In order to minimize the mycelial pellet size of a high phosphate-solubilizing fungus, Aspergillus sp. PS-104 in liquid media, one of the critical obstacles during the submerged culture of filamentous fungi, an investigation was focused on the culture conditions (media and inoculum size) and additives (different soils, surfactants and polyethylene glycol 200). When the fungus was cultured in PDB, SDB and YPD media. their pellet sizes decreased in the order of SDB=YPD>PDB. At the higher concentrations of initial inoculum ranging from $1{\times}10^3$ to $1{\times}10^7$ conidia/ml, the smaller size of pellet was formed in the PDB medium. In addition, the pellet size was effectively reduced by 1/6${\sim}$1/4 by the addition of 0.1% soil containing zeolite, diatomite, loess, kaoline and talc, excluding bentonite. The addition of 0.1% Tween 80, Triton X-100 and PEG 200 also decreased the pellet size, but SDS completely inhibited the fungal growth.
The effects of rice hull (RH) powder on the anticarcinogenic activity of submerged-liquid cultures of Agaricus blazei Murill (AB) were assessed for mouse ascites cancers induced by mouse Sarcoma S-180 (S-180) cancer cells. Optimal growth of AB mycelia in the basal liquid culture medium, containing soybean meal, was achieved by culturing at $25^{\circ}C$ for 5 days, when evaluated by $\beta$-glucan content, Brix, and mycelial weight, relative to other culture conditions. Hot-water extract (HWE) of the submergedliquid culture of AB mycelia grown at $25^{\circ}C$ for 5 days exhibited a stronger anticarcinogenic activity, relative to HWE from other culture conditions. No such effects were obtained from AB mycelial cultures by alternative temperature-controlling cultures. Both cytotoxicity for S-180 cells and anticarcinogenic potentials for mouse ascites cancer of the HWE from AB mycelia grown in the basal medium containing 1% RH powder for 5 days at $25^{\circ}C$ were significantly (p<0.05) enhanced, relative to HWE from the AB mycelia culture of the basal medium without RH powder. These results indicate that HWE of submerged-liquid culture of AB mycelia, incubated in media containing 1% RH powder at $25^{\circ}C$ for 5 days, enhanced anticarcinogenic activity against S-180 cell-induced mouse ascites cancer, and suggest that RH powder is an excellent ingredient for the improvement of the anticarcinogenic potentials of the submerged-liquid culture of mushroom mycelia.
Control effects of phosphorous acid were investigated on Phytophthora blight of red pepper plants in greenhouse and field. In vitro test, the mycelial growth of Phytophthora capsici was inhibited by the phosphorous acid more than 97% at 1,000 ${\mu}g$ and 10,000 ${\mu}g$ a.i./mL in the liquid and solid culture, respectively. At concentration of 10 ${\mu}g$ a.i./mL of phosphorous acid, in the liquid culture the mycelial growth of P. capsici was inhibited 46.2%, however inhibited only 4.9% on the soild culture. Zoosporangial formation was also inhibited 89.1% by phosphorous acid at 100 ${\mu}g$ a.i./mL. Phosphorous acid affected more zoosporangial formation of P. capsici than its mycelial growth. At the concentrations of 10,000, 1,000 and 100 ${\mu}g$ a.i./mL of phosphorous acid, germination of zoosporangia was inhibited 100, 84.3 and 44.2%, respectively. Mycelial growth and zoosporangial formation of P. capsici were little affected at the concentration of 10 ${\mu}g$ a.i./mL of phosphorous acid. Cermination of zoosporangia was also little affected at this concentration, however growth of the germ tubes was inhibited and the abnormal mycelial growth was observed. Phosphorous acid suppressed the incidence of Phytophthora blight of red pepper plants up to $77.0{\sim}62.0%$, in greenhouse. Phosphorous acid suppressed the incidence of Phytophthora blight of red pepper plants up to 54.0% at the conventional culture in field. Treatments of phosphorous acid increased up to 113% in height, 135% in number of fruit, and 129% in weight of fruit.
Some of thermophilic fungi which has growth-promoting effect on Pleurotus ostreatus were isolated from compost during high temperature fermentation process. The temperature optima of 7 isolated thermophilic fungi were $50^{\circ}C$ on PDA media. Isolated strains S-1 and S-2 have the best mycelial growing rate, so these isolates were expected as excellent thermophilic fungi for high temperature composting and mycelial growing of oyster mushroom. In liquid culture, the optimal pH of thermophilic fungi observed variously, pH 7.0-10.0 but most of thermophilic fungi grow well in pH 8.0-pH 9.0 and the final pH of media after cultured was done pH 5.5-6.0. In liquid culture of thermophilic fungi on the optimal condition, S-2 have the best mycelial growing rate. The growing rate of thermophilic fungi S-1, S-2, S-5, and S-10 on lignocellulosic substrates was good but Humicola grisea var. thermoidea, well know thermophilic fungi which has growth-promoting effect on Agaricus bisporus, was poor and which was well grown on PDA at $50^{\circ}C$, pH 7.0. Isolated strain S-1 was identified as Trichophyton sp. and other 6 strains were identified as Sepedonium sp. by morphological characteristics.
This study was carried out to obtain the basic data for the mycelial growth conditions of cauliflower mushroom, Sparassis crispa. Twenty-one isolates were collected from domestic and abroad. The optimal temperature and pH for the mycelial growth of these isolates were $23^{\circ}C$ and pH 6.0, respectively. The mycelial growth was the best in the HBA medium, but very poor in the Lilly medium. However no mycelial growth in the CzapekDox medium. The utilization of carbon source was the best with fructose, and that of nitrogen source was the best with glutamine when compared to other tested sources. The selected isolate ASI150010 produced the highest mycelial weight in liquid culture containing soybean mill ($15\;g/{\ell}$) and potato ($200\;g/{\ell}$) extract. And uncleaned rice, wheat and barley were found to be good substrates for the mycelial growth S. crispa.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.2
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pp.249-254
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2004
Effect of mulberry tree powders on the antioxidant activity of submerged -liquid culture of mushrooms was investigated. Agaricus blazei (AB), Hericicum erinacium (HE), Pleurotus ostreatus (PO), Phellinus linteu (PL) and Paecilomyces japonicus (PJ) were cultured in a shaking incubator (200 rpm, $25^{\circ}C$) for 7 days in culture media: 1) basal medium (BM) and 2) BM+1% mulberry tree powders (BMM). Hot water extracts from the submerged-liquid cultures of mushrooms and BMM were freeze-dried for the measurement of antioxidant activity, of which reaction mixture (25 mL: 10 mL of 0.2 M sodium phosphate buffer, pH 8.0; 4.5 mL distilled water; and 10.5 mL ethanol) contained 275 $\mu$mol linoleic acid and one mg test sample. The reaction mixture was incubated in a shaking incubator (200 rpm, 4$0^{\circ}C$) for 16 days. Peroxide value (POV) was measured for a period of over 16 days, and malonaldehyde (MA) was determined only for samples from the day 16 of incubation. Mycelial weight of mushroom strains cultured in BMM was greater than BM. The antioxidant activities of AB-cultured in BW (AB-BMM) and HE-cultured in BMM (HE-BMM) were superior to those of other mushroom strains-cultured in BMM or BM and of BMM. These results suggest that mulberry tree powders enhance the antioxidant activity of submerged-liquid culture of mushroom strains. The AB-BMM and HE-BMM were the most active cultures.
Mycelial viability and cultivation characteristics of strains of Hypsizygus marmoreus after long-term storage were investigated. The experimental conditions were the storage at $4^{\circ}C$ using a slant culture technique with or without mineral oil, and in liquid nitrogen tank in the presence of 10% glycerol or 10% glycerol with 5% trehalose. The myceila of four strains of H. marmoreus were thawed at 9, 21, 33, and 45 months after beginning of the storage, and then the growth of the mycelia was measured on a PDA plate with serial transfers to new plate for the recovery. The mycelial growth data after 45 months showed that the mycelia were mostly viable but not fully active particularly when they were stored in liquid nitrogen with 10% glycerol. The growth activity could be fully recovered after second transfer to new PDA plate. Cultivation of mushroom fruiting body using the recovered mycelia also demonstrated that the storage methods employed in this work were applicable for the long-term storage of H. marmoreus.
Cordyceps pruinosa grows upon dead pupae of Lepidoptera and produces one or $3{\sim}4$ club-shaped stromata per host. The stromata have distinct club-shaped head and long stalk. The length of stromata varies from $1{\sim}3\;cm$. Apical head consists of densely crowded semi-immersed perithecia, which are $360{\sim}400\;{\times}\;180{\sim}200\;{\mu}m$ in size. Asci are $150\;{\mu}m$ in length and $2.8{\sim}3\;{\mu}m$ in diameter. Ascospores, which are $124{\sim}141\;{\mu}m$ in length, have thin thread-like structures in the middle with part-spores attached on both sides. Each ascospore does not separate into part-spores after dispersal, but each part-spore germinates and together develops a colony. The imperfect form produces phialides of $15{\sim}24\;{\times}\;2{\sim}3\;{\mu}m$ size, with spherical or spindle shaped conidia of $4{\sim}6\;{\times}\;1.8{\sim}2.4\;{\mu}m$ size, The anamorph was identified as Mariannaea elegans Samson. YMA and SDAY agar media with pH 7 was produced abundant mycelial growth with high density. Best mycelial growth was observed when dextrin was used as a carbon source. Lactose, saccharose and sucrose also produced high mycelial growth. Peptone, yeast extract and tryptone produced abundant mycelial growth, when used as nitrogen sources. Highest mycelial growth and density was observed when C/N ratio was 1 : 1 at the concentration of 12.5 g/l each. $KH_2PO_4$ was the best mineral source for mycelial growth. Highest mycelial dry wt. was produced in YM and SDAY broths. Optimum inoculum for 100 ml of liquid broth was 6 mycelial discs. Similarly, optimum liquid culture period was 7 days.
Kim, So Young;Kim, Young Suk;Jang, Joung Soon;Kim, Boh Hyun;Rakib, Abdur Md.;Kim, Gon Sup;Kim, Jeong Ok;Ha, Yeong Lae
Journal of Life Science
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v.24
no.12
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pp.1316-1324
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2014
Most beta-glucans obtained from various fruit bodies of mushrooms and mushroom mycelial cultures have high-molecular weight glycoproteins, conjugated with beta-glucans. We report that isoflavone-conjugated glycolproteins (designated as gluvone) were isolated and exhibited stronger anticarcinogenic activities. Agaricus blazei mycelia (ABM) was cultured in a liquid medium containing soybean flakes for 14 days. The liquid culture was autolyzed by incubating at $53^{\circ}C$ (pH 5.5) for 3 h. A crude glycoprotein (CGP) fraction with a cytotoxic effect on a mouse ascite cancer cell line (S-180) and a human breast cancer cell line (MCF-7) was isolated from the autolyzed ABM cultures by 80% ethanol treatment. Gluvone was isolated from the CGP with Sephadex G-75 column chromatography. It exhibited a stronger anticancer effect than CGP against the S-180 cell-induced female ICR mouse ascites carcinogenesis. Gluvone with 9,400 daltons was identified as a glycoprotein conjugated with isoflavone. According to HPLC and GC analysis, in conjunction with $^1H$-NMR spectral analysis, it contained 60% carbohydrates (glucose, fructose, and ribose), 31% protein, and 2% isoflavone (daidzein and genistein), which is a novel material. These results indicate that a strong anticarcinogenic gluvone was isolated from the autolyzed product of a submerged liquid culture of ABM, suggesting that autolysis could be a useful tool to produce antitumor agents.
Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for the rapid detection of Fusarium species, known as harmful fungi in food. One of the hybridoma cell lines (lB8) which produced a monoclonal antibody (Mab) specific to Fusarium extracellular polysaccharide (EPS) was screened and the Mab was produced and purified. A detection limit of the sandwich ELISA against F. moniliforme EPS was $0.001\;\mu\textrm{g}/ml$ in the standard curve. Among the 59 strains tested, most Fusarium species showed hight reactivity with Mab lB8, even when the culture broths were diluted 100,000 times. On the other hand, the other genera, except A. versicolor and Trichoderma viride, had no reactivity. When 1 to $100\;\mu\textrm{g}$ of F. moniliforme EPS was spiked into rice, potato, and mandarine orange, the average recoveries were 151%, 84%, and 94%, respectively, determined by sandwich ELISA. The correlation coefficients between the EPS levels determined by sandwich ELISA and the dry mycelial weight of the liquid culture of F. moniliforme, as well as between the EPS and colony forming unit in solid culture of potato, were 0.97 and 0.91, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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