Root cluster section culture, showing high efficient Protocorm-like body (PLB) formation capacity, were established in Doritaenopsis hybrids. Three types of root were obtained from excised shoots in 1/2MS medium containing different concentrations of NAA; \circled1normal roots, \circled2multiple roots and \circled3abnormal root clusters. Those were placed on 1/2MS medium supplemented with 0.5 mg/L thidiazuron for PLB regeneration. PLB regeneration rate was greater in root cluster section cultures (77.8%) compare to normal root tip cultures(30%). Number of PLBs regenerated from root cluster sections were counted over 11 per explant (5.3 per normal root tip).High frequency of PLB regeneration was achieved in root cluster section culture. This result can be used as an efficient method for clonal proliferation of Doritaenopsis hybrids.
수선화의 기내증식에 미치는 TDZ처리의 가능성을 조사하기 위하여 disk를 붙인 인편을 MS 기본배지에 NAA, BA 및 TDZ을 첨가한 배지에 배양하였다. 인편배양으로부터 자구의 형성 및 직접적인 신초형성에는 5.0 mg/L NAA와 1.0 mg/L BA가 반응이 양호했고 3 mg/L NAA와 0.02 mg/L TDZ을 혼용처리했을 때에도 비교적 양호한 반응을 보였다. 분화된 유식물의 뿌리형성에는 5.0 mg/L NAA와 0.02 mg/L TDZ이 첨가된 배지에서 가장 양호했다. 기내배양에서 얻어 진 식물체의 조직편을 이용하여 기내증식에 미치는 시토키닌의 영향을 조사했던 바 TDZ이 다른 시토키닌보다 효과가 있었고 조직은 인편을 배양했을 때가 자구형성 및 신초 분화가 가장 양호했으며 1.0 mg/L NAA와 0.5 mg/L TDZ을 첨가한 배지에서 여러 조직편으로부터 자구형성 및 신초분화가 가장 양호하여서 수선화의 기내증식 시 TDZ처리의 가능성이 있음이 인지되었다.
This study was conducted to evaluate the effect of thidazuron(TDZ) on shoot proliferation and growth from axillary buds of 20-years-old Corylopsis coreana. Shoots proliferation was effectively achieved on WPM(Woody Plant Medium) supplemented with 0.03∼0.1mg/L TDZ. The highest shoot number(6.5$\pm$0.7) was obtained on 0.1mg/L TDZ treatment. On the TDZ medium shoots formed as clusters less than 1cm in height and therefore needed to subculture on GA$_{3}$ containing medium to induce elongation. In consecutive cultures, phenolic compounds were excreted at the proximal part of the explants and inhibited growth of the explants. Growth inhibition by the compounds was overcome using liquid and paper bridge culture system. About 60% of the elongated shoots rooted on half- strength MS medium containing IBA. Generally, IBA was mire effective on in vitro rooting than NAA with optimal range of 0.5mg/L to 1.0mg/L. Rooted plantlets were transferred in an artificial soil(vermculite) and acclimatized in high humidity greenhouse condition. Survival rate differed greatly depending on rooting types of the explants. Two types of rooting were observed. The first type was direct rooting from the explants. The second type was callus formation followed by rooting from the callus. The explants showing the 1st type rooting survived can be multiplicated in vitro by TDZ treatment followed by elongation with GA$_{3}$ and rooting with IBA.
In order to produce centellosides from whole plant cultures of Centella asiatica (L.) Urban, we evaluated the synergistic effects of thidiazuron (TDZ) and methyl jasmonate (MJ) on whole plant growth and centelloside production. After 4 weeks of treatment with 0.025 mg/L of TDZ coupled with 0.1 mM MJ, the production of made-cassoside and asiaticoside from whole plant cultures was estimated to be 2.40- and 2.44-fold, respectively, above that of MJ elicitation alone. When whole plants were treated with a growth regulator and an elicitor, the growth of whole plants, as compared to the controls, did not differ. Additionally, total phytosyterol content in the leaves of whole plants co-treated with MJ and TDZ was 1.08-fold greater than those of MJ alone. These results demonstrate that combined treatments not only stimulate the accumulation of centellosides in the leaves but also inhibit the reduction of phytosterol levels caused by MJ elicitation.
Spathiphyllum floribundum cv. Cupid를 기내에서 대량번식시키기 위하여 일련의 실험을 실시하였다. 신초경정을 LS배지에 TDZ (thidiazuron)와 BA (banzyladenine)가 첨가된 배지에서 배양한 결과, 신초의 증식 및 신초 cluster의 형성은 BA 2.0 mg/L 첨가배지에서 가장 양호하였다. 배지 내 BA와 PBZ (paclobutrazol)의 혼용첨가는 BA 단용첨가보다 신초증식 및 신초 cluster 형성을 촉진하였다. 형성된 신초 cluster를 5∼7 mm로 절단하여 BA또는 TDZ이 첨가된 배지에 배양하였다. BA 2.0∼3.0 mg/L가 첨가된 배지에서 신초수가 가장 많았으며 신초의 증식도 양호하였다. 형성된 신초 cluster 절편체 (5∼7mm)에서 신초의 신장 및 발근은 IBA 2.0∼3.0 mg/L 첨가배지에서 매우 양호하였다. 발근된 식물체는 vermiculite와 pelrlite가 1 : 1로 혼합된 용토에서 95% 이상 순화되었다.
본 실험은 새로운 비 purine계 사이토카이닌 활성 물질인 thidiazuron(TDZ)이 포도 '거봉'의 과립중 및 과실 품질에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시하였으며 대조 약제로 forchlorfenuron(CPPU)을 이용하였다. 생리적 낙화 후 5일의 TDZ를 처리는 과방의 무핵과립의 착립수를 증가시켜 과방중은 유의하게 증가하였으나 과립중은 증가하지 않았다. 그러나 낙화 후 10 또는 15일 처리는 무핵 과립의 착립수를 감소시켜 과립중이 유의하게 증가하였다. 따라서 TDZ처리는 생리적 낙과가 어느 정도 진행된 만개 10~15일 후에 처리하는 것이 유리하였다. GA $25mg{\cdot}L^{-1}$처리도 과립중 증가에 효과적이었으나 TDZ와 GA혼용 처리는 각 약제를 단용 처리할 때보다 과립중 증대 효과가 더욱 컸다. 두 약제간에는 TDZ가 대조약제인 CPPU가보다 과립비대 증진 효과가 더욱 컸으며 TDZ 처리 농도가 $20mg{\cdot}L^{-1}$에서도 약해는 발생하지 않았으나 착색과 성숙은 더욱 지연되는 것으로 나타나 적정 처리농도$5{\sim}10mg{\cdot}L^{-1}$이었다.
본 실험은 무궁화 '홍화랑' 품종의 기내 대량 생산 체계를 구체적으로 확립하기 위한 연구로서 고체배지 또는 액체배지에서 thidiazuron (TDZ)이 캘루스 형성과 신초의 재분화에 미치는 효과 및 가장 적합한 multiple shoot 형성을 위한 배지의 조건을 유도하여 기내 식물체 대량생산 체계를 확립하기 위해 실시하였다. 고체배지에서의 캘루스 형성에 있어서는 TDZ 0.01 mg/L에서 가장 효과적으로 나타났으며, 반면 신초의 생장에 있어서는 BA 0.1 mg/L에서 가장 좋게 나타났다. 전반적으로 TDZ 0.01 mg/L에서는 캘루스의 형성이 가장 좋았고, TDZ 0.001 mg/L과 BA 0.1 mg/L의 혼용처리구에서는 약간의 신초원기가 형성되었다. 신초의 형성은 TDZ 0.001 mg/L에서 가장 잘 되었다. 대량의 multiple shoot를 유도하기 위해서 1단계는 TDZ 0.01 mg/L에서 8주간 캘루스의 형성을 유도한 후, 2단계에서 형성된 캘루스를 TDZ 0.001 mg/L에서 4주간 배양하여 많은 신초원기를 형성시켰다. 3단계는 형성된 신초원기들을 growth regulator-free 배지에 4주간 계대배양하여 multiple shoot 유도 및 발달시켰다. 발근은 MS 기본 배지에 NAA 1.0, 5.0 mg/L와 IBA 5.0 mg/L의 농도에서 효과적이었다.
Kim, Ok-Tae;Kim, Min-Young;Ahn, Jun-Cheul;Hwang, Baik
한국약용작물학회지
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제13권5호
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pp.233-236
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2005
Centella asiatica accumulates large amounts of triterpene saponin, such as centellasaponin, asiaticoside, madecassoside. We examined the effect of two candidates, MJ (Methyl jasmonate) and TDZ (thidiazuron), on asiaticoside production and the accumulation of bAS mRNA associated with asiaticoside biosynthesis in leaves of cultured whole plants. The growth of whole plants treated with 0.1 mM MJ was found to decrease significantly, however, the growth of whole plants treated with 0.1 mM MJ plus 0.025 mg/l TDZ was better than that treated with MJ alone. When MJ alone was added to culture medium, asiaticoside contents in leaves were higher than that of control after 7 days of treatments. The maximum level of bAS $({\beta}-amyrin\;synthsae)$ mRNA in leaves of whole plant treated TDZ and MJ was transiently observed after exposure to 5 days. These results showed the up-regulation of bAS gene by adding TDZ and MJ at the molecular level, however, synergic effects of TDZ and MJ on asiaticoside biosynthesis were not testified.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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