Tea is one of the most consumed beverages worldwide and the relatively high levels polyphenols is benefit for health. In this study, we developed an efficient system for proliferation of callus from 'Anji Baicha', a cultivar of tea (Camellia sinensis). Callus tissue was initially induced by culturing leaf explants on medium containing different plant growth regulators. For callus induction, thidiazuron (TDZ) was more effective than 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), ${\alpha}-naphthalene$ acetic acid (NAA), and $N^6-benzyladenine$ (BA). The frequency of callus induction from leaf explants reached 90.21% on $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ TDZ and the developed callus was reddish and friable. We also tested the effect of different concentrations of NAA, 2,4-D, indole 3-acetic acid (IAA), BA, and TDZ, alone and in combinations, on callus proliferation. Medium supplemented with TDZ in combination with IAA was suitable for callus proliferation and accumulation of tea polyphenols. The growth index value and tea polyphenol content of callus cultured on MS medium containing $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ TDZ and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ IAA was maximally 1,351% and 23.24%, respectively, and the relative abundance of epicatechin was as high as 17.449%. We also measured the antioxidant activity of all samples and the callus with the highest tea polyphenol content also exhibited high potential radical scavenging activity.
Tissues of $Panax\;Schinseng\;N_{EES}\;root$ were cultured on the synthetic agar media to investigate the nutrient efficiency on the callus induction and organ formation. The differentiation pattern of the callus mass and the structure of the induced organ (root) were observed internally. On White's medium, callus formation needed the supplement of 2,4-D (5mg/l) and kinetin (1.0mg/l), and on MS medium the root induction NAA (0.2mg/l) and kinetin (0.1mg/l). In order to investigate the effect of inorganic components on callus formation, the inorganic part of White' medium was substituted with those of Heller, Murashige Skoog, and Earle. As the result culture Earle's was most effective. On the other hand, the roots were induced from the meristem in the deep region of callus mass. Since this meristem is similar to the pericambium of tap root, they are the same on the pattern of morphogenesis.
본 실험은 지치 (Lithospermum erythrorhizon)의 뿌리조직으로부터 유도한 캘러스에 ${\gamma}$선을 조사하여 배양기간과 배지조성 및 명.암배양의 조건에 따라 ${\gamma}$선 조사가 캘러스 생장촉진 효과가 있는지를 검토하고자 수행하였다. 지치의 캘러스 생장은 전체적으로 암배양에서보다 명배양에서 효과적이었다. r선 조사에 의한 효과에 있어서는 LLB2N2배지의 8 Gy에서 캘러스의 생장에 효과가 가장 좋았고, LLK2I0.2배지에서는 16 Gy에서 캘러스 생장효과가 좋았지만 암배양에서의 ${\gamma}$선처리 효과는 없었다. 명배양에서 LS배지에 BA 1 mg/L와 NAA 1 mg/L를 첨가할 경우, BA 2mg/L와 NAA 2 mg/L를 첨가할 때보다 캘러스의 생장효과가 있었으나, 암배양에서는 차이가 없었다. 특정선량에 대한 BA와 NAA의 농도에 있어서는 각각 2 mg/L가 효과적인 것으로 나타났다. MK2I0.2배지는 0.5 Gy와 1 Gy에서 캘러스의 생장에 효과적이었으나, 기본배지의 종류에 있어서는 MS배지보다 LS배지에서 더 효과적이었다. M-9배지에서는 명배양에서도 캘러스의 생장은 저조하였으나, 16 Gy 및 30 Gy에서 캘러스의 생장이 30%이상 증가하였다. 암배양에서는 ${\gamma}$선 조사에 의한 캘러스의 생장효과는 거의 없었다.
버즈풋 트레포일 (Lotus corniculatus L. cv. Empire) 종자로부터 직접 캘러스를 유도하고, 형성된 캘러스로부터 식물체를 재분화하는 조건을 확립하였다. 캘러스 유도시 사용한 SH (Schenk and Hildebrandt), MS (Murashing and Skoog), N6 (Chu) 배지중에서 SH 배지가 캘러스 유도에 유리한 것으로 나타났으며, 캘러스 유도 및 중식시에는 2,4-D $3mg/{\ell}$ 을 첨가한 조건이 가장 효율이 좋았다. 식물체 재분화 조건은 BOi2Y 배지에서 20일 간격으로 계대배양하며 재분화를 완성한 조건 2가 더 좋았으며, 캘러스로부터 완전한 식물체로 재분화되는데 필요한 시간은 약 60일이었다.
The optimized in vitro culture system was investigated for improvement of regeneration efficiencies by observing the responses of scutella-derived callus of Korean rice (Oryza sativa L.). Large variations of callus induction (43.9-93.9%) and shoot regeneration (0-88.7%) were observed among the rice cultivars depending on medium. However, shoot regeneration was significantly improved by selected utilization of basal medium, growth regulators, and carbon sources. N6 basal medium was more efficient for embryogenic callus induction than MS or LS basal medium, while MS was superior to N6 for shoot regeneration. The calli of highly regenerative cultivars grew faster and showed higher rates of green tissue formation (GT) and shoot regeneration (SR) and lower rate of callus browning (CB) than those of recalcitrant cultivars. Although a higher level of kinetin stimulated the GT and SR in highly regenerative cultivars, $10\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin generally suppressed the GT and SR, while CB was accelerated compared to $2\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin. Additional benefits of sorbitol combined with maltose (or sucrose) under $5\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin were certainly confirmed on regeneration efficiencies compared to sucrose alone as carbon source and osmotic regulator. This combination showed high rate of GT and SR with multiple shoots while low rate of CB. With MSRK5SM-Pr medium ($5\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin, 3% sorbitol, 2% maltose, $500\textrm{mgL}^{-1}$ proline), the regeneration efficiencies of total 17 out of 24 cultivars were practically improved 160% on average compared to MSRK2S ($2\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin, 3% sucrose) control medium. Especially, the medium was most effective to the cultivars showing a medium level of regenerability such as Daesanbyeo and Dongjinbyeo and Suwon477, enhancing efficiencies more than 300-600% compared to MSRK2S medium.
페레니얼 라이그래스의 최적 조직배양조건을 확립하기 위하여 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도 및 효율적인 식물체 재분화조건을 체계적으로 확립하였다. 배발생 캘러스 유도시 첨가되는 auxin으로는 2,4-D가 가장 효율적이었으며, 9 mg/L 2,4-D와 0.1 mg/L BA가 첨가된 MS 배지에서 배발생 캘러스가 가장 높은 빈도로 유도되었다. 식물체 재분화는 배발생 캘러스를 1 mg/L 2,4-D와 5 mg/L BA가 첨가된 N6 배지에서 배양했을 때 58.3%의 높은 재분화율을 나타내었다. 본 연구를 통하여 확립된 단기간의 효율적인 재분화 시스템은 분자육종을 통한 신품종 페레니얼 라이그래스 개발에 유용하게 응용되어질 수 있을 것이다.
Blood perfusion of skeletal muscle and callus was evaluated using contrast-enhanced ultrasonography (CEUS) in a canine osteotomy model to determine the applicability of CEUS in the assessment of neovascularization during fracture healing and to compare the vascular signals on CEUS between external skeletal fixation and cast-applied dogs. In 6 Beagle dogs, a simple transverse osteotomy was performed at the left tibial shaft and external skeletal fixation (n = 3) or a cast (n = 3) was applied. Radiography, power Doppler ultrasonography (power Doppler), and CEUS were performed until complete union was achieved. On CEUS, vascular changes were quantitatively evaluated by measuring peak intensity (PI) and time to PI in the soft tissue and callus and by counting the vascular signals. Vascular signals from the soft tissue were detected on power Doppler and CEUS on day 2. Significantly more vascular signals were detected by CEUS than by power Doppler. On CEUS, PI in the surrounding soft tissue was markedly increased after the fracture line appeared indistinctively changed on radiography in all dogs. In the cast-applied dogs, vascular signals from the periosteal and endosteal callus were detected on CEUS before mineralized callus was observed on radiography. CEUS was useful in assessing the vascularity of soft tissue and callus, particularly in indirect fracture healing, and provided indications of a normally healing fracture.
To explore the possibility of introducing Zea mays transposable element Ac(activator) which can be used as a mutagen and gene tag in tobacco plants other than maitre, we tried to introduce a cloned Ac element into tobacco cells by an Agrobacterium tumefaciens binary vector system. Transformation of N. babacum cv. Burley 21 tissues and regeneration to whole plant were carried out. The frequency of the transformed callus induced in shoot induction media was higher than that of transformed callus induced in callus induction media. However, the calli were not grown in the second selection media, and became yellow senescent calli. Regenerated tobacco plantlets with foreign gene were also obtained in shoot induction media containing 100 $\mu\textrm{g}$/ml kanamycin and 100$\mu\textrm{g}$/ml carbenicillin. The leaf tissues of transformant was also resistant to 1000 $\mu\textrm{g}$/ml kanamycin. The chromosomal DNAs of transformant and normal plant of N. tabacum were digested by EcoR I and Hind III but not by Pst I.
Lee Jeong-Sun;Kim Chang-Kyun;Kim In-Sung;Lee Eun-Ju;Choi Hong-Keun
Journal of Plant Biotechnology
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제8권1호
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pp.21-25
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2006
Phragmites australis (reed) has received much attention as being one of the principle emergent aquatic plants for treating industrial and civil wastewater. Plant regeneration via plant tissue culture in p. australis was investigated. Three types of callus were identified from seeds on N6 medium plus 4.5 UM 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). Yellow compact type showed the best redifferentiation, whereas white compact type and yellow friable were not competent to differentiate into plane. Solid medium culture was better than liquid suspension culture for enhancing callus growth when N6 medium supplemented with 4.5 ${\mu}M$ 2,4-D was used. Phytagel, as a gelling agent, was superior to agar in plant regeneration on N6 medium, supplemented with 9.4 ${\mu}M$ kinetin and 0.54 ${\mu}M$$\alpha$-naphthaleneacetic acid (NAA). Transfer of the plantlets regenerated from kinetin and NAA-supplemented N6 medium to growth regulator-free MS medium enhanced the further development of the plantlets. Plantlets on subsequently grown to maturity when tansferred to potting soil. The regenerated plants exhibited morphologically normal. The system for plant regeneration of P. australis enables to propagate elite lines on a large scale for water purification in the ecosystem
In an effort to optimize tissue culture conditions for genetic transformation of orchardgrass (Dactylis glomerata L.), an efficient and high-frequency plant regeneration system from seed-derived calli was established. Embryogenic calli induced on MS medium containing 3mg/L 2,4-D and 0.1mg/L BA had significantly improved regeneration ability. Plant regeneration rate was 92% when embryogenic calli were cultured on N6 medium supplemented with 1mg/L 2,4-D and 3mg/L BA. Among three kinds of medium, MS and N6 medium were optimal for embryogenic callus induction and plant regeneration, respectively. Ho difference in callus induction frequency was observed among four cultivars of orchardgrass, however, "Roughrider" cultivar showed higher regenerability with the frequency of 61%. Addition of maltose to the regeneration medium as a carbon source dramatically increased regeneration frequency up to 69%. A short tissue culture period and high-frequency regeneration system would be beneficial for molecular breeding of orchardgrass through genetic transformation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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