Activity-guided fractionation of the EtOAc-soluble extract of the stems of Couepia ulei, using a bioassay based on the induction of quinone reductase (QR) in cultured Hepa 1c1c7 mouse hepatoma cells led to the isolation of two active compounds, a new natural product, erythro-2,3-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-ethoxypropan-1-o1 (1), and a known compound, evofolin-B (2), along with five inactive compounds all of known structure, viz., betulinic acid, oleanolic acid, pomolic acid, ($\pm$)-syringaresinol, and ursolic acid. These isolates were identified by analysis of physical and spectral data. Compounds 1 and 2 exhibited QR inducing activity, with observed CD (concentration required to double induction) values of 16.7 and 16.4 $\mu\textrm{M}$, respectively.
The dense granule protein of Toxoplasma gondii, inhibitor of signal transducer and activator of transcription 1 (IST) is an inhibitor of signal transducer and activator of transcription 1 (STAT1) transcriptional activity that binds to STAT1 and regulates the expression of inflammatory molecules in host cells. A sterile inflammatory liver injury in pathological acute liver failures occurs when excessive innate immune function, such as the massive release of IFN-γ and TNF-α, is activated without infection. In relation to inflammatory liver injury, we hypothesized that Toxoplasma gondii inhibitor of STAT1 transcription (TgIST) can inhibit the inflammatory response induced by activating the STAT1/IRF-1 mechanism in liver inflammation. This study used IFN-γ and TNF-α as inflammatory inducers at the cellular level of murine hepatocytes (Hepa-1c1c7) to determine whether TgIST inhibits the STAT1/IRF-1 axis. In stable cells transfected with TgIST, STAT1 expression decreased with a decrease in interferon regulatory factor (IRF)-1 levels. Furthermore, STAT1 inhibition of TgIST resulted in lower levels of NF-κB and COX2, as well as significantly lower levels of class II transactivator (CIITA), iNOS, and chemokines (CLXCL9/10/11). TgIST also significantly reduced the expression of hepatocyte proapoptotic markers (Caspase3/8/9, P53, and BAX), which are linked to sterile inflammatory liver injury. TgIST also reduced the expression of adhesion (ICAM-1 and VCAM-1) and infiltration markers of programmed death-ligand 1 (PD-L1) induced by hepatocyte and tissue damage. TgIST restored the cell apoptosis induced by IFN-γ/TNF-α stimulation. These results suggest that TgIST can inhibit STAT1-mediated inflammatory and apoptotic responses in hepatocytes stimulated with proinflammatory cytokines.
The objective of this study was to investigate the anticancer effects of the extracts of oriental melon seeds. Various solvent extracts of oriental melon seeds were prepared and their anticancer effects were examined using in vitro MTT and CV assays. The anticancer effects of various extracts of oriental melon seeds were also examined in five human cancer cell lines including A549, AGS, HT-29, MCF-7 and HepG2. The ethanol extract of heated oriental melon seeds showed the potent cytotoxic effects especially against mouse hepatoma cell line(Hepa1c1c7), human hepatoma cell line(HepG2) and human breast cancer cell line(MCF-7). These data suggest that oriental melon seeds can be a promising anticancer agent against human liver and breast cancer.
Journal of Nuclear Fuel Cycle and Waste Technology(JNFCWT)
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v.8
no.4
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pp.319-327
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2010
A nuclear plant ESF ACS simulator was designed, built, and verified to perform experiment related to ESF ACS of nuclear power plants. The dimension of 3D CAD model was based on drawings of the main control room(MCR) of Yonggwang units 5 and 6. The CFD analysis was performed based on the measurement of the actual flow rate of ESF ACS. The air flowing in ACS was assumed to have $30^{\circ}C$ and uniform flow. The flow rate across the HEPA filter was estimated to be 1.83 m/s based on the MCR ACS flow rate of 12,986 CFM and HEPA filter area of 9 filters having effective area of $610{\times}610mm^2$ each. When MCR ACS was modeled, air flow blocking filter frames were considered for better simulation of the real ACS. In CFD analysis, the air flow rate in the lower part of the active carbon adsorber was simulated separately at higher than 7 m/s to reflect the measured value of 8 m/s. Through the CFD analyses of the ACSes of fuel building emergency ventilation system, emergency core cooling system equipment room ventilation cleanup system, it was confirmed that all three EFS ACSes can be simulated by controlling the flow rate of the simulator. After the CFD analysis, the simulator was built in nuclear grade and its reliability was verified through air flow distribution tests before it was used in main tests. The verification result showed that distribution of the internal flow was uniform except near the filter frames when medium filter was installed. The simulator was used in the tests to confirm the revised contents in Reg. Guide 1.52 (Rev. 3).
Son, Hye Jin;Koo, Bon Chul;Kwon, Mo Sun;Lee, Young Man;Kim, Teoan
Reproductive and Developmental Biology
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v.38
no.3
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pp.99-105
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2014
In this study, to further understand the mechanism of animal growth and to develop a miniature transgenic animal model, we constructed and tested tetracycline-inducible RNAi system using shRNA targeting the mRNA of mouse insulin-like growth factor (mIGF-1) or mouse growth hormone receptor (mGHR) gene. Quantitative real-time PCR analysis of mouse liver cell (Hepa1c1c7) cells transfected with these vectors showed 85% or 90% of expression inhibition effect of IGF-1 or GHR, respectively. In ELISA analysis, the protein level of IGF-1 in the cells expressing the shRNA targeting IGF-1 mRNA was reduced to 26% of non-transformed control cells. Unexpectedly, in case of using shRNA targeting GHR, the IGF-1 protein level was decreased to 75% of control cells. Further experiments are needed to explain the lower interference effect of GHR shRNA in IGF-1 protein. Accumulated knowledge of this approach could be applicable to a variety of related biological area including gene function study, gene therapy, development of miniature animals, etc.
We investigated the catechin content in green tea leaf (GTL) and green tea seed (GTS), the antiproliferative and detoxifying phase II enzyme-inducing activities of the methanolic (80%, v/v) extracts from GTL and GTS. GTL and GTS contained $8,685{\pm}1,061$ and $108{\pm}32\;{\mu}g/g$ epigallocatechin gallate (EGCG), $11,486{\pm}506$ and $116{\pm}72\;{\mu}g/g$ epigallocatechin (EGC), $3,535{\pm}308$ and $821{\pm}95\;{\mu}g/g$ epicatechin gallate (ECG), and $1,429{\pm}177$ and $37{\pm}44\;{\mu}g/g$ epicatechin (EC), respectively. The methanolic extract of GTS showed a greater increase in quinone reductase activity and antiproliferation potential against mouse hepatoma cells than GTL extract did. GTS treatment resulted in the accumulation at sub-G1 phase of mouse hepatoma hepa1c1c7 cells as assessed by flow cytometry. Enhancement of phase II enzyme activity by GTS extract was shown to be mediated, directly or indirectly, via interaction with the antioxidant response element (ARE) sequence in the genes encoding the phase enzymes. As the catechin content in GTS was significantly lower than that in GTL, components other than catechins appear to be responsible for the anticarcinogenic activity of the seed. In summary, these results suggest that the 80% methanolic extract of GTS deserves further study to evaluate its potential as an anticarcinogenic agent and to investigate its mechanism of action.
We analyzed antioxidant and quinone reductase (QR) inductive activities of various organs of pepper for utilizing by-product of them. Peppers were separated into fruits, roots, stems, and leaves and extracted with methanol for the analysis. As a result, pepper leaves showed higher phenol content than other organs. Using the DPPH assay, there was not considerably different activity depending on pepper organs, but pepper leaves showed significantly higher antioxidant activity using the ABTS assay. In FTC and TBA assay, stems and leaves showed significantly higher lipidperoxidation inhibitory activity. In QR inductive assay, pepper tissues showed different QR inductive activity: leaves>roots>>stems>fruits. In addition, pepper leaves showed highest antiproliferation activity on hepa1c1c7 among pepper tissues in $50-200\;{\mu}g/mL$. These results indicate that pepper leaves have high potential to be a good functional food material due to high QR inductive and antioxidant activities.
Activity-guided fractionation of the EtOAc-soluble extract of the whole plants of Sida acuta using a bioassay based on the induction of quinone reductase (OR) in cultured Hepa 1c1c7 mouse hepatoma cells, led to the isolation of ten active compounds of previously known structure, quindolinone (1), cryptolepinone (2), 11-methoxyquindoline (3), N-trans-feruloyltyramine (4), vomifoliol (5), loliolide (6), 4-ketopinoresinol (7), scopoletin (8), evofolin-A (9), and evofolin-B (10), along with five inactive compounds of known structure, ferulic acid, sinapic acid, syringic acid, ($\pm$)-syringaresinol, and vanillic acid. These isolates were identified by physical and spectral data measurement. A new derivative of quindolinone, 5,10-dimethylquindolin-11-one (1a) was synthesized and characterized spectroscopically. Of the active substances, compounds 1-3 and 1a exhibited the most potent QR activity, with observed CD (concentration required to double induction) values ranging from 0.01 to 0.12 $\mu$ g/mL. Six compounds were then evaluated in a mouse mammary organ culture assay, with cryptolepinone (2), N-trans-feruloyltyramine (4), and 5,10-dimethylquindolin-11-one (1a) found to exhibit 83.3, 75.0, and 66.7% inhibition of 7,12-dimethylbenz[a]anthracene-induced preneoplastic lesions, respectively, at a dose of 10 $\mu\textrm{g}$/mL.
Ku, Kang-Mo;Kim, Min-Gun;Hong, Mi-Jeong;Jeong, Yeon-Shin;Kim, Jeong-Sang;Lee, In-Jung;Shin, Dong-Hyun;Hwang, Young-Hyun;Kang, Young-Hwa
Food Science and Biotechnology
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v.18
no.3
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pp.624-629
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2009
In order to evaluate the bioactivity of 'Agakong3', which was newly bred, quinone reductase (QR) inductive activity and antioxidant activity were both assessed. The methanol extract of 'Agakong3' showed a significantly stronger QR inductive activity than other soybeans. The methanol extract of 'Agakong3' also showed a significantly stronger cytotoxicity on hepa1c1c7 than other soybeans. 'Agakong3' exhibited the most potent antioxidant activity in the Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) assay whereas it showed significantly weak antioxidant in the DPPH assay. In total phenol and flavonoid contents, 'Agakong3' showed the highest contents regarding phenol and flavonoid compounds. Major isoflavones such as daidzein and genistein were quantitified by high performance liquid chromatography. 'Agakong3' also showed the highest total isoflavone contents. Results of correlation analysis showed that there were high correlation coefficients between the contents of isoflavone and TEAC and the contents of isoflavone and QR inductive activity, respectively. These results suggest that 'Agakong3' will be a promising and functional food material.
Six fractions of Salvia miltiorrhiza were tested for their chemopreventive potentials using biochemical markers of carcinogenesis such as quinone reductase (QR), glutathione S-transferase (GST) and glutathione (GSH). Seventy percentage of EtOH extract was potent inducer of QR activity in Hepa1c1c7 murine hepatoma cells. GST activity was increased about 1.4-fold with EtOAc extract at concentration of 50 ${\mu}g/ml$. GSH levels were significantly increased with $H_2O$ extract, 70% EtOH extract and water extract at concentration of 50 ${\mu}g/ml$ (p<0.005). From these results, 70% EtOH extract (250 mg/kg) was intragastrically administered to ICR mice for 14 days. QR, GST and GSH levels were significantly increased with the 70% EtOH treatment. These studies suggest that the 70% EtOH extract of S. miltiorrhiza could be considered as a potential agent for cancer chemoprevention.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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