본 연구에서는 모유 유래 유산균 E. faecalis BMSE-HMP005의 다제내성 균주에 대한 항균효과 및 probiotics로써 잠재적인 가능성을 확인하였다. E. faecalis BMSE-HMP005는 다제내성 균주 20주(Enterococcus spp., Staphylococcus spp., Escherichia spp., Pseudomonas spp., Salmonella spp., Klebsiella spp., Enterobacter spp.)에서 모두 MBC가 확인되어 다제내성 균주에 대한 우수한 항균효과를 입증하였다. 또한 RP-HPLC를 이용하여 배양액 내 bacteriocin을 확인하였으며, 이에 대한 분획은 gram 양성 및 gram 음성균주에서 모두 항균력이 나타나, E. faecalis BMSE-HMP005가 생산하는 bacteriocin의 광범위한 항균 스펙트럼을 입증하였다. E. faecalis BMSE-HMP005는 발암 화합물을 유발하는 β-glucuronidase에 대한 활성과 용혈성은 나타나지 않아 안전한 것으로 판단된다. E. faecalis BMSE-HMP005는 vancomycin에 대해서는 내성을 보이나, kanamycin (>0.058), ampicillin (>0.002), erythromycin (>0.002)은 EFSA 기준의 허용범위보다 낮은 MIC가 확인되었다. 또한 인공위액(pH 2.0) 및 인공 담즙산(0.3% bile acid) 조건에서 각각 98.67%, 95.70%의 생존율을 보였다. 이와 같은 결과는 본 연구에서 분리한 모유 유래 유산균 E. faecalis BMSE-HMP005가 다제내성 균주에 대한 우수한 항균활성을 갖는 probiotics로써 잠재적인 가능성을 보여준다. 따라서 건강기능식품의 기준 및 규격에 제시된 바와 같이 Enterococcus spp.는 항생제 내성 및 독성 유전자가 없는 경우에 한하여 probiotics로 사용이 가능한 고시하고 있어 E. faecalis BMSE-HMP005의 안전성에 대한 추가적인 검증이 필요할 것으로 판단된다.
Vancomycin-resistant Enterococci (VRE) are a leading cause of a nosocomial infection. While seven glycopeptide resistance genotypes have been found in Enterococci, vanA and vanB are the most common resistance genotypes. Aims of this study were to detect antibiotic susceptibilities of 23 Enterococcus spp, which broke out in a university hospital by the disk diffusion test, to investigate specific genes of vanA and vanB by conventional and real-time PCR. PCR for vanA and vanB was performed on 23 Enterococci, all 23 were positive for vanA type. This study reports the validation of a simple and rapid VRE detection method that can be easily incorporated into the daily routine of a clinical laboratory. Early detection of VRE strains, including those with susceptibility to Vancomycin, is of paramount clinical importance, as it allows a rapid initiation of strict infection control practices as well as a therapeutic guidance for a confirmed infection. The real-time PCR method is a rapid technique to detect vanA in Enterococci. It is simple and reliable for the rapid characterization of VRE.
목적: 소아에서 VRE의 자발적 소실 기간에 대한 영향인자들을 밝히는 것이다. 방법: 2005년 1월부터 2010년 11월까지 VRE 양성인 환자의 의무기록을 후향적으로 분석하였다. 집락소실 기간의 평균 325일을 기준으로 하여 조기소실군과 만기소실군을 나누어 임상특징을 비교하였다. 결과: VRE가 확인된 환자 중 관찰기간이 1년 이상이 되었거나 VRE 집락 소실이 확인된 수는 151명이었다. 조기소실군(41명)에서 처음 VRE 집락이 되었을 때 나이는 만기소실군(110명)에 비하여 많았다(44.9개월 vs 40.9개월, P=0.040). 그리고 조기소실군보다 만기소실군에서 VRE 집락 후 반코마이신 치료를 한 경우가 더 많았다(7% vs 27.2%, P=0.008). 결론: VRE 집락기간에 있어, 처음 VRE를 획득하였을 당시의 나이와 항생제의 사용여부가 중요하다. 감염질환을 치료하고 항생제 저항성 세균의 집락을 억제하기 위하여 적절하고 신중한 항생제 사용이 필요하다.
본 연구는 하수 및 가축분뇨 처리장 방류수, 하천수를 이용하여 반코마이신 내성 장구균(Vancomycin Resistant Enterococci, VRE)의 검출여부를 확인하고 검출된 장구균의 표현형을 분석함으로써 하천에 대한 공공처리시설의 방류수에 포함되어있는 엔테로코커스의 영향을 파악하여 항생제 내성균이 환경에 미치는 영향 및 항생제 내성 연구에 기초 자료가 되고자 하였다. 엔테로코커스의 동정시험 결과 모두 32균주가 검출되었고 이는 모두 E. faecium으로 동정되었다. Multiplex PCR 시행한 결과 32균주 모두 Van A 표현형에 해당하는 반코마이신 내성 장구균으로 확인되었다. 조사지점별 세균의 E. faecium 집락수의 측정 결과 하수처리장 지역에서 평균적으로 가장 높게 나타났고, 하천 지역의 경우 상류지점에서 하류 지점으로 갈수록 세균의 colony 숫자도 늘어나는 것으로 조사되었다. 하수처리장 방류수 시료 26균주에 대한 최소억제농도 검사 결과, 19개의 항생제 중 내성, 감수성을 보인항생제 수는 각각 14, 5종으로 내성을 보이는 항생제의 수가 약 70% 이상으로 대부분을 차지하였다. 하천 시료 6균주에 대한 최소억제농도 검사 결과, 19개의 항생제 중 내성, 감수성을 보인 항생제 수는 각각 14, 5종으로 내성을 보이는 항생제의 수가 약 70% 이상으로 대부분을 차지하여 하수처리장 방류수 시료의 검사 결과와 동일하였다.
Purpose: The purpose of this study was to examine the effects of infection control education for families of patients infected with vancomycin resistant enterococcus (VRE). Method: Forty family members of VRE patients were chosen from a university hospital and assigned to the experimental or control group. The experimental group was provided infection control education that consisted of one-on-one instruction using an information booklet, hand-washing video, and demonstration of hand washing practice. Dependent variables were self-reported knowledge and performance of VRE infection control measures, and the number of hand washings when entering and leaving patients' rooms. Results: Knowledge and performance scores were significantly higher for the experimental group compared to the control group. The experimental group washed their hands significantly more often when entering and leaving patients' rooms than the control group. Conclusion: Infection control education for family members of VRE patients was effective in improving knowledge and performance of infection control measures as well as improving the practice of hand washing. Further investigation is needed on the effects of infection control education for families on the actual VRE colonization and/or infection rate.
${\beta}$ Ketoacyl acyl carrier protein synthase III (KAS III) initiates fatty acid synthesis in bacteria and is a key target enzyme to overcome the antibiotic resistance problem. In our previous study, we found flavonoid inhibitors of Enterococcus faecalis KAS III and proposed three potent antimicrobial flavonoids against Enterococcus faecalis and Vancomycin-resistant Enterococcus faecalis with MIC values in the range of 128-512 ${\mu}g/mL$ as well as high binding affinities on the order from $10^6$ to $10^7\;M^{-1}$. Using these series of flavonoids, we conducted biological assays as well as docking study to find potent flavonoids inhibitors of Staphylococcus aureus KAS III with specificities against Staphylococcus aureus and Methicillin-resistant Staphylococcus aureus. Here, we propose that naringenin (5,7,4'-trihydroxyflavanone) and eriodictyol (5,7,3',4'-tetrahydroxyflavanone) are potent antimicrobial inhibitors of Staphylococcus aureus KAS III with binding affinity of $3.35{\times}10^5$ and $2.01{\times}10^5\;M^{-1}$, respectively. Since Arg38 in efKAS III is replaced with Met36 in saKAS III, this key difference caused one hydrogen bond missing in saKAS III compared with efKAS III, resulting in slight discrepancy in their binding interactions as well as decrease in binding affinities. 4'-OH and 7-OH of these flavonoids participated in hydrogen bonding interactions with backbone carbonyl of Phe298 and Ser152, respectively. In particular, these flavonoids display potent antimicrobial activities against various MRSA strains in the range of 64 to 128 ${\mu}M$ with good binding affinities.
다제내성균의 증가는 사용할 항생제가 적거나 심지어 선택할 항생제가 없기 때문에 감염환자의 치료에 커다란 위협이 되고 있다. 최근 다양한 천연 추출물이 내성세균에서 항균효과 및 상승효과를 보인다는 보고가 많다. 어성초(Houttuynia cordata)는 항균, 항바이러스 및 항산화 효과를 보이는 전통적 약초이다. 이에 저자들은 임상의 주요 내성균에 대한 어성초의 항균효과를 알아보고, 이들의 적절한 항균효과 측정방법을 평가하고자 한다. 우선 현재 가장 많은 문제를 야기하는 주요 내성균인 methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), vancomycin-resistant Enterococcus faecium (VRE), carbepenem-resistant Acinetobacter baumannii(CRAB) 각각 10 균주를 선택하여, CLSI 기준으로 디스크 확산법 및 미량액체배지희석법으로 감수성 시험을 하였다. CLSI 기준으로 시행한 디스크 확산법에서 $4,096{\mu}g/mL$에서 $30,000{\mu}g/mL$ 까지의 농도에서 모든 균의 억제대는 관찰되지 않았다. 그러나 액체배지 희석법에서는 MRSA, VRE, CRAB의 $MIC_{90}$이 각각 $4,096{\mu}g/mL$, $8,192{\mu}g/mL$, $4,096{\mu}g/mL$를 보였다. 결론적으로 어성초는 MRSA, VRE, CRAB 등 주요 임상 내성균에서 우수한 항균효과를 보이며 천연물의 항균효과를 평가에 디스크 확산법보다 액체배지 희석법이 유용하다고 할 수 있다. 만약 디스크 확산법으로 항균효과를 측정하려면 천연물에 대한 균 접종 농도의 변경 등 새로운 기준이 요구된다.
본 연구에서는 임상검체에서의 Enterococcus sp.의 균종별 분리현황을 조사하고, 분리균의 항생제 감수성 양상을 알아보는 한편, aminoglycoside계 항생제에 내성을 나타내는 균주를 대상으로 Rep-PCR을 실시하여 유전적인 다양성을 알아보고자 하였다. 각종 임상검체로부터 E. faecalis 49주, E. faecium 34주, E. avium 9주, E. gallinarum 4주, E. casseliflavus 3주, E. hirae 1주 등 총 100주를 분리하였다. 대부분 외래를 통하기보다는 입원환자의 검체로부터 분리됨을 관찰하면서 원내감염의 원인균 중의 하나임을 알 수 있었다. Urine과 pus, sputum에서 대부분의 균들이 분리되었고 E. faecalis와 E. faecium이 주 종을 이루었다. 항생제 감수성양상으로는 disk법과 ViteK GPS-430의 MIC결과와 유사하게 관찰 되었으며, 대부분의 Enterococcus sp.가 cephalosporin계 항생제에는 80% 정도의 내성을 보였다. E. faecalis의 경우 항생물질에 대해 고른 감수성양상을 볼 수 있었고, E. faecium의 경우 다른 Enterococcus sp.와는 차별적으로 항생물질에 대해 높은 내성 양상을 볼 수 있었다. 또한 vancomycin에 대한 내성을 보이는 Enterococcus sp.는 전체 10%정도를 차지하였고 aminoglycoside계 항생제인 amikacin과 gentamicin에 대해서 높은 고도내성을 나타냈었고, streptomycin의 경우에는 50% 정도의 내성률을 나타내었다. Aminoglycoside계 항생제에 내성을 보이는 Enterococcus sp.를 대상으로 Rep-PCR을 실시하여 유전자 분획유형을 분석하였으나 유전적 다양성에 있어 크게 차이를 보이지 않아 DNA양상의 기원이 크게 다르지 않다는 것으로 생각되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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