Proceedings of the Korean Society of Toxicology Conference
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2002.05a
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pp.81-81
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2002
The recent development of cDNA microarray or cDNA chip technology has made it possible to analyze the expression of thousands of genes at once. In present study, we made radioresistant clones (#1 and #4) from NIH3T3 cells which are not tumorigenic and we identified 4 genes using microarray system, cdk6, cdc25B, mdm-2 and nidogene, which were altered in radiaiton resistanct NIH3T3 cells.(omitted)
Proceedings of the Korean Institute of Information and Commucation Sciences Conference
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2008.05a
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pp.776-779
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2008
It is expect that Microarray technique be direct classification and diagnosis of Genetic data have abnomal data value because DNA technique. It is necessary that many noses that is abnomal data in sampling genetic data. So in this paper reported sampling method in exiting study then suggests new data classific system and modeling method using EP by Matlab about three dataset.
To investigate the effect of fluoxetine, one of selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs), on the immune system, human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were treated with fluoxetine $(10^{-7}\;M)$ for 24 h, and immune-related genes were analyzed by cDNA microarray. Expression of the immunerelated genes such as CD107b (LAMP-2), CD47 receptor (thrombospondin receptor), CD5 antigen-like (scavenger receptor cysteine rich family), copine III (CPNE3), interleukin (IL)-18 (interferon-gammainducing factor), integrin alpha 4 (CD49d), integrin alpha L subunit (CD11a), IL-3 receptor alpha subunit, L apoferritin, and small inducible cytokine subfamily A (Cys-Cys) member 13 (SCYA13) was induced by fluoxetine. This result suggests that fluoxetine may affect the immune system, and provides fundamental data for the involvement of SSRIs on immunoregulation.
As DNA microarrays are widely used recently, the amount of microarray data is exponentially increasing. Until now, however, no domestic system is available for the efficient management of such data. Because the number of experimental data in a specific laboratory is limited, it is necessary to avoid redundant experiments and to accumulate the results using a shared data management system for microarrays. In this paper, a system named WEMA (WEb management of Micro Arrays) was designed and implemented to manage and process the microarray data. WEMA system was designed to include the basic feature of MIAME (Minimal Information About a Microarray Experiment), and general data units were also defined in the system in order to systematically manage the data. The WEMA system has three main features: efficient management of microarray data, integration of input/ouput data, and metafile processing. The system was tested with actual microarray data produced by a molecular biology laboratory, and we found that the biologists could systematically manage and easily analyze the microarray data. As a consequence, the researchers could reduce the cost of data exchange and communication.
The increasing pace of development in molecular biology during the last decade has had a direct effect on mass testing and diagnostic applications, including blood screening. We report the model Microarray that has been developed for Hepatitis B virus (HBV) and Hepatitis D virus (HDV) detection. The specific primer pairs of PCR were designed using the Primer Premier 5.00 program according to the conserved regions of HBV and HDV. PCR fragments were purified and cloned into pMD18-T vectors. The recombinant plasmids were extracted from positive clones and the target gene fragments were sequenced. The DNA microarray was prepared by robotically spotting PCR products onto the surface of glass slides. Sequences were aligned, and the results obtained showed that the products of PCR amplification were the required specific gene fragments of HBV, and HDV. Samples were labeled by Restriction Display PCR (RD-PCR). Gene chip hybridizing signals showed that the specificity and sensitivity required for HBV and HDV detection were satisfied. Using PCR amplified products to construct gene chips for the simultaneous clinical diagnosis of HBV and HDV resulted in a quick, simple, and effective method. We conclude that the DNA microarray assay system might be useful as a diagnostic technique in the clinical laboratory. Further applications of RD-PCR for the sample labeling could speed up microarray multi-virus detection.
To investigate the XIST gene expression and its effect in a Klinefelter's patient, we used Klinefelter's syndrome (XXY) patient with azoospermia and also used a normal male (XY) and a normal female (XX) as the control, We were performed cytogenetic analysis, Y chromosomal microdeletion assay (Yq), semi-quantitative RT-PCR, and the Northern blot for Klinefelter's syndrome (KS) patient, a female and a male control, We extracted total RNA from the KS patient, and from the normal cells of the female and male control subjects using the RNA prep kit (Qiagen), cDNA microarray contained 218 human X chromosome-specific genes was fabricated. Each total RNA was reverse transcribed to the first strand cDNA and was labeled with Cy-3 and Cy-5 fluorescein, The microarray was scanned by ScanArray 4000XL system. XIST transcripts were detected from the Klinefelters patient and the female by RT-PCR and Northern blot analysis, but not from the normal male, In the cDNA microarray experiment, we found 24 genes and 14 genes are highly expressed in KS more than the normal male and females, respectively. We concluded that highly expressed genes in KS may be a resulted of the abnormal X inactivation mechanism.
Jin, Li Hua;Choi, Jung Kyoon;Cho, Hwan Sung;Shim, Jaewon;Kim, Young-Joon
Molecules and Cells
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v.25
no.4
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pp.553-558
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2008
Essential aspects of the innate immune response to microbial infection appear to be conserved between insects and mammals. In order to identify new Drosophila melanogaster genes involved in the immune response, we performed gene expression profiling of Drosophila SL2 cells stimulated with bacterial (LPS/PGN) or fungal (curdlan) components using a cDNA microarray that contained 5,405 Drosophila cDNAs. We found that some genes were similarly regulated by LPS/PGN and curdlan. However, a large number, belonging to the functional classes of cell organization, development, signal transduction, morphogenesis, cell cycle, and DNA replication, displayed significant differences in their transcription profiles between the two treatments, demonstrating that bacterial and fungal components induce different immune response even in an in vitro cell system.
The determination of DNA hybridization reaction can apply the molecular biology research, clinic diagnostics, bioengineering, environment monitoring, food science and other application area. So, the improvement of DNA detection system is very important for the determination of this hybridization reaction. In this study, we report the characterization of the probe and target oligonucleotide hybridization reaction using the evanescent field microscopy. First, we have fabricated DNA chip microarray. The particles which were immobilized oligonucleotides were arranged by the random fluidic self-assembly on the pattern chips, using hydrophobic interaction. Second, we have detected DNA hybridization reaction using evanescent field microscopy. The 5'-biotinylated probe oligonucleotides were immobilized on the surface of DNA chip microarray and the hybridization reaction with the Rhodamine conjugated target oligonucleotide was excited fluorescence generated on the evanescent field microscopy. In the foundation of this result, we could be employed as the basis of a probe olidonucleotide, capable of detecting the target oligonucleotide and monitoring it in a large analyte concentration range and various mismatching condition.
Journal of the Korean Institute of Electrical and Electronic Material Engineers
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v.18
no.6
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pp.560-570
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2005
In this paper, a microelectrode away DNA chip was fabricated on glass slide using photolithography technology. Several probe DNAs consisting of mercaptohexyl moiety at their 5' end were immobilized on the gold electrodes by DNA arrayer utilizing the affinity between gold and sulfu. Then target DNAs were hybridized and reacted with Hoechst 33258, which is a DNA minor groove binder and electrochemically active dye. Cyclic voltammetry in 5mA ferricyanide/ferrocyanide solution at 100 mV/s confirmed the immobilization of probe DNA on the gold electrodes. Linear sweep voltammetry or cyclic voltammetry showed a difference between target DNA and control DNA in the anodic peak current values. It was derived from Hoechst 33258 concentrated at the electrode surface through association with formed hybrid. It suggested that this DNA chip could recognize the sequence specific genes. It suggested that multichannel electrochemical DNA microarray is useful to develop a portable device for clinical gene diagnostic system.
Arsenic exposure is associated with several human diseases, including cancers, atherosclerosis, hypertension, and cerebrovascular diseases. In cultured cells, arsenite, an inorganic arsenic com-pound, was demonstrated to interfere with many physiological functions, such as enhancement of oxidative stress, delay of cell cycle progression, and induction of structural and numerical changes of chromosomes. The objective of this study is to investigate the effects of arsenic exposure on gene expression profiles by colorimetric cDNA microarray technique. HFW (normal human diploid skin fibroblasts), CL3 (human lung adenocarcinoma cell line), and HaCaT (immortalized human keratinocyte cell line) were treated with 5 $\mu\textrm{M}$ or 10 $\mu\textrm{M}$ sodium arsenite for 6 or 16 h, respectively. By a dual-color detection system, the expression profile of arsenite-treated cultures was compared to that of control cultures. Several genes expressed differentially were identified on the microarray membranes. For example, MDM2, SWI/SNF, ubiquitin specific protease 4, MAP3K11, RecQ protein-like 5, and Ribosomal protein Ll0a were consistently induced in all three cell types by arsenite, whereas prohibitin, cyclin D1, nucleolar protein 1, PCNA, Nm23, and immediate early protein (ETR101) were apparently inhibited. The present results suggest that arsenite insults altered the expression of several genes participating in cellular responses to DNA damage, stress, transcription, and cell cycle arrest.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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