Optimum conditions of PEG treatment for the intergeneric fusion of yeast protoplasts were investigated. Fusants were selected by nutritional complementation on minimal medium. The intergeneric fusion frequency between pro-toplasts of S. cerevisiae and C. tropicalis was distributed 10$^{-4}$ to 10$^{-6}$, depending on the combination of parental strains. PEG 4000 or 6000 are equally effective. 30%(w/v) PEG 4000 was found to be optimum and below 20% its stabilizing effect was lost, resulting in protoplast lysis, and optimum pH was 8.0. The efficiency of PEG was enhanced by higher temperature of the PEG solution, and by the addition of Ca ions. The stimulating effect of Ca ions in the range of 1 mM to 100 mM proved similar.
Cho Kyoung-Sook;Park Kyoung-Joo;Jeong Hyun-Do;Nam Soo-Wan;Lee Sang-Joon;Park Tae-Joo;Kim Joong-Kyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.3
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pp.414-422
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2006
Before applying PVA bio-beads to practical biological treatment of nitrate-containing wastewater, their characteristics were examined. PVA bio-beads could steadily produce nitrogen gas from nitrate for 28 batches with 0.04 ml/l/h of the maximum gas production rate; however, the maximum gas production rate dropped remarkably thereafter with apparent deformation of beads. Addition of 2.2% solution containing 1% casamino acid, 1% yeast extract, 0.1% mineral solution, and 0.1% vitamin solution to the culture medium resulted in not only recovery of activity of deactivated beads, but also a higher rate of gas production. Calculation of economic benefit for the use of bio-beads in a long-run operation indicated that reactivation of bio-beads by chemicals had economical advantages over packing new bio-beads in the system. The continuously stirred bioreactor exhibited a satisfactory performance at HRT of 20.0 h. With a 9.5 mg $NO_{3}^{-}N/l/h$ nitrate removal rate, nitrate could completely be removed without nitrite accumulation. The use of PVA bio-beads in nitrate removal appears very promising.
Seo Hyung-Phil;Jo Kang-Ik;Son Chang-Woo;Yang Jae-Kyoon;Chung Chung-Han;Nam Soo-Wan;Kim Sung-Koo;Lee Jin-Woo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.3
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pp.374-380
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2006
In this study, glucose, sucrose, and dextrin were found to be better carbon sources for the production of pullulan by Aureobasidium pullulans HP-2001. Maximal production of pullulan with 200 g/l sucrose as a carbon source was 54.2 g/l. The highest yield of pullulan from sucrose was 0.40, when the sugar concentration was 100 g/1. Optimal conditions for the continuous production of pullulan by A. pullulans HP-2001 in a 7-1 bioreactor were determined by studying the effects of composition of feed solution, dilution rate, and concentration of sucrose in the feed solution. Pullulan concentration and productivity with 100 g/l glucose and 2.5 g/l yeast extract were 38.1 g/l and 0.53 g/l h for 72 h, respectively, in a batch culture of A. pullulans HP-2001. When the substituted medium contained 100 g/l sucrose, 2.5 g/l yeast extract, and mineral salts, which is the same composition as the medium for the production of pullulan, the pullulan concentration and productivity were 74.9 g/l and 0.55 g/l h for 120 h, respectively. The production of pullulan at the steady state increased with a dilution rate up to 0.015/h, and its concentration was 78.4 g/l with a weight average molecular weight ($M_w$) of $4.0{\times}10^5$. Unlike a batch culture, however, the decline of the $M_w$ and the number average molecular weight ($M_n$) of pullulan was not found in the continuous culture of A. pullulans HP-2001. When the concentration of sucrose in the feed solution was 200 g/l, 113.5 g/l of pullulan was obtained at the steady state. The steady state was maintained longer in the continuous culture fed with the feed solution containing 200 g/l sucrose than when fed with the feed solutions containing either 100 or 150 g/l sucrose.
In order to maximize the RNA accumulation and biomass production is Saccharomyces cerevisiae MTY62, a high-content RNA yeast strain, batch and fed-batch cultures were performed. Among the feeding modes of fed-batch cultures examined, the intermittent feeding mode R\`(IFB-lV), in which 50 ml of 40% molasses and 20% com steep liquor (CSL) solution was intermittently fed for 5 times, resulted in the cell concentration of 33.8 g- dry cell weight/1 and the RNA concentration of 5221 mg-/l, and RNA content of 153 mg-RNA/g-dry cell weight. The constant fed-batch with feeding mode III (CFB-III), in which the feeding rate of 40% molasses and 20% CSL solution was stepwisely decreased from 48 mph (9-13 h), to 24 mph (13-21 h), and to 18 ml/h (21∼ 48 h), gave the highest cell concentration of 42.7 g-dry ceil weigh71 and R7IA concentration of 5536 mg-RNA/1, which were about 2.4-fold and 1.9-fold increased levels, respectively, compared to the results of batch culture. However, the RNA con- tent of 130 mg-RNA/g-dry cell weight of the fed-batch was lower than that of the batch culture (171 mg-RNA/g-dry cell weight) and other fed-batch cultures. When the specific growth rates in the fed-batch cultures were increased, the RNA contents increased. This result indicates that the RNA content is adversely proportional to the cell concen- tration. However, at the same specific growth rate, the RNA content was maintained at higher level in the intermit- tent fed-batch than in the constant fed-batch culture.
The culture conditions to maximize the production of endoglucanase (EC 3.2.1.4) from the brown rot fungus Fomitopsis pinicola MKACC 54347 mycelia were investigated. Among the tested media for endoglucanase production, Mandel's mineral salts medium (MSM; 1% cellulose, 0.1% peptone, 0.14% $(NH_4)_2SO_4$, 0.03% urea, 0.2% $KH_2PO_4$, 0.03% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.03% $CaCl_2$, and 0.1% trace metal solution (19.8 mM $FeSO_4$, 13.0 mM $MnSO_4$, 12.2 mM $ZnSO_4$, and 15.4 mM $CoCl_2$)) produced the highest activity of the enzyme. To optimize the medium composition for enzyme activity, the effects of various carbon, nitrogen, phosphorus, and inorganic sources were investigated in MSM. Maximal enzyme production was accomplished using a medium containing 2% carboxymethyl cellulose (CMC), 2% yeast extract, 0.2% $KH_2PO_4$, 0.03% $MnSO_4$, and 0.3% trace metal solution. Different physiological conditions, like incubation period and temperature, were also examined to assess their influence on enzyme production. Enzyme production from F. pinicola reached its highest level after cultivation for 8 days at $25^{\circ}C$. Nondenaturing polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), followed by the endoglucanase activity staining using CMC as the substrate, was performed to identify the endoglucanase under the culture conditions studied. Zymogram analysis of the culture supernatant revealed an endoglucanase band with a molecular mass of 52 kDa. The optimum pH and temperature for enzyme activity were $55^{\circ}C$ and pH 5.0, respectively.
The whole plant of crop maize was chopped and ensiled in airtight 1-L capacity glass jars to determine the influence of residual sugar on anaerobic yeast growth and on the fermentation of lactic acid by L. buchneri in whole crop maize silage. There were a total of six treatments used in this experiment as follow: added 25 g de-mineralised water per kg chopped maize serving as control (con), 37.5 g glucose solution containing 12.5 g glucose ($g_1$), 75 g glucose solution containing 25 g glucose ($g_2$), 25 g L. buchneri suspension intended for $10^6$ cfu $g^{-1}$ (L.b.), $g_1+L.b.$ and $g_2+L.b.$ All silos were stored in the dark at $20^{\circ}C$ until end of experiment. Jars were opened on duplicates at day 2, 7, 14, 28, 56 or triplicates at day 91 after ensiling for measuring the pH, microbiological enumeration and fermentative products. Results indicated that acidification rates for all silages were very fast, no difference occurred among treatments before day 28. After day 28 the pH values for silages inoculated by L. buchneri. with or without sugar tended to increase especially for treated only with L. buchneri, resulting in higher (p<0.01) finial pH than uninoculated silages. Compared with control silage, the added sugar significantly (p<0.01) increased dry matter (DM) loss, L. buchneri enhanced (p<0.01) DM loss further at different sugar existence. Silages inoculated by L. buchneri only or in combination with sugar addition contained less (p<0.01) lactic acid than the correspondent silages without inoculation with L. buchneri. In comparison with control, ethanol production is about 3 or 6 fold higher due to addition 12.5 or 25 g glucose per kg chopped maize at ensiling. The added sugar resulted in less acetic acid concentration (p<0.01) than control, but inoculation with L. buchneri increased (p<0.01) acetic acid than correspondent uninoculated silages at different sugar levels. No butyric acid and propionic acid were found in uninoculted silages, silages inoculated with L. buchneri. produced more propionic acid, 1-propanol and butyric acid. Lactobacilli counts were not influenced by added sugar, but increased (p<0.01) with inoculation of L. buchneri. The added sugar increased significantly (p<0.01) the yeast count, whereas L. buchneri showed the contrary effect. No differences were found in the aerobic stability among all treatments. In conclusions, 1) the added sugars encourage the growth of yeast and yeasts convert extra sugar into ethanol in maize silages. 2) The added sugars and L. buchneri do not influence the aerobic stability of silages stored in anaerobic silos.
In wine making, to perform yeast culture effectively, which is the most important factor, 5 strains of representative active dry yeasts were selected : Montrachet, Pasteur Champagne, Epernay II, Prise do Mousse, Lalvin W15. The results about fermentation properties were as follows. After 1 day of fermentation, the ethanol contents of Lalvin W15 wine and Montrachet wine were 5.4% and 4.0%. After 2 days of fermentation, the ethanol content of Lalvin W15 wine was 9.2%, which is the highest degree among all experimental groups. As for the content of sugar solution, the wine fermented by Lalvin W15 was the highest one. In acidic solution, fermentation activity of Prise de Mousse, Lalvin W15, Montrachet were highest degrees and Red wine fermentation activity of Prise de Mousse has shown the highest degree in its fermentation activity, if only initial SO$_2$ amounts were 200 ppm. In regard to the foaming tendency during fermentation, the size of foams in Montrachet was big and the amount of foams was a lot. The change in Brix during the fermentation became evident after two days. The Brix of Montrachet wine and Lalvin W15 wine was 3.0, a high initial fermentation speed. After 10 days of fermentation, total acidity of Lalvin W15 wine was 0.99g/100m1, the highest degree. After 3 days of fermentation, the ethanol content of Lalvin W15 wine was 7.4%, the highest degree. But after 9 days of fermentation Epernay II showed the higher ethanol concentration to 13.8%.
The purpose of this study was to investigate antimicrobial effectiveness of Omija (Schizandra chinensis Baillon) treated with $ClO_2$ (chlorine dioxide) concentration (10, 15, 20, 25 and 30 ppm), washing time (30, 60 and 90 sec) and multiple proportion (x1, x2, x3 and x4). The seven groups were divided into control (Omija without washing water treatment), W-T (Omija treated by tap water ($20{\pm}1^{\circ}C$) for 30 seconds), $ClO_2$-10 (Omija treated by 10 ppm $ClO_2$), $ClO_2$-15 (Omija treated by 15 ppm $ClO_2$), $ClO_2$-20 (Omija treated by 20 ppm $ClO_2$), $ClO_2$-25 (Omija treated by 25 ppm $ClO_2$), $ClO_2$-30 (Omija treated by 30 ppm $ClO_2$), and then they were detected number of total aerobic bacteria, yeast and mold. The rate of inactivation was found, for microorganisms of total aerobic bacteria, yeast and mold, to increase with a increase of $ClO_2$ treatment concentration and multiple proportion. No total aerobic bacteria, yeast and mold in $ClO_2$-30 sample treated for 30 sec, $ClO_2$-15 treated for 60 sec and $ClO_2$-10 treated for 90 sec were detected, and in $ClO_2$-30 Omija with multiple proportion ${\times}1$ (Omija : 30 ppm $ClO_2$ solution ratio was 1:1 (w/w)), $ClO_2$-20 with ${\times}2$ (Omija : 20 ppm $ClO_2$ solution ratio was 1:2 (w/w)) and $ClO_2$-15 with ${\times}4$ (Omija : 15 ppm $ClO_2$ solution ratio was 1:4 (w/w)) respectively.
Changes of the growth of microorganisms, pH, and TBA values were examined for chickens treated with 5% potassium sorbate, 5% sodium acid pyrophosphate, and mixture of 2.5% potassium sorbate and 2.5% sodium acid pyrophosphate solution during 15 days at 4$^{\circ}C$. Treatment of the mixture solution inhibited synergistically the growth of mesophilic and psychrotrophic bacteria and suppressed effectively enteric bacilli. Potassium sorbate treatment was the most effective on inhibition of the growth of yeast and mold. The extension of lag phase for psychrotrophic bacteria and enteric bacilli was observed by the treatment of the mixture solution of potassium sorbate plus sodium acid pyrophosphate and the potassium sorbate solution. PHs of chickens were increased during the storage, which might induce the decline of antimicrobial effect. Sodium acid pyrophosphate was expected to give antioxidant effect as well as antimicrobial effect for high fat foods because the lowest increase of TBA value for chickens treated nth sodium acid pyrophosphate was measured.
As an edible coating, carnauba shellac wax (CSW) and lemongrass oil (LO) solution was prepared to extend the shelf life of 'Hongro' apples. During storage, there were significant differences in the populations of total aerobic bacteria, yeast, and molds between the coated apples and the control samples. The weight loss and vitamin C loss of apples coated with the CSW-LO solution were lower than those of the control. These results suggest that CSW-LO coating can be an effective method for improving quality of 'Hongro' apples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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