This study was carried out to investigate the residue level of fluoroquinolones in hen's general eggs and specific eggs by microbiological assay method and high performance liquid chromatography (HPLC) method. HPLC separation was carried out by reversed phase chromatography on a Symmetry $C_{18}$ (250${\times}$4.6 mm, $5{\mu}m$ particle size) with a phase composed of distilled water (containing 0.4% triethylamine and phosphoric acid) : Methanol (780 : 220, v/v), pumped isocratically at a flow rate of 1.0ml/min. A fluorescence detector was utilized with an excitation wavelength of 278nm and an emission wavelength of 456nm. The calibration curves were linear $({\gamma}^2{\geq}0.999)$ over a concentration range of $0.025{\sim}0.4{\mu}g/ml$. Average recoveries of the five fluoroquinolones in whole eggs at fortified levels of $0.05{\sim}0.2{\mu}g/g$ were ranged mean $78.1{\sim}91.7%$ and low coefficient of variation was less than 10% for all analysed samples. The limits of detection and limits of quantification for whole eggs were $1.2{\sim}6.0ng/g$ and $2.3{\sim}9.1ng/g$, respectively. Only one hen's general eggfrom chicken farm in Incheon was detected with the residual fluoroquinolones (Microbiological assay method; 1 of 47 general eggs) ; the range of residual concentration enrofloxacin was 0.12ppm. Those in food stores were detected with the residual fluoroquinolones (Microbiological assay method; 4 of 88 general eggs) ; the ranges of residual concentration enrofloxacin were $0.15{\sim}2.2 ppm$, ciprofloxacin $0.01{\sim}0.06ppm$, and hen's specific eggs (40) in food stores were not detected. For the microbiological assay method of fluoroquinolones in hen's eggs, as the results of comparative analysis, the disc diffusion method with E coli may be a little highly detected for the residual fluoroquinolones.
본 연구에서는 단체급식에서 많이 이용되는 시금치의 조리방법에 따른 카로티노이드 분리 및 정량을 위해서 HPLC를 이용하여 분석하였다. 시금치의 methanol 추출물로 THF 용매 분획물에 대하여 카로티노이드 및 그 이성체 화합물을 표준품으로 해서 분리된 카로티노이드의 RT와 함량은 lutein(63%), zeaxanthin(2.1%), crytoranthin, 13-cis-$\beta$-carotene(1.8%), a-carotene, trans-$\beta$-carotene(29.6%), 9-cis-$\beta$-carotene(3.1%)의 순으로 분리되었으며, 여기서 분리된 crytoxanthin은 미량 검출되어 본 실험에서는 정량하지 않았다. Lutein은 다른 카로티노이드에 비하여 조리방법 및 가열에 의한 영향을 비교적 덜 받는 것으로 나타났고, zeaxanthin은 조리 후 감소하는 경향을 보였다. 한편, trans-cis-$\beta$-carotene의 이 성 체 인 9-cis-$\beta$-carotene과 1,3-cis-$\beta$-carotene은 조리방법과 상관없이 가열 후 증가하는 경향을 보였는데 이는 가열과정이 trans-$\beta$-carotene의 이성화를 형성시키는 것으로 설명된다. Steam 조리 및 냉동 후 microwave조리에서 trans-$\beta$-carotene은 증가하는 경향을 보였다(p<0.05). 시금치의 총 non-provitamin A의 경우, 각 처리구간에 별 차이가 없었으나, 총 provitamin A에서는 원재료와 냉동 후 조리에서 유의적 차이를 볼 수 있었다(p<0.05). 또한 provitamin A로서의 기능이 가장 큰 trans-$\beta$-carotene은 steam으로 가열한 경우 가장 높았으며 또한 카로티노이드의 총 함량도 다른 시료보다 높은 함량을 보여주었다. 그 다음은 냉동 후 microwave로 가열한 시료로 두 시료와 유의적인 차이를 보였다(p<0.05). 이상의 결과로부터 steam 가열시료, 냉동 후 가열시료, 원재료를 microwave로 가열한 시료 그리고 원재료 시금치의 순으로 카로티노이드의 총 함량이 높게 나타났다.
토종콩에 포함된 daidzein과 genistein을 초임계 $CO_2$와 아임계/초임계 $H_2O$를 이용하여 추출하였다. 추출액은 역상 고성능 액체 코토마토그래피(RP-HPLC)를 사용하여 분석하였다. 초임계 유체의 온도와 압력, 에탄올 농도의 변화에 따라서 비배당체의 체류시간, 체류인자, 컬럼효율, 컬럼의 선택도, 분리도를 비교하였다. 초임계 $CO_2$를 사용하였을 때, daidzein과 genistein의 추출특성은 온도와 에탄올농도의 영향을 주로 받았다. 아임계/초임계 $H_2O$를 사용하였을 때는 초임계 상태의 $400^{\circ}C$, 250 bar에서의 추출효율이 가장 우수하였다. 일반적으로 초임계 $CO_2$를 사용하는 경우, 초임계 $H_2O$에 비해서 약 10배 이상 비배당체의 추출수율이 증가하였다.
1-L stirred-batch type reactor에서 기질들의 몰 비율을 1:2:2(corn oil:capric acid:CLA)하고 RM IM lipase을 사용하여 재구성 지질을 합성하였다. 합성된 재구성 지질은 총 capric acid 와 CLA을 각각 13.3 mol%와 8.9 mol% 함유하였다. 기능성 지방산은 주로 sn-1,3 position에 분포하였고, sn-2 position에는 linoleic acid가 대부분이었다. 재구성 지질의 요오드가와 비누화가는 68과 202이었고, 이는 재구성 지질에 함유된 capric acid 때문이었다. 반응 후 재구성 지질의 총 tocopherol 함량은 약 39% 감소하였다. 색도분석결과, 재구성 지질과 옥배유 서로간에 백색도$(L^*)$와 적색도$(a^*)$에서는 유의적 차이가 없었으나, 황색도$(b^*)$에서는 재구성 지질이 옥배유보다 yellowness를 보이며 유의적 차이를 보였다(p<0.05). RP-HPLC 분석결과 재구성 지질에서 capric acid를 함유하고 있는 TAG형태의 PN은 26-44로 전체의 약 34.2 area% 차지함을 알 수 있었다. 또한 옥배유가 $-56.77^{\circ}C$에서 주된 crystallization peak 정점을 보인 반면에, 재구성 지질은 $-46.2^{\circ}C$에서 주된 peak 정점을 나타내었다.
Lignans and neolignans are optically active plant secondary metabolites. Research on biosynthesis of lignans has already been advanced especially for the formation of (+) pinoresinol but information on the biosynthesis of 8-O-4'- neolignans is still limited. Moreover, the chemical structure(position of substituents on aromatic rings) and stereochemistry of 8-O-4' neolignans is not clear. Katayama and Kado discovered that incubation of cell-free extracts from E. ulmoides with coniferyl alcohol in the presence of hydrogen peroxide gave (+)-erythro- and (-)-threo- guaiacylglycerol 8-O-4'-(coniferyl alcohol) ether (GGCE)(diastereomeric ratio, 3:2) which is the first report on enzymatic formation of optically active -8-O-4' neolignans from an achiral monolignol. In this aspect, enzymatic formation of guaiacyl 8-O-4' neolignan is noteworthy to clarify its stereochemistry from incubation of coniferyl alcohol with enzyme prepared from Eucommia ulmoides. In this experiment, soluble and insoluble enzymes prepared from E. ulmoides were incubated with 30 mM coniferyl alcohol(CA) for 60 min. The enzyme catalyzed GGCE, dehydrodiconiferyl alcohol(DHCA), and pinoresinol identified by reversed phase HPLC. Consequently, diastereomeric compositions of GGCE were determined as erythro and threo isomer. Enantiomeric composition was determined by the chiral column HPLC. Both enzyme preparations enantioselectively formed (-)-erythro, (+)-erythro and (+)-threo, (-)-threo-GGCEs respectively.
Xerostomia is caused by organic or functional changes affecting the salivary system at different levels. Patients suffering from xerostomia may also complain of an oral burning sensation, ulceration or soreness, difficulty in swallowing, and poor denture retention. And pilocarpine is administered orally to induce salivary secretion. In Seoul National University Hospital(SNUH) pharmacy, the pilocarpine chewing tablets are prepared and supplied to patients of xerostomia in request of the dental hospital in SNUH. And we tested the salivary flow induction and the dissolution patterns of these products in saliva by a double-blind, sequential cross-over trials to eight healthy human volunteers with placebo. The pilocarpine chewing tablet contained 5 mg of pilocarpine, and placebo consisted of same materials as test drug, but didn't contain pilocarpine. In vivo experiment, all subjects were instructed to chew as 60-80 times/min. Mixed saliva was collected in the ranges of intervals such as 0-2, 2-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-30, 30-45 and 45-60 min after pilocarpine chewing tablet or placebo administration. Saliva volume was measured in each collecting time interval, and saliva pilocarpine concentrations were determined by reversed phase HPLC. The 82.5 percent $(4.13{\pm}0.69\;mg)$ of pilocarpine was extracted from chewing tablets during mastication of 60-80 times per minute for 60 minutes. Among these dissolved amounts, 90 percent was extracted within 20 minutes. The salivary flow rates were more increased in a group who administered pilocarpine chewing tablet at the interval of 5-10, 10-15, 20-30 and 45-60 min rather than a placebo-group, but only extracted amount of pilocarpine at 45-60 min interval is significanly different between two groups (p<0.05). But total amounts of saliva secreted for 1 hour in two group-pilocarpine and placebo treated- were $46.36{\pm}9.72\;ml\;and\;39.09{\pm}7.81\;ml$, respectively, and were not significantly different between two groups.
Objectives : Ijung-tang (IJT) is a traditional herbal formula and has been used to treat digestive diseases such as abdominal pain, vomiting, and diarrhea. IJT consists of four herbal medicines, Ginseng radix, Atractylodis rhizoma alba, Zingiberis rhizoma, and Glycyrrhizae radix et rhizoma, containing various bioactive compounds. Quality assesment of IJT preparations was performed by analytical method for determining marker compounds.Methods : Determination of seven marker compounds in IJT preparations was quantitatively conducted by high-performance liquid chromatography equipped with a diode-array detector. The marker compounds were separated on a reversed-phase C18 column and the analytical method was successfully validated. Chemometric analysis was performed to compare IJT water extracts and commercial IJT granules.Results : Limit of detection and limit of quantification values were in the ranges of 0.093-2.649 μg/mL and 0.283-8.027 μg/mL, respectively. Precisions were 0.30-3.87% within a day and 0.23-2.35% over three consecutive days. Recoveries of the marker compounds ranged from 87.35-107.05%, with relative standard deviation (RSD) values < 6.15%. Repeatabilities were < 1.20% and < 1.71% of RSD value for retention time and absolute peak area, respectively. The results from quantitative analysis showed that the quantities of seven marker compounds of IJT samples varied, as were found in principal component analysis and hierarchical clustering analysis.Conclusions : The analytical method developed in the present study was precise and reliable to simultaneously determine marker compounds of IJT. Therefore, it can be used for the quality assessment of IJT preparations.
강력한 항산화물질인 astaxanthin의 함량이 다른 천연 공급원에 비해 높아 astaxanthin 생산균주로 주목받고 있는 Haematococcus pluvialis는 상당한 두께의 견고한 세포벽을 가지고 있어, 세포 파쇄를 위해 많은 에너지가 소모되고 비용이 비싼 방법들이 이용되고 있다. 이에 H. pluvialis로부터 막자와 막자사발을 이용하여 astaxanthin을 손쉽게 효율적으로 추출하는 방법을 제시하였다. 막자와 막자사발을 이용하여 분쇄한 후 추출용매로 acetonitrile, acetone, methanol, dichloromethane : methanol (1:3, v/v), ethylacetate : ethanol (1:1, v/v)로 사용하여 비교하였을 때, acetone을 이용하였을 때 astaxanthin을 1.13~1.29 배 더 높은 효율로 추출할 수 있었다. 또한 acetone으로 H. pluvialis로부터 추출할 경우, 1차 추출로 H. pluvialis에 축적되어 있는 전체 astaxanthin의 96.7%를 회수할 수 있을 정도로 acetone은 astaxanthin 추출효율이 높았다. H. pluvialis가 세포내에 축적하는 astaxanthin은 축적 특성상 ester-형태의 astaxanthin로 다량 축적하므로, 추출물 내의 다양한 형태의 astaxanthin을 분리하기 위하여 농도 구배 시스템을 적용한 HPLC 분석을 수행하였다. H. pluvialis에 축적되어 있는 전체 astaxanthin 중 free astaxanthin이 45.9%이고, 나머지 54.1%는 ester-형태의 astaxanthin이었다.
참죽나무(Cedrela sinensis A.Juss) 잎을 재료로 하여, 김치, 나물, 부각 등의 조리하였을 때 이 식물의 flavonoid 화합물인 quercitrin의 함량 변화를 HPLC에 의한 용매계 THF-dioxane-MeOH-HOAc-5% H/Sub 3/PO/Sub 4/H/Sub 2/O(145:125:50:20:2:658)에서 분석하였다. 참죽김치를 5$^{\circ}C$에서 저장하였을 때의 quercitrin 함량은 1일째 13.06%, 6일째는 10.99%, 10일째는 11.49%, 20일째는 7.21%이며, 김치를 2$0^{\circ}C$에 저장하였을 시는 저장 1일째 15.33%, 6일째 10.83%, 10일째 9.85%, 20일째 5.78% 함유하고 있다. 나물의 경우 주성분인 quercitrin의 함량은 13.06%, 부각은 5.03%이었다. 따라서 김치의 경우 저장 일수가 길어짐에 따라 quercitrin함량은 감소하는 경향을 나타내며, 나물의 경우에는 quercetrin함량의 큰 변화를 볼 수 없고, 부각으로 조리한 경우 quercitrin의 함량은 급격히 감소하였다.
An antimicrobial material was purified from the acidified whole body extract of the jellyfish Nemopilema nomurai by using C18 reversed phase and cation-exchange high performance liquid chromatography (HPLC). Whole body extract and the purified compound (JAP-1) showed potent antimicrobial activities against a wide range of microorganisms including Escherichia coli D31, Bacillus subtilis, Streptococcus iniae and Candida albicans, without significant hemolytic activity. Treatment of JAP-1 with trypsin completely abolished all antibacterial activity against Bacillus subtilis, suggesting that JAP-1 is likely to be a proteinaceous antibiotic. The molecular weight of JAP-1 was determined to be 680.10 Da by MALDI-TOF mass spectroscopy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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