고등어의 저장중 표피 오염 미생물 수를 신속하게 측정하여 신선도 판정을 위한 자료로 활용하고자 ATP bioluminescence assay에 의한 측정가능성을 파악하고자 하였다. 고등어를 $1^{\circ}C$에 저장하면서 표피를 swabbing 방법에 의해 미생물을 분리하여 총균수의 변화와 ATP bioluminescence assay에 의한 RLU 값을 측정하여 상관관계를 측정하여 본 결과 0.90 이상의 regression coefficient를 나타내어 유의적인 관계가 있음을 알 수 있었다. 따라서 ATP bioluminescence assay는 고등어 표피 오염 미생물의 신속 측정 방법으로 적합함을 알 수 있었으며 이 방법을 사용하였을 경우 기존의 48시간 이상 소요되는 전통적인 plate count 방법에 비하여 전처리를 포함하여 30분 이내에 결과를 알 수 있는 매우 신속하고 정확한 측정방법임을 알 수 있었다.
대학 급식 시설의 미생물적 위생상태를 평가하기 위해서 도마, 칼, 식판 그리고 행주에 대하여 ATP bioluminescence와 표준평판 균수를 측정 비교하여 분석, 평가한 결과는 다음과 같다. 1) 도마, 칼, 식판 그리고 행주에 대한 표준평판 균수의 허용기준으로 1 $\textrm{cm}^2$당 40을 기준으로 하고 ATP bioluminescence는 800 RLU을 허용기준으로 하여 만족 할만한 수준과 시정할 수준으로 구분하여 위생상태를 평가하였을 때 ATP bioluminescence 측정값과 표준평판 균수 측정값은 84.7%의 일치도를 보였다. 2) 사용 전 도마, 칼, 식판, 및 행주의 ATP bioluminescence 측정값과 표준평판 균수 측정값의 일치도는 91.7%, 사용 중 두 값의 일치도는 75%. 그리고 세척ㆍ소독 후의 두값의 일치도는 87.5%로 사용 전의 일치도가 가장 높았고 사용 중의 일치도가 가장 낮았다. 3) ATP bioluminescence 측정과 표준 평판 균수 측정으로 얻어진 결과에서 사용 전 도마, 칼, 식판, 및 행주의 87.5%가 허용기준 이하이고, 사용 중 도마, 칼, 식판, 및 행주의 29.2%만이 허용기준 이하이며, 세척ㆍ소독 후 도마, 칼, 식판, 및 행주의 42.7%가 허용기준 이하로 사용전의 위생상태가 가장 양호하며 사용 중인 경우 위생상태가 가장 불량하여 즉각적인 조치가 필요하다. 4) 사용 전 도마, 칼, 식판, 행주 4종류의 표준평판 균수가 허용기준 이하 검출된 대학 급식 시설은 3곳이며, 사용 중 4종류의 표준평판 균수가 허용기준 이하 검출된 곳은 없었고 세척ㆍ소독 후 4종류의 표준평판 균수가 허용기준 이하 검출된 곳도 없었다. 5) 도마, 칼, 식판, 및 행주의 용도별 분리사용은 거의 이루어지고 있지 않고 있다. 특히 칼과 도마는 교차오염의 가능성이 크므로 용도에 따라 구분하여 분리 사용이 필요하며 소독방법 및 횟수에서 행주의 소독이 가장 잘 이루어지고 있으며 도마의 소독이 가장 미흡하게 나타나고 있다. 사용 중 도마, 칼, 행주에 대한 즉각적인 조치와 분리 사용이 필요하며 칼, 도마, 행주에 대한 적절한 소독 방법이 강구되어야 한다고 사려된다. 결론적으로 ATP bioluminescence 측정값은 표준평판균수 측정값과 높은 일치도를 보여 급식 분야의 미생물 품질관리 평가에 ATP bioluminescence 측정의 이용 가능성이 높게 나타나고 있으며 실제로 HACCP system에 적용하기 위하여 보다 지속적인 연구가 필요하다고 사려된다.
이 연구에서는 어린이급식소에서의 ATP bioluminescence 분석법을 이용한 급식 위생관리 모니터링의 적합성을 확인하고자 하였다. 어린이집과 유치원 두 유형 간을 비교하였을 때, 측정구역별 ATP 측정값, 위생관리 적합률, 획득점수와 측정 횟수별 획득점수에서는 차이가 없었다. 어린이집과 유치원 각각을 비교했을 때는, 어린이집에서의 측정구역별 ATP 측정값은 대부분 1차시보다 2차시에 낮아졌으나, 유치원은 차시 간 차이가 없었으며, 측정구역별 위생관리 적합률은 어린이집과 유치원에서 대부분 1차시보다 2차시에 높아졌다. 또한, 어린이집의 경우 측정 횟수와 평균 획득점수와의 양의 상관관계를 보였다. 결론적으로, ATP bioluminescence 분석법은 어린이급식소에서의 급식 위생관리 모니터링 도구로써 활용 가능할 것으로 보이며, 특히, 어린이집이 유치원보다 더 효과적일 것으로 판단된다.
Park, Seul-Kee;Woo, Yang-Hee;Kim, Ho-Geun;Lee, Yong-Chan;Choi, Sung-Ho;Hyung, Woo-Jin;Noh, Sung-Hoon
Journal of Gastric Cancer
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제10권4호
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pp.155-161
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2010
Purpose: The purpose of this study was to investigate the reliability and the clinical applicability of the adenosine-triphosphate-based chemotherapy response assay (ATP-CRA) as a method of determining in vitro chemosensitivity in patients with gastric cancer. Materials and Methods: A total of 243 gastric cancer tissue samples were obtained from gastrectomies performed between February 2007 and January 2010. We evaluated the effectiveness of the ATP-CRA assay in determining the chemosensitivity of gastric cancer specimens using eleven chemotherapeutic agents - etoposide, doxorubicin, epirubicin, mytomicin, 5-fluorouracil, oxaliplatin, irinotecan, docetaxel, paclitaxel, methotraxate, and cisplatin - for chemosensitivity studies using ATP-CRA. We assessed the failure rate, the cell death rate, and the chemosensitivity index. Results: The failure rate of ATP-CRA was 1.6% (4/243). The mean coefficient of variation for triplicate ATP measurements was 6.5%. Etoposide showed the highest cell death rate (35.9%) while methotrexate showed the lowest (16.6%). The most active chemotherapeutic agent was etoposide, which most frequently ranked highest in the chemosensitivity test: 31.9% (51/160). Oxaliplatin was more active against early gastric cancers than advanced gastric cancers, whereas docetaxel was more active against advanced cancers. The lymph node negative group showed a significantly higher cell death rate than the lymph node positive group when treated with doxorubicin, epirubicin, and mitomycin. Conclusions: ATP-CRA is a stable and clinically applicable in vitro chemosensitivity test with a low failure rate. The clinical usefulness of ATP-CRA should be evaluated by prospective studies comparing the regimen guided by ATP-CRA with an empirical regimen.
본 연구는 경상북도 예천군에 소재하는 100인 이하의 어린이급식소 32개소를 대상으로 급식 위생·안전 순회지도 및 위생교육 지원에 따른 교육효과를 조사·분석함으로써 어린이급식소의 문제점을 파악하고, 올바른 개선방안을 제시하고자 하였으며, 위생·안전 체크리스트 분석 결과와 ATP 측정 결과의 상관관계를 비교·분석함으로써 위생교육의 효과를 평가하기 위한 ATP bioluminescence assay의 적용성을 검토하였다. 조사결과 설립 유형은 법인 9.4%, 국공립 18.7%, 기타 18.7%, 가정 21.9%, 민간 31.3% 순으로 확인되었고, 규모별로 집단급식소 25.0%, 소규모 급식소 34.4%, 비집단급식소 40.6% 순으로 조사되었다. 위생순회지도의 결과들은 '조리실, 식품 등의 원료·제품 보관실 등을 정기적으로 소독하는지 여부' 항목을 제외한 모든 항목에서 유의적인 개선을 보였으며, 위생순회지원에 따른 교육효과의 평가를 위해 칼, 도마, 고무장갑, 냉장고 손잡이, 정수기 꼭지 등 5가지 항목에 대한 ATP bioluminescence analysis가 수행되었다. 칼과 도마의 경우 전 개소 모두 순회 지원 후 20 RLU/cm2 이하의 수치를 보였으며, 특히 국공립시설, 법인시설, 민간시설에서 칼과 도마 모두 10 RLU/cm2 이하의 수치를 보였다. 조리기구 중 식품위생의 주요 기준이 되고 있는 칼과 도마를 중심으로 이와 관련된 항목인 '자외선 또는 전기 살균 소독기 설치 여부', '주방용구의 살균·소독제 또는 열탕의 방법으로 소독한 것을 사용하는지 여부', '어류·육류·채소류를 취급하는 칼·도마 구분 사용 여부' 항목들이 상관관계 분석을 통해 검증되었으며, 칼과 도마 모두에서 음(-)의 상관관계를 가지며 높은 상관성을 나타내었다. 이러한 결과는 위생교육의 효과에 대한 간편하면서도 객관적인 평가수단으로서 ATP bioluminescence assay의 가능성을 제시하는 것으로 사료된다. 전반적으로 제한적인 점검횟수로 인해 전 항목 모두 뚜렷한 개선을 확인할 수는 없었으나, 지속적인 교육지원을 통한 개선의 효과를 기대할 수 있을 것으로 판단된다.
Objective: To investigate correlations between adenosine triphosphate chemotherapy response assay (ATP-CRA) and clinical outcomes after ATP-CRA-based chemotherapy for drug selection in patients receiving intravesical chemotherapy to prevent recurrence of superficial bladder cancer after surgery. Methods: The chemosensitivities of 12 anticancer drugs were evaluated, including 5-Fu ADM, and EPI, using ATP-CRA and primary tumor cell culture in 54 patients. In addition, a further 58 patients were treated according to clinical experience. Differences in post-chemotherapeutical effects between drug sensitivity assay and experience groups were compared. Results: The evaluable rate of the test was 96.3%, the clinical effective rate was 80.8%, the sensitivity rate was 97.6% (41/42), the specificity was 20%, the total predicting accuracy was 74.3%, the positive predictive value was 83.7% (41/49), the negative predictive value was 66.7% (2/3); in the drug sensitivity test group, the clinical effective rate was 80.8%, the experience group response rate was 63.8%, with a significant difference in clinical effects between the ATP-based sensitivity and experience groups (${\chi}^2$=7.0153, P<0.01). Conclusion: ATP-CRA is a stable, accurate and potentially practical chemosensitivity test providing a predictor of chemotherapeutic response in patients with superficial bladder cancer.
Lee, Song-Yi;Jo, Sooyeon;Lee, Ga Eun;Jeong, Lak Shin;Kim, Yong-Chul;Park, Chul-Seung
Molecules and Cells
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제22권2호
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pp.198-202
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2006
The $P2X_7$ receptor, an ATP-gated cation channel, induces cell death in immune cells and is involved in neurodegenerative diseases. Although the receptor plays various roles in these diseases, the cellular mechanisms involved are poorly understood and antagonists are limited. Here, the development of a cell-based assay for human $P2X_7$ receptor is reported. We established permanent lines of HEK 293 cells expressing a high level of $hP2X_7$ receptor. Functional activity of the $hP2X_7$ receptor was confirmed by whole-cell patch recording of ATP-induced ion currents. Prolonged exposure to ATP resulted in death of the $hP2X_7$-expressing HEK 293 cells and this cell death could be quantified. Two known $P2X_7$ antagonists, PPADS and KN-62, blocked ATP-induced death in a concentration-dependent manner. Thus, this assay can be used to screen for new antagonists of $hP2X_7$ receptors.
Park, Chanyong;Kong, Minsuk;Lee, Ju-Hoon;Ryu, Sangryeol;Park, Sungsu
BioChip Journal
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제12권4호
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pp.287-293
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2018
Bacillus cereus can cause blood infections (i.e., sepsis). Its early detection is very important for treating patients. However, an antibody with high binding affinity to B. cereus is not currently available. Bacteriophage cell wall-binding domain (CBD) has strong and specific binding affinity to B. cereus. Here, we report the improvement in the sensitivity of an ATP bioluminescence assay for B. cereus detection using CBD-conjugated magnetic nanoparticles (CBD-MNPs). The assay was able to detect as few as 10 colony forming units (CFU) per mL and $10^3CFU\;per\;mL$ in buffer and blood. CBD-MNPs did not show any cross-reactivity with other microorganisms. These results demonstrate the feasibility of the ATP assay for the detection of B. cereus.
신선편이 농식품 시장의 빠른 성장과 함께 안전관리기준도 강화되고 있어 제조 시설 현장에서 신속하고 간편하게 위생상태를 판단할 수 있는 모니터링기법이 필요하게 되었다. 본 연구는 신선편이 농식품 생산업체 3개소를 대상으로 생산에 사용되는 도구와 기기에 대한 미생물수를 조사하였고 그에 대한 검증법인 ATP 검사법의 상관관계를 도출하고자 하였다.신선편이 농식품 생산업체 3개소의 신선편이 가공 시설, 장비에서 채취된 총 50개 시료의 ATP bioluminescence assay 값과 일반세균수와의 상관계수 (r)은 0.8772로 나타났다. ATP 검사법은 신속, 간편, 일관성을 바탕으로 신선편이 농식품 산업체에서 미생물 배양법을 대체하여 위생 환경 개선에 유용하게 쓸 수 있는 것으로 판단된다.
This study was carried out to treatment test for bovine mastitis by the determination of adenosine triphosphate (ATP) based on firefly bioluminescence. The results obtained are followed; 1. In the susceptibility test, cephalothin which looks the most effective were sensitive to Staphylococcus sp. (72.3%), Micrococcus sp. (84.2%), Streptococcus sp. (72.7%) and Gram positive bacilli (72.7%), Gram negative bacilli were sensitive to gentamicin (92.3%) and Yeast-like-fungi was the most sensitive to clotrimazole, and nystatin in order. 2. When the number of bacteria, such as Staphylococcus aureus, Candida tropicalis isolated from the mastitis milk were counted by conventional agar plating technique, and compared with the concentration of bacterial ATP, it gave a good linear relationship. The content of ATP per Staphylococcus aureus, cell was 3.1fM and Candida tropicalis showed the high level of A TP (90fM). 3. The ATP assay was applied to the determination of minimal inhibitory concentration (MIC) of various antibiotics. When Staphylococcus aureus was incubated in the presence of different concentration of tetracycline, erythromycin, kanamycin and streptomycin sulfate and the growth was monitored by the conventional agar plating technique and ATP assay, both methods shown the same results that they were 1mcg/ml, 2mcg/ml, 6.25mcg/ml and 8mcg/ml, respectively. 4. For the determination of susceptibility of sensitive and resistant Staphylococcus au reus isolated for the milk with mastitis to tetracycline, erythromycin kanamycin and streptomycin sulfate, the minimum time required for the test was determined by the assay of ATP every 30 minutes during incubation of 3 hours at $37^{\circ}C$. ATP concentration time curve calculated on both resistant and sensitive strains incubated 3 hours as the optimum time for the determination of susceptibilities of various antibiotics exemed. The ATP concentration of each test broth (antibiotic containing), expressed as a percentage of its own control brith (antibioticfree) indicated values of 30% to be indicative of each antibiotic sensitivity. Single time point ATP assay carried out on the various sensitive and resistant of Staphylococcus aureus to antibiotics examined after 3 hours at $37^{\circ}C$ correlated exactly with disc diffusion and MIC. 5. In the cure of intramammary treatment of bovine mastitis in lactating quarters, the cure rate of Staphylococcal mastitis showed to cephalexin (80%), cloxacillin and gentamicin (70%), ampicillin and oxytetracycline (60%), and Streptococcal mastitis showed to cephalexin (85%), penicillin (80%), cloxacillin and oxytetracycline (75%), and ampicillin (70%), but intramammary antimycotic drug (clotrimazol) were only a little effect about fungal mastitis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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