Lee, Dae-Weon;Seo, Jong Bok;Kang, Jae Soon;Koh, Sang-Hyun;Lee, Si-Hyeock;Koh, Young Ho
The Plant Pathology Journal
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v.28
no.4
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pp.409-417
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2012
We identified two novel expansin (EXP) genes in the expressed sequence tag database of Bursaphelenchus xylophilus, designated as Bx-EXPB2 and -EXPB3. Novel Bx-EXPBs encoded 150 amino acids and their similarities in coding sequence were 70.7-84.0% to the previously reported EXPB1 of B. xylophilus. Bx-EXPB2 and Bx-EXPB3 were clustered with Bx-EXPB1 and Bm-EXPB1, respectively, forming the independent phylogeny with other nematode EXPs. All identified Bx-EXPBs contained the signal peptide and were only expressed during the propagative stage, suggesting that they are secreted to facilitate nematode migration through hosts by loosening cell walls during infection. Quantitative real-time PCR analysis showed that the relative accumulation of Bx-EXPB3 mRNAs was the highest among the three Bx-EXPs examined and the order of mRNA accumulation was as follows: Bx-EXPB3 > Bx-EXPB2 >> Bx-EXPB1. Homology modeling of Bx-EXPBs showed that the structurally optimum template was EXLX1 protein of Bacillus subtilis, whichshared residues essential for catalytic activity with Bx-EXPB1 and Bx-EXPB2 except for Bx-EXPB3. Taken together, Bx-EXPB1 and Bx-EXPB2 may be involved migration through plant tissues and play a role in pathogenesis.
Pine wilt disease (PWD) caused by pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, has become the most serious threat to pine trees in Korea. This study was subjected to investigate effective biological control agent against PWD. To select nematocidal bacteria against PWD, Bacillus licheniformis MH48 was selected among five bacteria due to its high nematocidal potential. B. licheniformis MH48 was tested for cell growth and protease activity to evaluate its nematicidal potential. In the B. licheniformis MH48, cell numbers were highest three days after incubation, while protease activity was highest after seven days. In the effect of different concentrations of B. licheniformis MH48 culture broth against B. xylophilus, 20% concentration of culture broth showed approximately 80% of pine wood nematode mortality compared to the control. Especially, pine wood nematode's cuticle layers were degraded two days after treatment of B. licheniformis MH48 culture broth. The present study suggests that B. licheniformis MH48 can be one of the potential biocontrol candidates against pine wood nematode due to its ability to produce protease.
Seo, Yunhee;Park, Jiyeong;Cho, Myoung Rae;Chun, Jae Yong;Kim, Young Ho
Research in Plant Disease
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v.20
no.3
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pp.227-233
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2014
The mixture (MX) of acetic acid (AA) and lactic acid (LA) was examined for its effectiveness in the control of the pine wood nematode Bursaphelenchus xylophilus contaminated in cymbidium culture medium. Nematode mortality in vitro was nearly 100% in AA and MX at the concentrations of 5.0-1.0% (pH 2.6 - 4.2) and in LA only at 5.0% (pH 3.5), but lowered at concentrations of 0.5-0.1% (pH 5.1-6.9) more significantly in LA than AA and MX. MX of most concentrations caused higher nematode mortality than the average response to AA and LA. All treatments of MX (0.5% and 0.25%), fosthiazate (standard and double concentrations) and culture dilution of Paenibacillus polymyxa GBR-1 ($10^7$colony-forming units/ml) reduced significantly the nematode populations in the cymbidium culture medium, compared to non-treatment control, with no significant difference among the treatments. No phytotoxicity occurred in all treatments. pH of the medium with the time after treatment and growths of 2-year-old cymbidium were not significantly different among treatments. Considering the safety and price of the organic acids, use of MX in the processes for culturing cymbidium may be a practically reliable and eco-friendly way in the control of the quarantine nematode in cymbidium.
Jo, Myung-Hee;Kim, Joon-Bum;Oh, Jeong-Soo;Park, Sung-Joong;Kwon, San
Proceedings of the KSRS Conference
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2001.03a
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pp.62-69
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2001
본 연구에서는 해상도가 상이한 시기별 위성영상과 GIS를 이용하여 경남 통영시 한산면 추봉도 지역의 소나무재선충(Bursaphelenchus Xylophilus) 피해지역을 탐지하고 다양한 영상처리를 통하여 이를 효율적으로 추출 할 수 있는 기법을 선정하였다. 연구결과 피해지역의 공간적 범위를 추출하기 위해서는 감독분류의 MHC(Mahalanobis Distance Classification)가 유용하였고 벌채 후의 토지피복 분류로 인한 피해지역 추출을 위해서는 MLC(Maximum Likelihood Classification)가 최적한 기법으로 나타났다. 아울러 이에 관련된 GIS를 구축하여 공간정보를 추출함으로써 피해지역의 공간적 분포특성을 규명하였는데 고도 약 120-160m, 경사 21$^{\circ}$-40$^{\circ}$ 그리고 서쪽 방향 사면에서 소나무재선충이 가장 활발하게 활동하였음이 밝혀졌다.
We conducted an inoculation test using nine open-pollinated families of pine trees to evaluate their susceptibility and mortality in different densities of pine wood nematode. Three-year-old nine open-pollinated pine families were inoculated with Bursaphelenchus xylophilus at levels of 3,000, 5,000, and 7,000 nematodes/seedling in greenhouse. There were no distinct patterns in latent period among three densities of B. xylophilus in all families. Most families showed the first disease symptoms of needle discoloration within 12-15 days after inoculation. However, open-pollinated progenies of Pinus densiflora showed the longest latent period because none of one-year-old needles were wilted until 14 days after inoculation with 5,000 and 7,000 nematodes. One-year-old needles were wilted earlier than current needles in all tested families with all densities of B. xylophilus. Current needles were not wilted until 14 days after inoculation in all seedlings. The mortality of all seedlings rapidly increased from 35 days to 49 days after inoculation, and all died within 80 days except two seedlings. A 3,000 nematodes/100 ${\mu}L$ with sterilized distilled water are enough to screen 3-year-old pine seedlings for resistance to B. xylophilus.
Three-year-old seedlings of susceptible Pinus densiflora and resistant Pinus x rigitaeda were each inoculated with the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, to compare disease development. Needle dehydration was evident on seedlings of P. densiflora by 20 days after inoculation, 10 days earlier than this symptom was observed on P. ${\times}$ rigitaeda. Xylem drying was more frequent in seedlings of P. densiflora than in that of P. ${\times}$ rigitaeda between 20 and 60 days after inoculation. No significant differences were found between P. densiflora and P. ${\times}$ rigitaeda for stem water content or for stem and leaf relative water content in current-year branches after nematode inoculation, but the average number of B. xylophilus recovered from stems differed significantly between the two groups. The number of B. xylophilus recovered from stems was negatively correlated with the stem water content and with stem and leaf relative water content. By the time the experiment was terminated at 60 days after inoculation, all 3 of the last group of P. densiflora seedlings had died, but 2 of the 3 remaining P. ${\times}$ rigitaeda hybrid seedlings were still alive. Additional studies are needed to further explore the specific mechanisms preventing nematode multiplication in the seedlings of resistant P. ${\times}$ rigitaeda.
Jong-won Lee;Abraham Okki Mwamula;Jae-hyuk Choi;Ho-wook Lee;Yi Seul Kim;Jin-Hyo Kim;Dong Woon Lee
The Plant Pathology Journal
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v.39
no.3
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pp.290-302
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2023
Abamectin offers great protection against Bursaphelenchus xylophilus, a well-known devastating pathogen of pine tree stands. Trunk injection of nematicides is currently the most preferred method of control. This study aimed to evaluate the potency of the commonly used formulations of abamectin against B. xylophilus. Twenty-one formulations of abamectin were evaluated by comparing their sublethal toxicities and reproduction inhibition potentials against B. xylophilus. Nematodes were treated with diluted formulation concentrations in multi-well culture plates. And, populations preexposed to pre-determined concentrations of the formulations were inoculated onto Botrytis cinerea culture, and in pine twig cuttings. Potency was contrastingly different among formulations, with LC95 of 0.00285 and 0.39462 mg/ml for the most, and the least potent formulation, respectively. Paralysis generally occurred at an application dose of 0.06 ㎍/ml or higher, and formulations with high sublethal toxicities caused significant paralysis levels at the tested doses, albeit the variations. Nematode reproduction was evident at lower doses of 0.00053-0.0006 ㎍/ml both on Botrytis cinerea and pine twigs, with significant variations among formulations. Thus, the study highlighted the inconsistencies in the potency of similar product formulations with the same active ingredient concentration against the target organism, and the need to analyze the potential antagonistic effects of the additives used in formulations.
Korean pine (Pinus koraiensis Sieb. et Zucc.), a five-needle pine, has recently been suffering pine wilt disease caused by non-native pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus. Three-year-old Korean pine seedlings were inoculated with 10,000 pathogenic nematodes in a greenhouse to investigate disease development, water content and the density of nematodes in stems. Needle dehydration, xylem drying and pith browning started 20 days after inoculation (DAI). There were significant differences between seedlings inoculated with nematodes and control seedlings in the relative water content of stems and leaves at 20 and 30 DAI. At 60 DAI, all remaining seedlings inoculated with nematodes had died, but control seedlings all remained alive. The average number of nematodes recovered from stems of Korean pine dramatically increased from 10 to 20 DAI, and then decreased at the end of the experiment at 60 days. This study suggests that the relative water content of stems and leaves in current-year branches could be used as a useful physiological indicator for early diagnosis of pine wilt disease.
In this study, a smartphone application for reporting trees infected with pine wilt disease was developed to prevent the spread of the disease by the disease-carrying pests/insects, which is most damning to the country's pine trees, South Korea's representative tree species, and to ensure the sustained maintenance of the country's forest trees. Such application for handling information on the infected pine trees has three key components, as shown below. (1) Explanation of the pine wilt disease pests/insects, (2) Image capture of the infected pine tree, and transmission of its GPS location, (3) Inquiry on the neighboring area infected with pine wilt disease. It is possible to promptly provide the spatial information of the areas infected with pine wilt disease by developing a dedicated application for reporting trees infected with the disease based on GPS information. If users participate actively in the application and integration with the forest service application is to be realized, the application would be more actively utilized.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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