This study was carried out to investigate the optimum medium and concentrations of growth regulators for induction of multiple shoot by meristem culture of floe otorefcenf Mill. MS medium supple-mented with 3${\mu}{\textrm}{m}$ TDZ was effective for induction of multiple shoot. Shoot multiplication was more ef-fective when 2mg/1 BA combined with 0.Img/1 IAA than when only BA were treated on medium. Halfstrength of MS medium supplemented with 2mg/L IAA was effective for rooting of shoots regenerated.When plantlets regenerated from meristem culture were transferred to pot, survival rate of plantletswas 80% on perlite and was 95% on vermiculite, respectively.
Leaf mesophyll protoplasts from five cultivars of tobacco (N. tabacum L.) were cultured. The protoplasts did not survive in culture medium containing Murashige and Skoog inorganic salts for over 6 days. NH4NO3 and FeSO4.Na2EDTA concentration of Murashige and Skoog medium were toxic in tobacco leaf mesophyll protoplast culture. Therefore we investigated optimum condition in Murashige and Skoog medium. High plating efficiency was obtained by reducing the concentrations of NH4NO3 and FeSO4.Na2EDTA to 1/3 and 1/10, respectively, on the supplemented with 5$\mu$M IAA, 0.5 $\mu$M 2.4-D 5 $\mu$M BAP. Plants were regenerated from protoplast-derived calluses.
Several cultivars of rice were examined for induction of embryogenic callus on a medium containing MS salts, vitamins and 2, 4-D under darkness. Embryogenic callus was obtained from cultivar Cheonma with high ratio and embryo-like structures were formed from the callus on a medium with or without reduced 2, 4-D. Somatic embryoids with a plumule and radicle axis surrounded by a scutellum were observed. These embryoids germinated and produced plantlets in 30 days on the same medium. Protoplasts isolated from an embryogenic cell suspension culture derived from embryogenic callus were cultured either in liquid or in agar medium and protoplast derived cell colonies were obtained in 3-4 weeks.
자엽으로 부터 신초 유기율은 MS기본배지와 MS기본배지에 IAA 0.25mg/L 또는 0.50mg/L과 zeatin 2.0mg/L 또는 4.0mg/L를 단독 및 조합 처리한 배지중에서 M배지에 IAA 0.25mg/L + zeatin 2.0mg/L 첨가된 배지가 63%로 가장 양호하였다. 신초 유기시기는 품종 및 배지에 따라 치상후 9~25일의 차이가 있었는데 MS배지 + zeatin 2.0mg/L + IAA 0.25 mg/L배지에서 영양재래, 풋고추, 342, Kakovskij-A-35, Gris I-A-1가 빠르게 유기 되었으며, MS배지 + BA 2.0mg/L + IAA 1.0mg/L 배지에서 COO485 Long Hot P5-3, Gris I-A-1에서 유기가 빨았다. 신초 유기율도 품종 및 배지에 따라 달랐는데 MS 배지 + zeatin 2.0mg/L + IAA 0.25mg/L 배지에서는 621, 영양재래, Nikko(일광), 적색물고추, Ch-6Num-216, 풋고추, Kakovskij-A-35가, MS배지 + BA 2.0mg/L + IAA 1.0mg/L 배지에서는 Fresno Chile, PI 169126, 적색물고추, PI 297438가 90%이상으로 높았다.
Callus and cell suspension cultures of Eurycoma longifolia Jack could be an alternative supply of 9-hydroxycanthin-6-one and 9-methoxycanthin-6-one. The callus tissues were initiated from leaves of different trees. The friable calli were used for the preparation of the cell suspension cultures of E. longifolia. The leaf explant of tree Eu-9 produced the most callus and also induced high cell biomass in the cell suspension culture, but it produced low quantity of 9-methoxycanthin- 6-one and 9-hydroxycanthin-6-one. The leaf explant from tree Eu-8 produced low quantity of callus and cell biomass, but produced the highest quantity of 9-methoxycanthin- 6-one and 9-hydroxycanthin-6-one. Optimum production of cell biomass was obtained on cell culture medium with pH 5.75 prior to autoclaving, but high alkaloids content could be induced in culture medium in acidic condition with pH 4.75 and 5.25 prior to autoclaving.
작약절편을 접종하면 배지와 절편이 흑갈색으로 변하고 수 이로부터 배양이 죽기 시작하는데 배지성분 중에 이를 조장하는 물질이 있음을 발견하였다. 즉 변색의 주원인은 철분과 염화칼슘(Cacl$_2$)이었고, 절편을 괴사시키는데 가장 큰 영양을 미친 것은 NO$_3$었다. 이 결과를 토대로 피해가 비교적 적은 1/4 MS를 번식용 배지로 이용하여 식물체의 모든 부분을 배양하였을 때 조직으로부터 재생은 전혀 일어나지 않았다. 다만 줄기절편에서 이미 형성된 액아가 유식물체로 성장하기도 하였으나 건전한 것으로 계속 성장하지 못하였으며 이것을 다시 번식체로 이용할 때는 초기 배양의 절편에서 나타나는 현상과 같은 원인으로 인하여 생존하지 못하였다.
Pongamia pinnata Pierre is a tree legume, having potential in production of raw material for biodiesel. A protocol for in wk propagation of this plant was standardized using seedling explants. Growth regulators (GR) including gibberellic acid $(GA_3),\;N^6-benzylaminopurine(BA)$, thidiazuron (TDZ), and Adenine sulphate (Ads) were tested for optimum germination of seeds. Removal of seed coat prior to germination, controlled fungal growth partially but enhanced bacterial growth. Antibiotic cefotaxime was ineffective in controlling bacterial contamination. Seedling derived nodal explants and cotyledon nodes with attached cotyledons were excised and cultured for induction of shoots. Optimum sprouting and multiplication of shoot buds were obtained in MS medium supplemented with $8.88{\mu}M$ BA. These buds differentiated and rooted on medium devoid of GR. Optimum growth of Pongamia seedling was obtained in cotton plugged culture vessels. Reculturing of the cotyledon node explants produced more shoots from the same site. This process of removing shoots and reculturing of cotyledon node was followed for eight passages yielding 4 to 8 shoots in each cycle. The shoots (75%) rooted on half strength MS basal medium supplemented with 0.22% charcoal. All plants survived on transfer to soil. This is the first report on in vitro regeneration of Pongamia pinnata. This report demonstrates the possibility of coupling more than one parameter in single experiment to hasten the process of standardization. The process of cycling the nodal explant repeatedly for production of large number of shoots from single meristem may find application in genetic transformation experiments wherein meristems are used for transformation.
An efficient regeneration system was established by using in vitro plantlets of germinated seedlings from different cultivars of lettuce (Lactuca sativa cv. Chongchima, Chongchuckmyun, Jeokchima, Jeokchuckmyun). Shoot formation were observed from all cultivars on MS medium supplemented with 0.1 mg/L NAA and 0.5 mg/L BA. In all cultivars, when cotyledon was cultured, the number of shoot per explant was more greater than that hypocotyl and leaf disc were cultured. Shoot formation rate (91.7%) was high in a cotyledon culture of cultivar, Chongchukmyun. The growth of multiple shoots derived from the cultivar, Chongchukmyun, was most effective on medium containing 0.5 mg/L BA and 1.0 mg/L GA$_3$. When shoots were transferred on MS medium without plant growth regulators, roots were effectively differentiated. Rooted plantlets were acclimated on pots for further propagation.
Scutellaria baicalensis Georgi (SJ) is a perennial plant and its root has been used in oriental traditional medicine for treatment of fever, inflammation, diarrhea and anticancer effect, etc. In this study, plant tissue culture system for SJ was developed. Stem piece of younger plant was optimum explant for callus induction and growth on MS medium supplemented with NAA 1.0 ㎎/L plus BA 0.5 ㎎/L. Plantlet regeneration through callus culture was well on MS medium containing NAA 1.0 mg/L. SJ has been known biologically active substances such as baicalin, baiclein, and wogonin. This study was carried out to examine the effect of plant growth regulators for production of baicalin, baicalein, and wogonin through callus culture. The HPLC pattern of callus extract was identical to that of standard solution, it shows that the callus produced by tissue culture has the same flavonoids composition of SJ. Baicalin, baicalein, and wogonin production was 471.5~52.8 ㎍/g, 137.6~4.0 ㎍/g, and 16.6~1.3 ㎍/g, respectively, on MS media with nine different plant growth regulator combinations. This may indicate that plant tissue culture of SJ possible to produce the biologically active substances effectively
당근의 배양세포로부터 체세포배의 발생과정에 미치는 아스콜빈산 및 dehydroascorbic acid의 영향을 밝히기 위하여 본 실험을 시도하였다. 비배발생세포의 배양에 처리된 아스콜빈산은 세포증식을 촉진시켰을 뿐인데 dehydroascorbic acid는 세포증식을 억제시키면서 배발생세포로 전환시킨 효과가 있었다. 배발생세포의 배양에 처리된 아스콜빈산은 체세포배 발생을 억제시켰지만 dehydroascorbic acid는 체세포배발생을 촉진시켰다. 그러나 이와 같은 발생촉진은 구상배에서 중단되므로 성숙에는 오히려 저해적이었다. 이상의 결과로부터 당근의 캘러스배양에 dehydroascorbic acid를 처리하여 빠른 시일내에 배발생캘러스를 확보한 다음 dehydroascorbic acid 첨가 배발생 배지에서 초기배발생기간 배양 후 MS 기본배지로 옮겨 배양하면 고빈도의 체세포배생산 실험계가 확립될 것으로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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