Ro09-0198, a cyclic peptide isolated from culture filtrates of Streptoverticillium griseoverticillatum, induced lysis of erythrocytes. Ro-09-0198-induced hemolysis was temperature-dependent and the sensitivity of hemolysis differed greatly among animal species. Preincubation of the peptide with phosphatidylethanolamine reduced the hemolytic activity, whereas other phospholipids present in erythrocytes in nature had no effect. A study of the structural requirements on phosphatidylethanolamine necessary for interaction with the peptide indicates that Ro09-0198 recognizes strictly a particular chemical structure of phosphatidylethanolamine: dialkylphosphoethanolamine as well as 1-acylglycerophosphoethanolamine showed the same inhibitory effct on hemolysis induced by Ro09-0198 as diacylphosphatidyl-ethanolamine, whereas phosphoethanolamine gave no inhibitory effect. Neither phosphatidyl-N-monomethylethanolamine nor alkylphosphopropanolamine had an inhibitory effect. Proton resonances of the peptide were observed in dimethyl sulfoxide solution in the presence of 1-dodecanoyl-sn-glycerophosphoethanolamine. This peptide caused permeability increase and aggregation of liposomes containing phosphatidylethanolamine. A glycerol backbone and a primary amino group of phosphatidylethanolamine are necessary for interaction with Ro09-0198 to cause membrane damage. Ro09-0198 induced a selective permeability change on liposomes. Glucose and umbelliferyl phosphate were effluxed significantly, but sucrose was only slightly permeable and inulin could not be released. Platelet aggregation and serotonin release simultaneously induced by Ro09-0198. Addition of peptide to rat platelet, loaded with the fluorescent $Ca^{++}$ chelator quin-2, caused immediate rise in cytosolic free $Ca^{++}$ to liposomal membrane containing phosphatidylethanolamine was observed dose dependently.
Phosphatidylethanolamine N-methyltransferase (PEMT) is known to be a membrane-associated protein. However, cytosolic PEMT was detected when sufficient amounts of exogenous phospholipids were added in the incubation media. The methylation of phospholipids was measured by the incorporation of the $[^3H]-methyl$ group from S-adenosylmethionine and the methylated phospholipids were analyzed by thinlayer chromatography. The essence of the assay condition for the cytosolic enzyme was the inclusion of 200 ${\mu}g$ of each substrate, phosphatidylethanolamine (PE), phosphatidyl N-monomethylethanolamine (PME) and phosphatidyl N,N-dimethylethanolamine (PDE), in the reaction mixture of 100 ${\mu}l$. The subcellular fractionation of brain PEMT activities revealed that approximately 38.1 % for PME, 39.5% for PDE, and 22.4% for PC formation was present in the cytosolic fraction. The general properties of cytosolic PEMT were characterized and compared with those of neuronal nuclei PEMT.
In deuterium NMR spectra of phosphatidylethanolamine bilayers with an extremely high content of saturated fatty acids, each C1 deuteron of the glycerol backbone gave rise to a doublet. This suggests the presence of two backbone conformations, the exchange between which is slow on an NMR time scale. The origin of the two conformations has been investigated in this work using saturated 1,2-diacyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine specifically deuterated in the glycerol backbone. The results showed that the two conformations originate from different domains, which have different fatty acid compositions. The differential scanning calorimetry of the bilayers suggested that the size of the domain is not large enough to show an independent phase transition. Thus, the formation of microdomains in the phosphatidylethanolamine bilayers has been concluded. Conformational difference in different domains was shown to be restricted to the C1 position of the glycerol backbone. The microdomains of phosphatidylethanolamine were retained even in the presence of other phospholipids.
Kim, Soon-Ok;Lee, Ho-Yong;Lee, Chong-Sam;Choi, Yong-Keel;Cho, Key-Seung
Korean Journal of Microbiology
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v.22
no.3
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pp.151-156
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1984
When enterobacterium, Escherichia coli B was cultivated with normal media in the presence of $0.2{\sim}0.6%$ Palmitoylcarnitine and $0.05{\sim}0.2%$ Ginseng Saponin, maximum population growth of the bacteria was presented 71% and 31%, respectively. Such a result, in vitro test, was concluded from the result that both detergents stimulated $C^{14}$-glucose, $C^{14}$-alanine and $C^{14}$-phosphatidylethanolamine uptake into the membrane of cells. The pre-treatment of cells with different amounts of Palmitoylcarnitine from $0.005{\sim}0.05{\mu}$ moles represented a significant increase of uptake, 33% of $C^{14}$-glucose, 129% of $C^{14}$-alanine and 158% of phosphatidylethanolamine at the concentration of $0.05{\mu}$ moles of Palmitoylcarnitine. On the other hand, the result of $C^{-2}%$ Saponin treatment showed the maximum value of uptake, 17% of $C^{14}$-glucose and 112% of $C^{14}$-alanine. In case of $C^{14}$-phosphatidylethanolamine, the maximum uptake showed 25% of increase at the concentration of $C^{14}$% Saponin.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.31
no.1
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pp.44-49
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2014
We were investigated by cyclic voltammetry to the stability through the electrochemical characteristics of phospholipid(L-${\alpha}$-phosphatidylethanolamine, LAPE) monolayer LB films. LAPE monolayer LB films was deposited by the LB method on the indium tin oxide(ITO) glass. The electrochemical properties was measured by cyclic voltammetry with a three-electrode system in 0.5 N, 1.0 N, 1.5 N and 2.0 N $KClO_4$ solution. The measuring range is continuously oxidized to 1650 mV, with an initial potential of -1350 mV was reduced. Scanning rates of 50, 100, 150, 200, and 250 mV/s was set. As a result, LB monolayer films of LAPE was appeared on irreversible processes by the oxidation current from the cyclic voltammogram. Diffusion coefficient (D) of LAPE was calculated 195, 15.9, 5.75, 1.38 and $0.754cm^2s^{-1}{\times}10^{-9}$ at 0.01 N, 0.05 N, 0.10 N, 0.15 N and 0.20 N $KClO_4$ solutions, respectively.
Aminoalcoholphosphotransferase catalyzes the synthesis of phosphatidylcholine and phosphatidylethanolamine from diacylglycerol plus a CDP-aminoalcohol such as CDP-choline or CDP-ethanolamine. Previously we suggested the presence of possible isoforms of this enzyme from Chinese cabbage roots and now report the cDNA cloning and expression analysis of AAPT3 encoding a third isoform of aminoalcoholphosphotransferase (AAPT3). AAPT3 contains an open reading frame of 1,176 bp coding for a protein of 392 amino acids. It shares 96 and 95% identity with Chinese cabbage AAPT1 and AAPT2, respectively, at the deduced amino acid level. The results from reverse transcriptase-polymerase chain reaction analysis indicate that expression of AAPT3 is up-regulated by low temperature as well as AAPT1 and AAPT2.
The principal objective of this study was to assess the effects of phosphatidylcholine (PC) and phosphatidylethanolamine (PE) extracted from egg yolk on the oxidation of tocopherol-stripped canola oil and its browning, as well as their content changes during 12 hr of heating at $180^{\circ}C$. PC and/ or PE contents in the oil were measured at 200, 500, 1,000, or 2,000 ppm. PL contents in the oil and oil browning were determined by high performance liquid chromatography (HPLC) and spectrophotometry, respectively. The oil oxidation was evaluated by the combination of fatty acid composition, conjugated dienoic acid content, and p-anisidine value. PC was degraded at a slower rate than PE during heating and the co-presence of PE reduced its rate of degradation. PE increased oil browning more profoundly than PC did. PC significantly reduced oil oxidation during heating; however, we noted a possible antagonism between PE and PC in reducing the oil oxidation. Egg yolk PC was a better antioxidant in oil oxidation during heating.
The effects of dietary n-3 fatty acids, ${\alpha}$-linolenic acid (18:3), eicosapentaenoic acid (EPA, 20:5), and docosahexaenoic acid (DHA, 22:6), on brain phospholipid content and fatty acid composition were compared in rats fed with a diet containing constant ratios of saturated fatty acid/monounsaturated fatty acid/polyunsaturated fatty acid (PUFA) and n-3/n-6. The dietary fat in each diet was added at the level of 10%. In each diet, n-3 PUFA comprised two-thirds of the PUFA and the remaining one-third was linoleic acid (18:2). Dietary fat containing linoleic acid as the sole source of PUFA was also given to the control group. The content of brain phospholipid in the three n-3 PUFA groups was significantly lower than that of the linoleic acid group. This reduction was greater in the EPA and DHA groups than in the ${\alpha}$-linolenic acid group. The decrease in phospholipid content in rats fed n-3 fatty acid-rich diets was largely due to the decrease in the phosphatidylethanolamine fraction. Each dietary n-3 PUFA was found to affect the fatty acid composition of brain phospholipids; the most pronounced alteration was observed in phosphatidylethanolamine fraction. Furthermore, the proportion of DHA in the phosphatidylethanolamine fraction tended to be higher in the DHA group than in other PUFA groups. In conclusion, dietary ${\alpha}$-linolenic acid, EPA and DHA can influence the phospholipid content, phospholipid subclass, and fatty acid composition in rat brain.
Sepsis is the leading cause of death in critically ill patients. Today, around 60% of all cases of sepsis are caused by Gram-negative bacteria. The cell wall component lipopolysaccharide (LPS) is the main initiator of the cascade of cellular reactions in Gram-negative infections. The core receptors for LPS are toll-like receptor 4 (TLR4), MD-2 and CD14. Attempts have been made to antagonize the toxic effect of endotoxin using monoclonal antibodies against CD14 and synthetic lipopolysaccharides but there is as yet no effective treatment for septic syndrome. Here, we describe an inhibitory effect of a phosphatidylethanolamine derivative, PE-DTPA (phosphatidylethanolamine diethylenetriaminepentaacetate) on LPS recognition. PE-DTPA bound strongly to CD14 ($K_d$, $9.52{\times}10^{-8}M$). It dose dependently inhibited LPS-mediated activation of human myeloid cells, mouse macrophage cells and human whole blood as measured by the production of tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) and nitric oxide, whereas other phospho-lipids including phosphatidylserine and phosphatidylethanolamine had little effect. PE-DTPA also inhibited transcription dependent on $NF-{\kappa}B$ activation when it was added together with LPS, and it rescued LPS-primed mice from septic death. These results suggest that PE-DTPA is a potent antagonist of LPS, and that it acts by competing for binding to CD14.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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