신경세포의 가지돌기 내 단백질합성은 필요한 단백질을 실시간으로 제공할 수 있는 이점을 제공한다. 본 연구에서는 단백질합성인자 eIF4E와 그 억제 단백질인 eIF4EBP1의 발생단계별 표현을 배양한 해마신경세포를 면역 염색하여 조사하였다. eIF4E는 가지돌기에 점박이 모양으로 표현되었으며, 핵에는 표현되지 않았다. 그러나 eIF4EBP1는 가지돌기 뿐 아니라 발생초기(DIV 0.5)부터 핵에서 표현되었으며 성숙한 세포에서 핵에 더욱 뚜렷이 표현되었다. eIF4E 혹은 eIF4EBP1의 PSD95과의 colocalization은 $39.1{\pm}9.6%$ 및 $70.5{\pm}5.2%$ (DIV 7), $57.7{\pm}8.2%$ 및 $36.0{\pm}3.1%$ (DIV 10), $29.9{\pm}2.9%$ 및 $40.2{\pm}11.7%$ (DIV 20)이었다. eIF4E와 eIF4EBP1의 colocalizatin은 $18.5{\pm}2.6%$ (DIV 7), $11.1{\pm}3.9%$ (DIV 10), $38.6{\pm}5.6%$ (DIV 20)이었다. 이 결과는 eIF4E 및 eIF4EBP1의 많은 부분이 연접후에 위치하며, 발생초기에는 eIF4E가 활동적인 형태로 존재하지만, 성숙 신경세포에서는 eIF4EBP1과 결합하여 비활성적인 형태로 존재함을 의미한다.
Kim, Mi-Jeong;Choi, Woo-Gyun;Ahn, Kyung-Ju;Chae, In Gyeong;Yu, Rina;Back, Sung Hoon
Molecules and Cells
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제43권3호
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pp.264-275
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2020
Reactive oxygen species (ROS) play a significant role in intracellular signaling and regulation, particularly when they are maintained at physiologic levels. However, excess ROS can cause cell damage and induce cell death. We recently reported that eIF2α phosphorylation protects hepatocytes from oxidative stress and liver fibrosis induced by fructose metabolism. Here, we found that hepatocyte-specific eIF2α phosphorylation-deficient mice have significantly reduced expression of the epidermal growth factor receptor (EGFR) and altered EGFR-mediated signaling pathways. EGFR-mediated signaling pathways are important for cell proliferation, differentiation, and survival in many tissues and cell types. Therefore, we studied whether the reduced amount of EGFR is responsible for the eIF2α phosphorylation-deficient hepatocytes' vulnerability to oxidative stress. ROS such as hydrogen peroxide and superoxides induce both EGFR tyrosine phosphorylation and eIF2α phosphorylation. eIF2α phosphorylation-deficient primary hepatocytes, or EGFR knockdown cells, have decreased ROS scavenging ability compared to normal cells. Therefore, these cells are particularly susceptible to oxidative stress. However, overexpression of EGFR in these eIF2α phosphorylation-deficient primary hepatocytes increased ROS scavenging ability and alleviated ROS-mediated cell death. Therefore, we hypothesize that the reduced EGFR level in eIF2α phosphorylation-deficient hepatocytes is one of critical factors responsible for their susceptibility to oxidative stress.
Plants protect against viruses through passive and active resistance mechanisms, and in most cases characterized thus far, natural recessive resistance to potyviruses has been mapped to mutations in the eukaryotic initiation factor eIF4E or eIF(iso)4E genes. Five eIF4E copies and three eIF(iso)4E copies were detected in Brassica rapa. The eIF4E and eIF(iso)4E genes could interact with turnip mosaic virus (TuMV) viral protein linked to the genome (VPg) to initiate virus translation. From the yeast two-hybrid system (Y2H) and bimolecular fluorescence complementation (BiFC) assays, the TuMV-CHN2/CHN3 VPgs could not interact with BraA.eIF4E.a/c or BraA.eIF(iso)4E.c, but they could interact with BraA.eIF(iso)4E.a in B. rapa. Further analysis indicated that the amino acid substitution L186F (nt T556C) in TuMV-UK1 VPg was important for the interaction networks between the TuMV VPg and eIF(iso)4E proteins. An interaction model of the BraA. eIF(iso)4E protein with TuMV VPg was constructed to infer the effect of the significant amino acids on the interaction of TuMV VPgs-eIF(iso)4Es, particularly whether the L186F in TuMV-UK1 VPg could change the structure of the TuMV-UK1 VPg protein, which may terminate the interaction of the BraA.eIF(iso)4E and TuMV VPg protein. This study provides new insights into the interactions between plant viruses and translation initiation factors to reveal the working of key amino acids.
Jeon, Yong-Joon;Kim, Jin Hyun;Shin, Jong-Il;Jeong, Mini;Cho, Jaewook;Lee, Kyungho
Molecules and Cells
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제39권2호
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pp.129-135
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2016
Eukaryotic translation initiation factor 2 alpha ($eIF2{\alpha}$), which is a component of the eukaryotic translation initiation complex, functions in cell death and survival under various stress conditions. In this study, we investigated the roles of $eIF2{\alpha}$ phosphorylation in cell death using the breast cancer cell lines MCF-7 and MCF-7/ADR. MCF-7/ADR cells are MCF-7-driven cells that have acquired resistance to doxorubicin (ADR). Treatment of doxorubicin reduced the viability and induced apoptosis in both cell lines, although susceptibility to the drug was very different. Treatment with doxorubicin induced phosphorylation of $eIF2{\alpha}$ in MCF-7 cells but not in MCF-7/ADR cells. Basal expression levels of Growth Arrest and DNA Damage 34 (GADD34), a regulator of $eIF2{\alpha}$, were higher in MCF-7/ADR cells compared to MCF-7 cells. Indeed, treatment with salubrinal, an inhibitor of GADD34, resulted in the upregulation of $eIF2{\alpha}$ phosphorylation and enhanced doxorubicin-mediated apoptosis in MCF-7/ADR cells. However, MCF-7 cells did not show such synergic effects. These results suggest that dephosphorylation of $eIF2{\alpha}$ by GADD34 plays an important role in doxorubicin resistance in MCF-7/ADR cells.
To evaluate the involvement of translation initiation factors eIF4E and eIFiso4E in Chilli veinal mottle virus (ChiVMV) infection in pepper, we conducted a genetic analysis using a segregating population derived from a cross between Capsicum annuum 'Dempsey' containing an elF4E mutation ($pvr1^2$) and C. annuum 'Perennial' containing an elFiso4E mutation (pvr6). C. annuum 'Dempsey' was susceptible and C. annuum 'Perennial' was resistant to ChiVMV. All $F_1$ plants showed resistance, and $F_2$ individuals segregated in a resistant-susceptible ratio of 166:21, indicating that many resistance loci were involved. Seventy-five $F_2$ and 329 $F_3$ plants of 17 families were genotyped with $pvr1^2$ and pvr6 allele-specific markers, and the genotype data were compared with observed resistance to viral infection. All plants containing homozygous genotypes of both $pvr1^2$ and pvr6 were resistant to ChiVMV, demonstrating that simultaneous mutations in elF4E and eIFiso4E confer resistance to ChiVMV in pepper. Genotype analysis of $F_2$ plants revealed that all plants containing homozygous genotypes of both $pvr1^2$ and pvr6 showed resistance to ChiVMV. In protein-protein interaction experiments, ChiVMV viral genome-linked protein (VPg) interacted with both eIF4E and eIFiso4E. Silencing of elF4E and eIFiso4E in the VIGS experiment showed reduction in ChiVMV accumulation. These results demonstrated that ChiVMV can use both eIF4E and eIFiso4E for replication, making simultaneous mutations in eIF4E and eIFiso4E necessary to prevent ChiVMV infection in pepper.
Jun, Kyung Ok;Yang, Eun Ji;Lee, Byeong Jeong;Park, Jeong Ro;Lee, Joon H.;Choi, Sang Ki
Molecules and Cells
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제25권2호
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pp.172-177
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2008
Eukaryotic translation initiation factor 5B (eIF5B) plays a role in recognition of the AUG codon in conjunction with translation factor eIF2, and promotes joining of the 60S ribosomal subunit. To see whether the eIF5B proteins of other organisms function in Saccharomyces cerevisiae, we cloned the corresponding genes from Oryza sativa, Arabidopsis thaliana, Aspergillus nidulans and Candida albican and expressed them under the control of the galactose-inducible GAL promoter in the $fun12{\Delta}$ strain of Saccharomyces cerevisiae. Expression of Candida albicans eIF5B complemented the slow-growth phenotype of the $fun12{\Delta}$ strain, but that of Aspergillus nidulance did not, despite the fact that its protein was expressed better than that of Candida albicans. The Arabidopsis thaliana protein was also not functional in Saccharomyces. These results reveal that the eIF5B in Candida albicans has a close functional relationship with that of Sacharomyces cerevisiae, as also shown by a phylogenetic analysis based on the amino acid sequences of the eIF5Bs.
In [4], the authors showed that if an h-vector (h0, h1, …, he) with h1 = 4e - 4 and hi ≤ h1 is a Gorenstein sequence, then h1 = hi for every 1 ≤ i ≤ e - 1 and e ≥ 6. In this paper, we show that if an h-vector (h0, h1, …, he) with h1 = 4e - 4, h2 = 4e - 3, and hi ≤ h2 is a Gorenstein sequence, then h2 = hi for every 2 ≤ i ≤ e - 2 and e ≥ 7. We also propose an open question that if an h-vector (h0, h1, …, he) with h1 = 4e - 4, 4e - 3 < h2 ≤ (h1)(1)|+1+1, and h2 ≤ hi is a Gorenstein sequence, then h2 = hi for every 2 ≤ i ≤ e - 2 and e ≥ 6.
In this paper, we first show that $z_{{\kappa}X}:E_{cc}({\kappa}X){\rightarrow}{\kappa}X$ is $z^{\sharp}$-irreducible and that if $\mathcal{G}(E_{cc}({\beta}X))$ is a base for closed sets in ${\beta}X$, then $E_{cc}({\kappa}X)$ is $C^*$-embedded in $E_{cc}({\beta}X)$, where ${\kappa}X$ is the extension of X such that $vX{\subseteq}{\kappa}X{\subseteq}{\beta}X$ and ${\kappa}X$ is weakly Lindel$\ddot{o}$f. Using these, we will show that if $\mathcal{G}({\beta}X)$ is a base for closed sets in ${\beta}X$ and for any weakly Lindel$\ddot{o}$f space Y with $X{\subseteq}Y{\subseteq}{\kappa}X$, ${\kappa}X=Y$, then $kE_{cc}(X)=E_{cc}({\kappa}X)$ if and only if ${\beta}E_{cc}(X)=E_{cc}({\beta}X)$.
Let L be a subspace lattice on a Hilbert space H and X and Y be operators acting on a Hilbert space H. Let P be the projection onto $\frac\;{R(X)}$, where RX is the range of X. If PE = EP for each $E\;\in\;L$, then there exists an operator A in AlgL such that AX = Y if and only if $$sup\{{\parallel}E^{\bot}Yf{\parallel}/{\parallel}E^{\bot}Xf{\parallel}\;:\;f{\in}H,\; E{\in}L}=K\;<\;\infty$$ Moreover, if the necessary condition holds, then we may choose an operator A such that AX = Y and ${\parallel}A{\parallel} = K.$ Let x and y be vectors in H and let $P_x$ be the projection onto the singlely generated space by x. If $P_xE = EP_x$ for each $E\inL$, then the assertion that there exists an operator A in AlgL such that Ax = y is equivalent to the condition $$K_0\;:\;=\;sup\{{\parallel}E^{\bot}y{\parallel}/{\parallel}E^{\bot}x\;:\;E{\in}L}=<\;\infty$$ Moreover, we may choose an operator A such that ${\parallel}A{\parallel} = K_0$ whose norm is $K_0$ under this case.
We define injective and projective representations of quivers with two vertices with n arrows. In the representation of quivers we denote n edges between two vertices as ${\Rightarrow}$ and n maps as $f_1{\sim}f_n$, and $E{\oplus}E{\oplus}{\cdots}{\oplus}E$ (n times) as ${\oplus}_nE$. We show that if E is an injective left R-module, then $${\oplus}_nE{\Longrightarrow[50]^{p_1{\sim}p_n}}E$$ is an injective representation of $Q={\bullet}{\Rightarrow}{\bullet}$ where $p_i(a_1,a_2,{\cdots},a_n)=a_i,\;i{\in}\{1,2,{\cdots},n\}$. Dually we show that if $M_1{\Longrightarrow[50]^{f_1{\sim}f_n}}M_2$ is an injective representation of a quiver $Q={\bullet}{\Rightarrow}{\bullet}$ then $M_1$ and $M_2$ are injective left R-modules. We also show that if P is a projective left R-module, then $$P\Longrightarrow[50]^{i_1{\sim}i_n}{\oplus}_nP$$ is a projective representation of $Q={\bullet}{\Rightarrow}{\bullet}$ where $i_k$ is the kth injection. And if $M_1\Longrightarrow[50]^{f_1{\sim}f_n}M_2$ is an projective representation of a quiver $Q={\bullet}{\Rightarrow}{\bullet}$ then $M_1$ and $M_2$ are projective left R-modules.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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