In order to establish a rapid, sensitive and specific diagnostic method for detection of antibody to Brucella abortus, a enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) was adapted. The diagnostic efficacy of the established ELISA was compared with that of the standard tube agglutination test for B abortus. 1. It was found that the optimal concentration of antigen for this ELISA was 5$\mu\textrm{g}$/ml, the optimal dilution of conjugate was 1 : 2000, and the optimal dilution of serum was 1 : 200, respectively. 2. Cut off value in this ELISA was 1,102 that was determined by mean absorbance(at 492nm) of tube agglutination test negative serum added with the triple value of the standared devation. 3. The relationship between the tube agglutination test and ELISA was showen high corresponding rate with sensitivity(96.3%) and specificity(98.1%). 4. The efficacy of the ELISA for detection of B abortus antibody was compared with tube agglutination test In brucellosis outbreak farm. The sensivity of ELSIA was higher than tube agglutination test.
This survey was conducted for the serological confirmation on large outbreak of bovine brucellosis in two dairy farms. Serological tests were performed by the plate agglutination test, tube agglutination test, enzyme linked immunosorbent assay(ELISA), complement fixation, ,test(CFT) and rose bengal plate test(RBPT). Total 200 heads(134 heads in farm A and 66 heads in farm B) were tested. The primigravida and positive group have been raised separately in the farm A and both group have been raised together in the farm B.. The result were summarized as follows ; 1. Positive ratios in positive herds of farms by the tube agglutination test were 68.3% in farm A and 53.2% in farm B. 2. Seroconversion to brucella was observed in the primigravidas group in farm B, but was not observed in the primigravidas group in farm A. 3. All calves born in positive herd were serologically negative at time of test. 4. Positive ratio of ELISA in farm A was higher than that of tube agglutination test. 5. Number of positive reactors by the CFT, RBPT in farm A were equal to those of tube agglutination test.
The detection of Bordetella bronchiseptica which is supposed to be an agent of the infectious atrophic rhinitis of swine, is likely to receive more attention in the future as the pork industry comes to realize that eradication of this infection from breeding herds is a practical possibility. Experiments described here were carried out to establish the rapid plate agglutination test for the detection of the infectious atrophic rhinitis of swine in the field using the criteria of antigen preparation, effects on the antigenecity after storing of the antigen and reaction appearing time. Also, the agglutinabilities between the plate and tube method were compared and the degree of pathological lesions were recorded in relation to tube agglutination titers. Obtained results were as follows: 1. No differences were noted in the agglutinabilities on the plate agglutination test between the treatments in antigen preparation-formolized, merthiolate-killed and living organism. 2. The agglutinability of the antigens did not show any significant changes until 10 weeks of storage at 4 C; however, after 10 weeks of storage, non-specific reaction was observed with the HPCD control sera. 3. The results of the plate and tube agglutination tests were not comparable but the effective use of the plate method in Bordetella bronchiseptica eradication programs in pigs especially in the sow is stressed as a screening test.
In these studies the efficracy of plate, tube agglutination and agar-gel precipitin test were compared for the detection of pullorum infected chickens. From all the chickens showing positive reaction in agar-gel precipitin test, Salmonella pullorum organisms were isolated.
Kim, Cheol-Ho;Bang, Sang-Young;Jeon, Jae-Hyung;Bhak, Jong-Sik;Lee, Min-Kwon;Shin, Jung-Sub
Korean Journal of Veterinary Service
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v.31
no.3
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pp.315-329
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2008
A total of 710 bovine serum samples which are composed 532 bovine serum samples showed negative reaction and 178 bovine serum samples showed positive reaction with tube agglutination test (TAT) from North area of Gyeong-nam, Korea were tested using all the 3 assays which are Rose-Bengal test(RBT), tube agglutination test (TAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA, two types) and analyzed for evaluation of specificity, sensitivity, reproducibility and predictive value. In the comparison of serum antibody titer agglutination test, RBT showed almost agreement with TAT. In the comparison of TAT and two types of ELISA method, they showed difference in specificity and sensitivity about 5%. But there is no significant difference in detecting sensitivity between two types of ELISA method and TAT. In serologic tests for bovine brucellosis, the new assay ELISA would be a good candidate for serologic survey for bovine brucellosis in Korea because it is efficient in detecting many test samples quickly. But the serum agglutination tests (RBT, TAT) are more economical and easy assay for detection. In the test of comparison of antibody titer between first day of finding and 10 days after finding by TAT, there was no change in 55% (76/139) of positive cattle.
Brucella spp. are small, non-motile Gram-negative coccobacilli known to cause disease in a number of vertebrate species including humans and brucellosis is one of the world's major zoonoses, alongside bovine tuberculosis and rabies. There are about 33.55 million goats and 1.16 million sheep in Bangladesh. The sheep and goats can significantly play an important role in the economic well being of the resource-poor farmer in Bangladesh. Sexually matured 362 female small ruminants(300 goats and 62 sheep) were examined. Approximately 3-5 ml of blood was collected from the jugular vein of each animal and sera samples were prepared. Samples were then tested for brucellosis by using Rose Bengal test(RBT), plate agglutination test(PAT) and tube agglutination test(TAT). Among 362 small ruminants, irrespective of species(sheep or goat), diagnosed highest in TAT, 2.21%(n=8) and lowest both by RBT & PAT, 1.93%(n=7) and it is concluded that TAT is superior than RBT and PAT.
An agglutinability between naturally infected positive chicken serum of pullorum disease and hyperimmumized rabbit antiserum was compared. And the following results were obtained and summarized. 1. On the agglutinability, Salmonella pullorum antigen which irradiated gamma-ray was more excellent than another both formalized and heated antigen. 2. Time of judgemented as positive titer in the tube agglutination test to the naturally infected positive chicken serum was it most suitable for 12 hours at $37^{\circ}C$. 3. Agglutination titer of positive immune chicken serum against gamma-ray irradiate Salmonella pullorum were as 320~640x.
This study was performed to test the hypothesis that Brucella abortus strain RB51 (SRB51) might protect Korean indigenous mongrel dog against challenge with either virulent B. abortus biotype 1 or B. canis. A total of 12 Korean mongrel dogs were divided into four groups (Group A, B, C and D). Dogs belonging to Group A and C were inoculated subcutaneously with $1{\times}10^9$ CFU of SRB51 in 1ml of sterile phosphate buffered saline (PBS). Dogs of Group B and D were inoculated subcutaneously with 1ml of sterile PBS as control. At 12 weeks post vaccination, dogs of Group A and B were challenged by oral inoculation of virulent strain of B. canis ($5.0{\times}10^9$ CFU) and dogs of Group C and D were challenged by oral inoculation of virulent strain of B. abortus biotype 1 ($4.4{\times}10^{10}$ CFU). The serum antibodies titers in all dogs were monitored at regular interval for eight weeks after challenge (AC) by standard tube agglutination test, plate agglutination test, rose bengal test, 2-mercaptoethanol rapid slide agglutination test and 2-mercaptoethanol tube agglutination test. No antibody titers in Group A and C was detected. Also, the challenge strains were not found from blood of all dogs of Group A and C from 1 week AC till the end of the experiment by culture and modified AMOS-PCR, whereas B. canis and B. abortus challenge strains were detected from blood of Group B and D, respectively. In addition, neither of two challenge bacteria was recovered from liver, spleen, kidneys, lymph nodes and reproductive tracts of Group A and C dogs after postmortem. However, B. canis and B. abortus challenge strains were isolated from these tissues of Group B and D, respectively. These data suggest that SRB51 could be a promising vaccine candidate for immunizing dogs to control canine brucellosis caused by B. canis or B. abortus.
Lee, Sung-Il;Choi, Min-Jung;Hur, Jin;Islam, Md Ariful;Khatun, Mst Minara;Baek, Byeong-Kirl;Lee, Chang-Seup;Kakoma, Ibulaimu;Bolye, Stephen M;Srirangananathan, Nammalwar;Young, Edward John
Korean Journal of Veterinary Service
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v.31
no.3
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pp.331-338
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2008
The study was carried out to evaluate the diagnostic efficacy of the tube agglutination test (TAT), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and the 2-Mercaptoethanol agglutination test (2-MAT) to detect human brucellosis patients in Korea. We examined 87 serum samples of people in the rural farm areas where bovine brucellosis had been reported. People in this study were divided into seven groups- farmers and their families, veterinarians, veterinary quarantine workers, livestock health control officers, artificial inseminators, livestock traders and healthy control individuals. Among 87 people, 65 were males and 22 were females ranging in age from 13 to 72 years. Of 87 serum samples, ELISA detected 21.84%, TAT detected 11.50% and 2-MAT detected 8.05% Brucella positive sera. Brucella specific IgG ELISA antibody titer was recorder higher in the individuals between the ages of 50 and 65 years. The highest prevalence rate of brucellosis(29.4%) was recorded in the cattle farmers and their family members followed by quarantine veterinary office workers (25%) and practicing veterinarians 01.1%). The majority of the Brucella sero-positive individuals in this study had a history of direct contact with animals.
A novel enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) is described and compared with other established serologic tests for bovine brucellosis, namely the rose bengal test (RBT), the complement fixation test (CFT), and the tube agglutination test (TAT) approved and used in Korea. A total of 109 bovine serum samples were tested using all the 4 assays and analyzed as to specificity, sensitivity, reproducibility and predictive value. The ELISA showed 100% agreement with the CFT. The least agreement between ELISA was observed with the TAT. The agreement between the ELISA and RBT was not significantly different from that observed between the CFT and the ELISA. It is concluded that the new assay would be a good candidate for routine serologic survey for brucellosis in Korea. A protocol combining the ELISA and the CFT would increase the power for detection of serologically positive individuals and herds.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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