• 제목/요약/키워드: Protein Kinase A

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동충하초 열수 추출물에 의한 인체 간암세포 성장억제 및 apoptosis 유발에 관한 연구 (Induction of Apaopotis by Water Extract of Cordyceps militaris (WECM) in Human Hepatocellular Carcinoma HepG2 Cells.)

  • 김경미;박철;최영현;이원호
    • 생명과학회지
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    • 제18권6호
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    • pp.804-813
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    • 2008
  • 본 연구에서는 전통 민간의학에서 많이 사용되는 동충하초(C. militaris)의 항암 작용에 관한 근거 자료의 제시를 위하여 동충하초 열수 추출물(WECM)의 항암 기전 해석을 시도하였다. 이를 위하여 HepG2 인체 간암세포를 사용하였으며, WECM의 처리에 의하여 HepG2 세포의 증식은 처리 농도의 증가에 따라 매우 억제되었다. WECM 처리에 의한 HepG2 세포의 증식 억제는 암세포의 심한 형태적 변형을 수반하였고, 이는 apoptosis 유도와 연관성이 있음을 DAPI 염색을 통한 apoptotic body 출현의 증가 및 flow cytometry 분석에 의한 sub-G1 기에 속하는 세포 빈도의 증가로 확인하였다. WECM 처리에 의한 HepG2 세포의 증식 억제는 또한 종양 억제 유전자 p53 및 CDKI p21의 발현 증가와도 연관성이 있음을 알 수 있었다. WECM 처리에 의한 apopotosis 유도에서 pro-apoptotic 인자인 Bax의 발현이 전사 및 번역 수준에서 매우 증가하였으며, caspase-3의 활성이 매우 높게 증가되었다. 특히 caspase-3 특이적 억제제인 z-DEVD-fmk로 caspase-3의 활성을 인위적으로 차단시켰을 경우, WECM에 의한 HepG2 세포의 apoptosis 유발에 caspase-3이 중심적인 역할을 하고 있음을 알 수 있었다. 본 연구 결과는 WECM의 생화학적 항암기전 해석을 이해하고 향후 수행될 추가 실험을 위한 기초 자료로서 그 가치가 매우 높은 것으로 생각된다.

타액선암에서 c-kit 유전자에 대한 분자생물학적 연구 (Molecular Biologic Analysis of c-kit Gene in Salivary Gland Carcinoma)

  • 서규환;정광윤;우정수;백승국;최성배;김상희;김인선;권순영
    • 대한두경부종양학회지
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    • 제19권2호
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    • pp.121-126
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    • 2003
  • Objectives: The c-kit gene encodes a transmembrane receptor-type tyrosine kinase, which is known to have a significant role in the normal migration and development of germ cells and melanocytes. In the previous studies of c-kit gene, c-kit expressions showed only in adenoid cystic carcinomas, lymphoepithelioma-like carcinomas and myoepithelial carcinomas, but not in others and mutation was not found in any types of salivary carcinoma. We investigate the c-kit expression which may be useful to differentiating adenoid cystic carcinomas from others, and mutation of the gene which may not be exist nor the mechanism of c-kit activation in salivary carcinomas. Material and Methods: The archival tissue samples from 42 salivary carcinomas of major and minor salivary glands were studied for c-kit expression by immunohistochemistry and gene mutation by polymerase chain reaction amplification and single strand conformational polymorphism. Results: The c-kit expressions were noted in 22/24 adenoid cystic carcinomas, 7/9 mucoepidermoid carcinomas, 2/3 acinic cell carcinomas, 3/4 malignant mixed tumors, and one undifferentiated carcinoma. The mutation of c-kit gene was found in 3/24 adenoid cystic carcinomas, 3/8 mucoepidermoid carcinomas, one acinic cell carcinoma, and 2/4 malignant mixed tumors. Conclusion: c-kit protein overexpression is seen in a variety of salivary gland carcinomas, and the mutation of the gene may be the mechanism of c-kit activation in these neoplasms.

녹차씨 압착박 열수 추출물의 지방세포 분화 억제 효과 (Anti-adipogenic Effects of the Water Extracts of Defatted Green Tea Seed Cake)

  • 위지향;성혜미;정경옥;김숙정;신유림;박주현;김종덕
    • 한국식품과학회지
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    • 제47권4호
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    • pp.525-533
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    • 2015
  • 본 연구는 녹차씨 압착박의 활용성을 증가해 보고자 녹차씨를 압착한 후 남은 박을 추출하여 총 페놀, 조사포닌, 카테킨, 나린게닌 함량을 확인하고 3T3-L1 세포에서의 지방세포분화 억제 관련 효과를 확인하였다. 또한 기존에 체지방 감소 효능이 있는 것으로 알려진 녹차와도 비교하였다. 녹차씨 압착박 추출물과 녹차 추출물의 페놀, 조사포닌, 카테킨, 나린게닌 함량을 비교한 결과 녹차씨 압착박 추출물에서 나린게닌 함량이 높음을 알 수 있었다. 3T3-L1 세포에서 Oil Red O 염색법을 이용한 지방 축적저해 정도 및 세포내 중성지방 함량을 측정한 결과, 녹차씨 압착박 추출물에서 지방 축적저해 및 중성지방의 함량이 감소하는 것을 확인하였다. 녹차씨 압착박이 지방합성 및 에너지 조절 효소에 미치는 영향을 알아보기 위해 단백질 발현 실험을 실시한 결과, 녹차 또는 녹차씨 압착박 추출물에 의해서 AMPK 및 ACC의 인산화 증가 및 FAS의 발현이 감소하는 것을 확인 할 수 있었으며, 이러한 효능은 녹차 추출물보다 녹차씨 압착박 추출물에서 더 강하게 나타나는 것을 알 수 있었다. 이상의 결과로부터 녹차씨 압착박 추출물이 녹차 추출물 보다 지방세포분화 억제 효과가 높게 나타나는 것이 확인되어져, 녹차씨는 추후 체지방 감소 효능을 갖는 식품 소재로도 활용이 가능 할 것으로 생각되어진다.

Upregulation of miR-23b Enhances the Autologous Therapeutic Potential for Degenerative Arthritis by Targeting PRKACB in Synovial Fluid-Derived Mesenchymal Stem Cells from Patients

  • Ham, Onju;Lee, Chang Youn;Song, Byeong-Wook;Lee, Se-Yeon;Kim, Ran;Park, Jun-Hee;Lee, Jiyun;Seo, Hyang-Hee;Lee, Chae Yoon;Chung, Yong-An;Maeng, Lee-So;Lee, Min Young;Kim, Jongmin;Hwang, Jihwan;Woo, Dong Kyun;Chang, Woochul
    • Molecules and Cells
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    • 제37권6호
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    • pp.449-456
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    • 2014
  • The use of synovial fluid-derived mesenchymal stem cells (SFMSCs) obtained from patients with degenerative arthropathy may serve as an alternative therapeutic strategy in osteoarthritis (OA) and rheumatoid arthritis (RA). For treatment of OA and RA patients, autologous transplantation of differentiated MSCs has several beneficial effects for cartilage regeneration including immunomodulatory activity. In this study, we induced chondrogenic differentiation of SFMSCs by inhibiting protein kinase A (PKA) with a small molecule and microRNA (miRNA). Chondrogenic differentiation was confirmed by PCR and immunocytochemistry using probes specific for aggrecan, the major cartilaginous proteoglycan gene. Absorbance of alcian blue stain to detect chondrogenic differentiation was increased in H-89 and/or miRNA-23b-transfected cells. Furthermore, expression of matrix metalloproteinase (MMP)-9 and MMP-2 was decreased in treated1 cells. Therefore, differentiation of SFMSCs into chondrocytes through inhibition of PKA signaling may be a therapeutic option for OA or RA patients.

신장암 세포주에서 actinomycin D에 의한 SOCS3 발현 감소를 통한 STAT3 활성화 (Actinomycin D Induces Phosphorylation of STAT3 through Down-Regulation of SOCS3 in Renal Cancer Cells)

  • 우선민;박은정;권택규
    • 생명과학회지
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    • 제21권1호
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    • pp.141-145
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    • 2011
  • 본 연구에서는 전사억제제(transcriptional inhibitor)로 알려진 actinomycin D가 전사조절인자(transcription factor)인 STAT의 인산화를 유도한다는 것을 확인하였다. Actinomycin D 처리 시 STAT1의 Tyr701, Ser727 인산화는 유도되지 않았지만 STAT3의 Tyr705 잔기의 인산화를 특이적으로 유도하는 것을 확인하였다. Actinomycin D에 의한 STAT3의 Tyr705 인산화 유도가 어떠한 기전을 통한 것인지 확인하기 위해서 관련 인자의 단백질 및 mRNA 발현을 확인한 결과 SOCS3의 단백질 및 mRNA 발현의 감소를 확인하였다. STAT3의 탈인산화를 유도한다고 알려진 tyrosine phosphatase인 SHP-1와 STAT의 upstream kinase인 JAK2의 인산화는 변화가 없었다. 또한 actinomycin D 뿐 아니라 다른 전사억제제인 DRB를 처리 하였을 경우에도 STAT3의 Tyr705 인산화가 유도되는 것을 확인하였다. 이상의 결과는 전사억제제에 의하여 특이적인 SOCS3 단백질 발현감소는 SOCS3의 하류의 target인 STAT3 인산화를 유도하였다.

Lycopene의 새로운 혈관내피세포 생리활성 (Novel Function of Lycopene in Vascular Endothelial Cell)

  • 조진구;김성현;서정화;안선영;정은실;박헌용
    • 생명과학회지
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    • 제20권7호
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    • pp.1093-1099
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    • 2010
  • 항암 효과와 항산화 기능을 가지는 것으로 알려진 lycopene은 심혈관에서의 기능이 현재까지 잘 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 lycopene의 심혈관 기능을 알기 위해 혈관내피세포를 이용해 다양한 세포실험을 수행하였다. 그 결과, lycopene은 내피세포의 성장 및 이동을 촉진하였으나 세포사멸에는 영향이 없었다. 또한, 백혈구의 혈관내피세포 부착을 억제하였고 내피세포 내 신호전달물질인 MAPK들의 활성을 촉발하였다. MAPK의 활성 억제제를 이용한 신호전달기전 연구실험 결과, ERK와 p38 MAPK의 활성은 세포성장에 관여하고, JNK의 활성은 세포이동에 관여함을 확인하였다. 종합하면, lycopene은 혈관내피세포의 신호전달 물질인 MAPK들를 통해 세포성장 및 이동을 촉진시키며, LPS에 의한 THP-1의 내피세포 부착을 억제 하는 등 혈관내피세포의 다양한 생리활성을 조절한다. Lycopene의 이러한 혈관내피세포 기능들은 lycopene이 혈관질환 치료제로 응용될 가능성이 있음을 의미한다.

이월오염에 대한 연구 (A Study of Carry Over Contamination in Chematology)

  • 장상우;김남용;류재기;정동진;김기유;박용원;추경복
    • 대한임상검사과학회지
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    • 제37권3호
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    • pp.178-184
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    • 2005
  • Carry over contamination has been reduced in some systems by flushing the internal and external surfaces of the sample probe with copious amount of diluent. It between specimens should be kept as small as possible. A built-in, continuous-flow wash reservoir, which allows the simultaneous washing of the interior and exterior of the syringe needles, addresses this issue. In addition, residual contamination can further be prevented through the use of efficient needle rinsing procedures. In discrete systems with disposable reaction vessels and measuring cuvets, any carry over is entirely caused by the pipetting system. In analyzers with reuseable cuvets or flow cells, carry over may arise at every point through which high samples pass sequentially. Therefore, disposable sample probe tips can eliminate both the contamination of one sample by another inside the probe and the carry over of in specimen into the specimen in the cup. The results of the applicative carry over experiment studied on 21 items for total protein (TP), albumin (ALB), total bilirubin (TB), alkaline phosphatase (ALP), aspratate aminotranferase (AST), alanine aminotranferase (ALT), gamma glutamyl transferase (GGT), creatinine kinase (CK), lactic dehydrogenase (LD), creatnine (CRE), blood urea nitrogen (BUN), uric acid (UA), total cholesterol (TC), triglyceride (TG), glucose (GLU), amylase (AMY), calcium (CA), inorganic phosphorus (IP), sodium (Na), potassium (K), chloride (CL) tests in chematology were as follows. Evaluation of process performance less than 1% in all tests was very good, but a percentage of ALB, TP, TB, ALP, CRE, UA, TC, GLU, AMY, IP, K, Na, and CL was 0%, implying no carry over. Other tests were ALT(-0.08%), GGT(-0.09%), CK(0.08%), LD(0.06%), BUN(0.12%), TG (-0.06%), and CA(0.89%).

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마우스 흑색종 B16F10세포에서 loganin의 티로시나아제 발현 억제를 통한 멜라닌 생성 억제에 대한 기전연구 (Loganin Inhibits α-MSH and IBMX-induced Melanogenesis by Suppressing the Expression of Tyrosinase in B16F10 Melanoma Cells)

  • 정희진;방은진;김병무;정성호;이길한;정해영
    • 생명과학회지
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    • 제29권11호
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    • pp.1200-1207
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    • 2019
  • Loganin은 Corni fructus의 주요 iridoid glycoside이며 항염증, 항당뇨 그리고 뇌신경보호 효과 등이 보고되었다. 본 연구에서는 ${\alpha}-MSH$와 IBMX처리된 B16F10세포에서 loganin의 melanogenesis억제효과의 신호전달 경로를 조사하였다. Loganin의 미백 활성을 확인하기 위해 B16F10세포에서 $1{\mu}m$에서 $20{\mu}m$사이의 농도를 처리하여 세포독성 실험을 수행한 결과 최대 $20{\mu}m$농도에서 독성을 나타내지 않았다. 또한 loganin은 ${\alpha}-MSH$와 IBMX처리된 B16F10세포에서 농도-의존적으로 멜라닌 생성을 감소시키는 것을 확인하였다. 또한 loganin의 멜라닌 생성을 억제하는 신호전달 경로를 Western blotting을 실시하여 조사하였다. Western blot결과에 따르면 loganin은 ${\alpha}-MSH$와 IBMX 처리된 B16F10세포에서 증가된 CREB인산화(Ser133)와 MITF 발현 및 tyrosinase의 유전자 발현을 감소시켰고 ERK의 인산화를 증가시켜 melanin 생성을 억제하였다. 결론적으로 loganin은 ${\alpha}-MSH$와 IBMX에 의해 유도된 과도한 멜라닌 합성을 CREB인산화와 MITF 및 tyrosinase의 유전자 발현을 억제하고 ERK의 활성화를 통해 멜라닌 합성을 감소됨을 확인하였다. 따라서 loganin은 과색소 침착과 관련된 피부질환의 보호제로서 활용될 가능성을 가지는 것으로 사료된다.

1-methyl-4-phenylpyridinium으로 유도된 신경 손상에 대한 quercetin-3-O-glucuronide의 보호 효과 (Protective Effects of Quercetin-3-O-glucuronide against 1-methyl-4-phenylpyridinium-induced Neurotoxicity)

  • 파리야르라메스;바스또라통킹;서정원
    • 생명과학회지
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    • 제29권2호
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    • pp.191-197
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    • 2019
  • 파킨슨병은 운동완서, 근육경직, 진전 및 비정상적인 자세 등을 임상적 특징으로 하는 주로 운동 신경계에 영향을 주는 진행성 신경 퇴행성 질환이다. 파킨슨병은 산화 스트레스와 세포 내 신호 전달 경로의 조절 장애에 의한 뇌 흑색치밀부에서의 도파민성 신경세포의 사멸을 특징으로 한다. Quercetin의 주요 대사산물인 Quercetin-3-O-glucuronide (Q3GA)는 신경 보호 효과가 있는 것으로 보고 되어 왔다. 본 연구에서는 SH-SY5Y 세포에서 1-methyl-4-phenyl pyridinium ($MPP^+$)에 의해 유도된 신경 독성에 대한 Q3GA의 신경 보호 효과와 그 분자 조절 기전을 조사하였다. Q3GA는 $MPP^+$에 의해 유도된 세포 사멸을 유의적으로 감소시켰으며 PARP 절단을 감소시켰다. 또한, Bax/Bcl-2 비율의 감소와 함께 $MPP^+$에 의해 증가된 세포 내 ROS를 감소시켰다. Q3GA는 $MPP^+$에 의해 감소된 Akt와 CREB의 인산화를 유의적으로 회복시켰지만, ERK에는 영향을 미치지 않았다. 이 결과는 Q3GA가 ROS 생산 억제와 Akt/CREB 신호 전달 경로를 통해 $MPP^+$ 에 의해 유도된 신경 독성을 억제시킬 수 있음을 시사한다. 본 연구는 Q3GA가 파킨슨병에 대한 예방제 또는 치료제로 개발될 수 있는 가능성을 제시한다.

추출용매에 따른 레몬밤 추출물의 중성지방 조절 효능 검증 (Verification of the Effect of Lemon Balm Extract on Triglyceride Control According to the Extraction Solvent)

  • 김지연;김경곤;이혜림;김대중;김태우
    • 한국자원식물학회지
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    • 제35권2호
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    • pp.372-379
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    • 2022
  • 본 연구는 추출용매에 따른 레몬밤 추출물의 중성지방 조절에 대한 논문으로 3T3-L1 지방전구세포를 이용해 지방세포로 분화유도한 뒤 lipid accumulation, triglyceride contents, PKA, HSL, perilipin, ATGL 및 CGI-58 단백질 발현을 확인하였다. 실험결과 네가지 조건의 레몬밤 추출물 중 물 추출 조건인 MOW100 추출물만 lipid accumulation과 triglyceride contents의 유의적 억제 효능을 나타내었으며, MOE70, MOE50, MOE50 추출물은 lipid accumulation과 triglyceride contents의 감소 효과가 없거나 유의적 차이를 나타내지 않는 것이 확인되었다. MOW100 추출물의 세포내 지방 축적 억제는 지방세포 내 lipolysis를 조절하는 효소 조절을 통해 나타난 결과로 판단된다. 따라서 레몬밤 물 추출물은 cAMP-PKA를 활성화시키고, lipolysis를 조절하는 효소의 상승작용을 통해 세포내 중성지방을 조절함으로써 혈중 중성지방을 개선하는 후보소재로의 사용이 가능할 것으로 사료된다.