효모세포벽 분해효소를 생산하는 386주(株)의 미생물을 분리하여 그중 강한 1주(株)를 선발 동정(同定)하고 선정균의 효소생산조건을 검토하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 선정한 M-10 strain은 Humicola sp.로 동정(同定) 되었다. 2. 선정균의 효소생성은 pH 6.0 $33^{\circ}C$에서 가장 양호하였다. 3. 탄소원으로서 baker's yeast 4%가 Iytic enzyme 생산에 가장좋았고 기타 laminarin과 dextrin 등이 효과적이었으며 질소원도 peptone이 다소 효과적이나 baker's yeast로서 족하였다. 4. 효소생산에 $K_2HPO_4$ 0.1%와 $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 0.01%의 첨가가 가장 효과적이고 기타 염류의 첨가는 효과가 없었다. 5. 선정한 배지조성에서 72시간 진탕배양으로 최고에 달하였다.
작물의 생육촉진 및 식물 진균병의 생물방제능을 동시에 나타내는 다기능성 미생물제제를 개발하고자 토양으로부터 분리하여 보관중인 세균 120종의 활성을 검토하였다. 그 중 siderophore를 생성하고 항진균 활성을 보이는 BS11-1, BS11-2, BS11-3를 선발하였다. 이들 균주는 cellulase, protease 같은 lytic enzyme을 생산하였으며 식물성장 촉진 호르몬중의 하나인 IAA를 생성하였다. 이들 선발균들에 의한 식물 생장 촉진을 조사한 결과, BS11-1, BS11-2, BS11-3 균 배양액 관주 시 고추 유묘의 생육을 132%, 122%, 120% 증가 시켰으며, BS11-1, BS11-2 균주의 경우 뿌리의 신장 및 생육이 촉진되었음을 확인 할 수 있었다.
Having studied the production of monoclonal antibodies for developing a diagnosis medicine which shall be detected by a high-sensitivity test by using Rhodotorula rubra as a fungi-host which had been extracted through biochemical tests and follow-up examinations on Yeast-like fungi obtained from pulmonary tissues of pulmonary tuberculosis patients who had been in Kong ju National Tuberculosis Hospital from Jun. to Dec. in 1987, I. have gained such results as follows: 1. The fusion rate was influenced by feeder cell layers, cell density and time required to the cell fusion with cells in myelona subculture. 2. The fusion rate did not show any significant difference when the cell was applyed with two molecular weights, i.e., 1500 and 4000, of polyethylene glycol. 3. Fused cells after the addition of HAT selection media were bright and round, whereas unfused myelona cells and spleen cells were shrunk and granulated. 4. The cell fusion rate turned out to be about $57.2\%$(150 wells / 264 wells). 5. $10\%$(15 wells / 150 wells) of the positive reaction was detected in monoclonal antibody screening. 6. The titer which had reacted positively to Rhodotorula rubra fungal-host was 800 times in density after the gradual dilution of the produced monoclonal antibodies with Indirect ELISA method. 7. The Strongest specific reaction came out after the peroxidase labelled anti-human Immunogobulin had been applyed to Rhodotorula rubra for activating its nature after making drift with Carbonate-bicarbonate buffer (pH 9.6) and drying completely.
A 2-year-old spayed female Persian cat presented to Kangwon National University Veterinary Medical Teaching Hospital with pruritus and erythema on the tips of both ears, around the eyes, and in the caudal abdomen. This patient had previously been prescribed prednisolone, but did not respond positively to the treatment. A skin screening test revealed that there were no fleas or fungi, and that only cocci were present. Blood testing revealed no remarkable findings. The patient was prescribed antibiotics (amoxicillin-clavulanic acid 25 mg/kg for 2 weeks) with no prednisolone. After 2 weeks, clinical signs were alleviated and the skin screening test showed no signs of cocci. However, clinical signs recurred even with the prescription of antibiotics. Four weeks after the steroid-free interval, Malassezia spp. hypersensitivity was detected upon a serum allergy test, and pathological analysis confirmed eosinophilic and mastocytic superficial dermatitis in the caudal abdomen. Based on these results, we suspected allergic dermatitis and prescribed 7 mg/kg cyclosporine A once a day. After 3 weeks, clinical signs were resolved. Seven weeks after the first trial with cyclosporine A, we reduced the cyclosporine A dose to 7 mg/kg every other day. The patient's symptoms have since been well controlled for 6 months. This study suggests that cyclosporine A can be a good choice for treating cats with suspected allergic dermatitis that has not responded positively to steroid treatment.
In order to select an effective antibiotic substance against oral resident bacteria, we were isolated from soil and texonomically analyzed. Seven hundred and eighteen strains were isolated on humic acid- vitamin agar(HV agar) and 220 strains were on methanol medium from three each paddy forest, field and riverside soil samples. So, during the screening of antibiotics from soil, we isolated microorganisms showing powerful antagonistic activity against oral resident bacteria. Microorganism was tested against 25 strains of bacteria, yeast and fungi. Among them, No. 248 strain exhibited the most strongly growth inhibition. So, the taxonomical analysis the isolated strain was found to be unknown Actinomyces sp. and was named No 248. A production of the antibiotics from No. 248 begins at the early exponential phase developed at the 72th hour under the optinum conditions. The property of No. 248 antimicrobial compound was very stable under acid(pH 3.0) and alkali(pH 10.0) treatment, but it was instable in heat treatment at $120^{\circ}C$. For the improvement of antibiotic activity, two mutants were isolated from strain No. 248 by the treatment of mutagenic agents, NTG and hydroxylamine. As a result, the mutant strains excreted the potent antibiotics to inhibit the growth of Candida albicans.
고추탄저병(Colletotrichum gloeosporioides)에 대한 생물학적방제 능력을 가지는 엽권미생물을 선발하기 위하여 38과 87종의 약용식물로부터 243균주의 세균과 51균주의 사상균 그리고 30균주의 효모를 분리하여 이들에 대하여 항진균활성검정을 in vitro 및 in vivo에서 실시한 결과는 다음과 같다. 분리된 엽권미생물 중에서 PDA 배지 대치배양에서 10 mm 이상의 생육저지대를 형성하는 4개의 엽권미생물이 선발되었다. 선발된 4개의 세균균주 KB6, KB12, KB13 및 KB14의 PDB 배양여액 중에서 KB12 균주가 균사생장 억제율이 가장 높았다. 액체배양여액 처리에서 푸른 고추보다 붉은 고추에서 방제효과가 컸다. Bacterial cell 처리에서는 푸른 고추나 붉은 고추에서도 높은 방제효과가 있었다. 선발된 4개의 세균균주들은 모두 Bacillus subtilis로 동정되었다.
Aspergillus awamori를 전분이 함유된 Czapek-Dox배지에서 한천평판배지, 액체배지 방법으로 배양하고, glucoamylase의 생성을 glucose oxidase로서 추구하였다. 전분을 함유한 Czapek-Dox 한천배지상의 포도당의 존재와 그 함량은 glucose oxidase을 사용하여 정성, 정량 할 수 있었다. 따라서 많은 종류의 glucoamylase 생성균주를 신속하고 간편하게 검색하는 방법을 확립하였다. 정치배양은 포도당량은 많았으나, 진탕배양은 반대로 포도당 양은 적었다. 그러나 진탕배양에서 포도당이 성장과 대사에 조속히 활용 되는것 같았다. Cellulose acetate판을 이용한 전기영동법과 2% 전분용액을 사용하여 glucoamylase를 동정할 수 있었으며, 이때 glucose oxidase를 사용함으로서 확인이 쉽게 되었다. 전분 당화균의 강력 균주의 검색선발에 있어서 위의 결과를 활용할 것을 제의한다.
본 연구에서는 xylanase, mannanase를 생산하는 미생물균주를 분리하기 위해 1차로 토양 및 낙엽 등에서 곰팡이 균주를 약 50여주 분리하였으며, 1차 선발된 균주로부터 xylanase, mannanase를 생산하는 미생물 분리를 위해 xylanase 생성균주 선별배지, mannanase 생성균주 선별배지에 single colony를 접종한 후 clear zone이 생기는 15종의 균주를 2차 선발하였다. 2차 선발된 균주를 개별적으로 배양하여, DNS 방법을 활용하여 xylanase, mannanase 효소활성을 측정하여 6종의 균주를 선발하였다. 선별된 균주는 액상배양에서 생산한 xylanase, mannanase 효소활성이 각각 0.9~1.6 unit/mL, 0.2~0.4 unit/mL 범위로 나타났다. 이 중 결과가 좋은 3종을 선정하여 고상배양으로 배양한 균주의 xylanase, mannanase 효소활성은 각각 103.7~220.0 unit/g, 20.1~40.3 unit/g으로 분석되었다. 선별된 3종의 균주중 xylanase, mannanase 효소활성이 각각 197.3 unit/g, 39.9 unit/g으로 가장 높은 E-3 균주를 최종적으로 선발하였다. 최종으로 분리한 E-3 균주는 형태학적 특징과 DNA 염기서열을 비교한 결과 Aspergillus niger와 99% 일치하였다.
가스크로마토그라프와 질량분석기 (GC-MS)를 이용하여 감마리놀렌산(GLA) 생산 균주를 선발하였다. KACC에 보존 중인 Phytophthora 속, Pythium 속 및 Mucor 속 및 Rhizopus 속 등 4속에 속하는 44개 균주를 GC-FID를 통하여 GLA를 분석하였다. 4속 39종의 곰팡이 균주에서 GLA를 확인하였으며, M. hiemalis f. sp. hiemalis KACC 40264 균주에서는 GLA의 조성비가 전체 지방산의 24.8%로서 가장 높은 비율을 나타냈다. 속간에 전체적인 GLA 함량은 Mucor 속(14.2%)과 Rhizopus 속(14.3%)의 Zygomycota가 상대적으로 높은 함량을, 그리고 Phytophthora 속(3.3%)과 Pythium 속(3.0%)의 Oomycota는 낮은 함량을 나타냄으로서 뚜렷한 양분현상을 나타냈다. 지방산총량에서도 Mucor 속(15.4 mg/100 ml)과 Rhizopus 속(7.1 mg/100 ml)가 Phytophthora 속(2.6 mg/100 ml)와 Pythium 속(4.5 mg/100 ml)보다 높게 나타나서 전체적으로 지방산을 생산하는 유용한 균류자원으로 평가되었다. Mucor 속 내에서도 계통별로 큰 차이를 나타냈는데 18.2%의 GLA를 생성함으로 지방산총량이 50.8 mg/100 ml까지 이른 Mucor blumbeus KACC 40935가 실제적으로 가장 활력이 좋은 균주로 평가되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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