고추 탄저병균을 분리한 후, 4종의 보호용 살균제와 3종의 ergosterol생합성 저해 살균제에 대한 균사 생장 저해 정도를 측정함으로서 살균제들에 대한 저항성 모니터링을 실시하였다. 1999년에 분리한 균주는 세 가지 보호용 살균제, 즉 dithianon, chlorothalonil 및 propineb에 대해서는 2002년의 균주보다 더 저항성을 보였다. 이에 반하여 다른 보호용 살균제인 iminoctadine에 대해서는 오히려 2002년의 균주가 더 저항성인 것으로 나타났다. 세 개의 ergosterol 생합성 저해(EBI) 살균제, 즉 tebuconazole, hexaconazole 및 prochloraz에 대해서는 2002년의 균주가 1999년의 균주보다 더 저항성이 컸으며, 2002년도의 균주들의 $EC_{50}$ 값은 1999년 균주들보다 1.2배 내지 4.4배가 높았다 위의 살균제들에 대한 탄저병균의 반응을 보면, 채집한 지역 간에 저항성을 차이가 크게 나타나고 있었다. 단기간내에 충북에서 분리한 균주들은 채집한 시기가 늦어질수록, 고추의 생육 초기에 주로 많이 사용되는 보호용 살균제들에 대한 $EC_{50}$값은 감소하였다. 그러나 ergosterol 생합성 저해 살균제에 대한 균주들의 반응은 정해진 생육 기간 중에는 변화가 거의 없었다.
Colletotrichum contains many important pathogens which cause economically significant diseases of crops like pepper, strawberry, tomato and apple. Forty four isolates were collected to characterize the diversity of Colletotrichum causing apple anthracnose in various regions of Korea. They were analyzed by random amplified polymorphic DNA (RAPD), internal transcribed spacer (ITS) of rDNA and partial $\beta$-tubulin gene DNA sequence, and culture characteristics on PDA and PDA-Benomyl. From the results of molecular analyses, 31 strains belonged to Colletotrichum gloeosporioides, ribosomal DNA group (RG) 4 of Moriwaki et al. (2002), 8 strains belonged to C. acutatum, A2 group of Talhinhas et al. (2005) and 5 strains to C. acutatum, A3 group of Talhinhas et al. (2005). Most isolates of C. gloeosporioides RG4 grew faster on PDA than strains of C. acutatum, A2 and A3 groups and most RG4 strains were sensitive to Benomyl. However, a few strains of RG4 grew slower and were resistant to Benomyl. On the basis of molecular characteristics, apple isolates of C. acutatum were clearly differentiated from red pepper isolates of the species, but apple isolates of C. gloeosporioides were not.
본 연구는 고추 논 비가림재배 시 비가림형태가 생육 및 수량에 미치는 영향을 구명코자 수행하였다. 시험품종은 '금마루' 이었다. 비가림형태는 노지(대조구), 간이비가림(2줄재배, 2R), 간이비가림(4줄재배, 4R), 하우스(House) 등 4처리를 하였다. 초장은 House 처리에서 가장 우수하였으며, 엽장과 엽폭은 비가림형태간에 차이가 없었다. 생과중과 건과중은 House > 4R > 2R > 대조구순으로 많았다. ASTA 값은 처리간에 일정한 경향을 나타내지 않았다. 역병, 흰가루병, 세균성점무늬병은 전혀 발생하지 않았고, 탄저병은 노지에서만 발생하였다. 응애, 총체벌레, 담배가루이는 모든 처리에서 발생하지 않았다. 진딧물, 담배나방, 바이러스는 모든 처리에서 동일한 수준으로 발생하였다. 본 연구에서 얻어진 결과는 고추 비가림재배는 건고추 수량 및 상품성 증대뿐만 아니라 병해충의 발생 감소시킬 것으로 기대된다.
고추의 주요 병해충인 총채벌레(Thrips palmi)와 탄저병(Colletotrichum acutatum)을 방제하기 위해 다양한 화학농약이 사용되고 있지만, 농약의 오남용으로 인하여 이에 대한 저항성이 발생하여 방제가 힘들어지고 환경오염을 초래하는 문제가 있다. 그리하여 본 연구에서는 이러한 문제를 극복하고자 총채벌레에 대한 살충효과와 탄저병에 항균력이 우수한 균주를 선발하여 동시 방제의 가능성을 확인하고자 하였다. 토양으로부터 분리한 곤충병원성 곰팡이 13균주($1{\times}10^7conidia/mL$)를 오이총채벌레 성충과 약충에 처리하여 70~100%의 우수한 살충률을 나타내는 6균주를 선발하였다. 선발한 6균주의 항균활성을 검정하기 위하여 고추 탄저병균에 대치 배양한 결과, 항균력이 우수한 FT333 균주를 최종 선발할 수 있었다. 최종 선발된 균주를 형태학적 조사와 internal transcribed spacer, ${\beta}-tubulin$ 영역의 염기서열 분석을 통하여 Isaria javanica로 동정하였고, I. javanica FT333으로 명명하였다. I. javanica FT333 (KACC93316P)의 고추 탄저병균에 대한 방제 효과를 기내에서 검정한 결과($1{\times}10^5$, $1{\times}10^6$, $1{\times}10^7conidia/mL$) 95% 이상의 방제효과를 나타내었다. 이러한 결과들을 바탕으로 I. javanica FT333 균주가 고추 탄저병균과 미소해충인 오이총채벌레를 동시에 방제하기 위한 미생물제제로서 이용될 수 있는 가능성을 제시하였다.
Agrobacterum tumefaciens-mediated transformation (ATMT) is becoming an effective system as an insertional mutagenesis tool in filamentous fungi. We developed and optimized ATMT for two Colletotrichum species, C. falcatum and C. acutatum, which are the causal agents of sugarcane red rot and pepper anthracnose, respectively. A. tumefaciens strain SK1044, carrying a hygromycin phosphotransferase gene (hph) and a green fluorescent protein (GFP) gene, was used to transform the conidia of these two Colletotrichum species. Transformation efficiency was correlated with co-cultivation time and bacterial cell concentration and was higher in C. falcatum than in C. acutatum. Southern blot analysis indicated that about 65% of the transformants had a single copy of the T-DNA in both C. falcatum and C. acutatum and that T-DNA integrated randomly in both fungal genomes. T-DNA insertions were identified in transformants through thermal asymmetrical interlaced PCR (TAIL-PCR) followed by sequencing. Our results suggested that ATMT can be used as a molecular tool to identify and characterize pathogenicity-related genes in these two economically important Colletotrichum species.
In a search for plant extracts with in vivo antifungal activity for plant diseases, we found that the methanol extract of Myristica malabarica fruit rinds effectively suppressed the development of several plant diseases. The methanol extract exhibited potent 1-day protective activity against rice blast, tomato late blight, wheat leaf rust and red pepper anthracnose. It also showed 7-day and 4-day protective activities against the plant diseases. Three antifungal resorcinols were isolated from the methanol extract of M. malabarica fruit rinds and identified as malabaricones A(MA), B(MB), and C(MC). Inhibitory activity of the three resorcinols against mycelial growth of plant pathogenic fungi varied according to compound and target species. All three compounds effectively reduced the development of rice blast, wheat leaf rust and red pepper anthracnose. In addition, MC was highly active for reducing the development of tomato late blight. This is the first report on the antifungal activities of malabaricones against filamentous fungi.
본 시험은 고추의 육종을 위한 병 저항성 고추를 선발하고자 하였다. 국내에서 시판중인 역병 저항성 품종인 PR계통 21품종, 미국에서 도입해온 36품종과 역병감수성 품종인 '슈퍼마니따'를 사용하여 역병, 탄저병, 흰가루병의 병 저항성 검정을 수행하였다. $Phytophthora$$capsici$에 의해 발병하는 고추역병의 유묘검정은 서로 다른 교배형(A1, A2, Sterile)을 가지는 3 균주를 사용하여 접종하였다. 그 결과 대부분의 PR계통 고추들은 각각의 교배형에 대하여 저항성 또는 중도저항성을 나타내는 것으로 조사되었다. '역강홍장군'은 서로 다른 교배형의 세 가지 균주에 대하여 저항성을 나타냈으며, 'PR-다따'와 'PR-마니따'는 각각의 교배형에 저항성 또는 중도저항성을 보였다. 외래종의 경우, 'NuMex J.E.Parker', 'Omni Color'과 'SCM-334' 품종은 세 가지 균주에 저항성을 나타냈고, 'Sweet Banana'와 'Tabasco'를 포함한 몇몇 품종들은 각각의 균주에 중도저항성을 나타냈다. 흰가루병에 대하여 'Orange Habanero', 'black Cuban'은 저항성을 나타냈으며, '슈퍼마니따'와 'PR 금동'은 중도저항성을 나타냈다. 'Santa Fe Grnade', 'NuMex Pinata' 품종은 흰가루병에 매우 심한 감수성인 것으로 조사되었다. 탄저병의 경우, 'Aji Limon'과 'C. baccatum var. pendelum 3-4' 품종은 저항성인 것으로 조사되었다. 'Pobalno', 'Omni Color', 'Negro', 'Mesilla', 'Mulato', 'Bhut Jolokia', 'Big Dipper', 'Black Cuban', 'NuMex Pinata'와 'NuMex Big Jim'은 중도저항성을 나타내는 것으로 조사되었다. '태산'을 제외한 대부분의 PR계통들은 탄저병에 대하여 감수성 내지 심한 감수성인 것으로 확인되었다. 본 연구에서 확인된 저항성 개체는 이후에 고추 병저항성 육종에 유용한 유전자원으로 이용될 수 있다.
고추탄저병 이병과에서 분리한 Colletotrichum gloeosporioides Penz.의 48개 단포자분리균주를 풋소추와 붉은 고추에 대한 병원성, 분성포자의 형태, PDA배지에서의 배양적 특성에 다라 계통G와 계통R로 분류하였다. 풋고추와 붉은 고추에서 탄저병징을 일으키는 계통 G의 모든 균주들은 PDA배지에서 분생포자를 많이 형성하였으나, 자양각과 강모는 전혀 형성하지 않았다. 계통 G에 속에서 모든 균주들의 분생포자는 한쪽 끝이 좁거나 둥글었다. 계통G의 균사생장 적온은 $26^{\circ}C\~28^{\circ}C$였다. PDA배지에서 자라는 계통G의 균총 색깔은 배양초기에는 흰색이다가 배양기간이 길어짐에 따라서 어두운 색깔을 띠었다. 계통G에 의하여 고추열매에 형성된 탄저병징은 다소 움푹 들어간 원형내지 타원형의 병반이고, 병반 중앙에 황색의 분생포자 덩어리가 형성되며, 병이 진전됨에 다라서 병반은 적갈색을 띤 부정형으로 되었다. 그리고 포자층위 강모가 형성되지 않았다. 붉은 고추에서만 탄저병징을 일으키는 계통R의 모든 균주들은 PDA배지에서 분생포자와 Glomerella cingulata(Stonem.) Spauld & v. Sch.의 자양각을 형성하였으며, 일부 균주가 형광등조사배양에서 강모를 형성하였다. 계통R에 속하는 모든 균주들의 분생포자는 양끝이 둥글고 무디었다. PDA배지에서 계통R의 균사생장 적온은 계통G의 균사생장 적온과 같았으나, 계통R의 균사생장 속도는 계통G의 균사생장 속도보다 빨랐다. PDA배지에서 자라는 계통R의 균총 색깔은 탄색내지 어두운 색깔이었다. 계통R에 의하여 고추열매에 형성된 탄저병징은 원형 내지 부정형의 검은 륜문 병반이고, 포자부위에 짧은 강모가 형성되거나 형성되지 않기도 하였다.
고추 탄저병균(炭疽病菌)(Colletrichum denzatium f. sp. capsicum)의 발아(發芽)에 미치는 영양원(營養源) 및 환경요인(環境要因)의 영향(影響)을 구명(究明)코져 slide 발아법(發芽法)으로 실시(實施)하여 얻어진 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 고추 탄저병균(炭疽病菌) 분생포자(分生胞子) 발아(發芽)의 온도범위(溫度範圍)는 $15{\sim}35^{\circ}C$ 이고 최적온도(最適溫度)는 $28^{\circ}C$, pH 범위(範圍)는 $4.5{\sim}8.0$이고 최적(最適) pH 는 5.5 였고 상대습도(相對濕度)는 포화(飽和)에 가까운 90% 이상(以上)의 상대습도(相對濕度)에서 발아율(發芽率)이 현저(顯著)히 좋았다. 2. 고추 탄저병균(炭疽病菌)의 포자발아(胞子發芽)는 PSB(potato sucrose broth), RPFD(red pepper fruit broth), GPFB(green pepper furit broth) 및 PLB (pepper leaf broth) 에서는 높은 발아율(發芽率)을 나타내었으나 살균증류수(殺菌蒸溜水)(D.W) 에서는 발아율(發芽率)이 현저(顯著)히 떨어지는 경향(傾向)이었다. 3. 탄소원(炭素源)과 질소원(窒素源)의 투여(投與)는 발아(發芽)에 절대적(絶對的)인 영향(影響)을 미치는 것으로 확인(確認)되었으며 K,P 및 S 등(等)의 무기염류(無機鹽類)는 뚜렷한 경향(傾向)을 보이지 않았다. 4. 탄소원(炭素源)이 발아(發芽)에 미치는 효과(效果)에서 단당류(單糖類)인 glucose 와 galactose 에서, 이당류(二糖類)인 lactose 에서 그리고 다당류(多糖類)인 가용성(可溶性) 전분(澱粉)에서 90% 이상(以上)의 높은 발아율(發芽率)을 나타내었다. 5. 현탁액(懸濁液)의 분생포자(分生胞子) 밀도(密度)가 $1{\times}10^4\;conidia/ml$ 일때 가장 높은 발아율(發芽率)을 나타내었고 $2{\times}10^4\;conidia/ml$ 이상(以上)일 때 발아율(發芽率)은 현저(顯著)히 감소(減少)되었으며 $5{\times}10^4\;conidia/ml$의 포자밀도(胞子密度)에서는 극(極)히 낮은 발아율(發芽率)을 보이는 것으로 미루어 포자밀도(胞子密度)의 증가(增加)가 self-inhibitor 로 작용(作用)하는 것으로 추측(推測)되며 기질(基質)을 제거(除去)한 분생포자(分生胞子)의 발아율(發芽率)은 기질(基質)을 제거(除去)하지 않은 분생포자(分生胞子)의 발아율(發芽率)보다 낮은 경향(傾向)을 보였으며 분생포자(分生胞子) 밀도(密度)가 증가(增加)할수록 더욱 현저(顯著)한 발아율(發芽率)의 감소(減少)를 가져왔다.
한국(韓國) 지방(地方) 재래종(在來種) 고추 9계통(系統)과 미국(美國) 식물(植物) 도입국계통(導入局系統)(PI) 34개(個) 계통(系統)을 공시(公試)하여 흑색(黑色) 병징(病徵)의 탄저병(炭疽病)(Colletotrichum dematium)에 대한 저항성(抵抗性)을 검정(檢定)하였다. 적열과(赤熱果)에다 침상후(針傷後) 병원균(病原菌) 현탁액(懸濁液)을 분무(噴霧)하는 방법(方法)과 점적(點滴)하는 방법(方法)으로 접종(接種)한후 침상부위(針傷部位)를 중심(中心)으로 형성(形成)된 병반(病班) 직경(直徑)을 측정(側定)하여 저항성(低抗性)을 평가(評價)한 결과(結果)는 다음과 같다. 1) PI 201232, PI 224451, PI 257044, PI 257119, PI 257099, PI 224433, PI 244668, PI 257102, PI 173877, 남지 청룡 서동 등(等)은 발병(發病)이 가장 적어 저항성(抵抗性)으로 사료(思料)된다. 2) PI 241670, PI 244670, PI 224423 등(等)은 발병(發病)이 가장 커 이병성(罹病性)으로 사료(思料)된다. 3) 기외(其外)는 중간(中間) 정도(程度)였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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