In this study, the micronucleus test with peripheral blood using acridine orange coated slides was evaluated in mice treated with mitomycin C(MMC) at doses of 0.5, 1.0 and 1.5 mg/kg body weight. The peripheral bloods were obtained at 0, 24, 48 and 72h after treatment. The frequencies of micronucleated reficulocytes(MNRET) in the MMC-treated groups increased dose-dependently, and showed a peak time at 48h after treatment. We also performed the sex differences of MNRET frequency in 0.5 mg/kg MMC treated group, and we observed no sex differences in this experiment. And we evaluated the usefulness of a direct acting clastogen, N-methyl-N-nitrosourea and a indirect acting clastogen, benzo(a) pyrene as the positive control in this supravital micronucleus test. They also caused a significant increase in MNRET frequencies. These results suggest that the supravital staining micronucleus test using MNRET can be useful tool to evalulate the quantitative and qualitative assessment of genotoxicity in vivo compared to classical in vivo micronucleus test using bone-marrow cells.
The micronucleus test using peripheral blood reticulocytes (RETs) was evaluated in ICR mice treated with N-methyI-N-nitrosourea (MNU) and benzo(a)pyrene [B(a)P] as model clastogens. The frequency of micronucleated reticulocytes (MNRETs) in both positive compounds was similar to other results which were reported previously. On the other hand, an anticlastogenic effect of the natural antioxidant, $\beta$-carotene and one of taroholds, galangin as model anticlastogens were investigated using simultaneous treatment. Mice were treated with a model clastogen alone, or with a model clastogen and a model anficlastogen simultaneously. Both $\beta$-carotene and galangin showed anticlastogenic effects against MNU- or B(a)P-induced micronuclei in mice. However, galangin has stronger activity than $\beta$-carotene. Results from our experiment suggest that the in vivo supravital staining micronucleus test using peripheral blood is useful in the evaluation of clastogenic and anticlastogenic effects.
In this research, the genotoxic effects of Pinelliae Rhizoma (PR) extracts, one of famous herbal agents in Korean medicine were evaluated using the mouse micronucleus test. PR extracts was administered once a day for 2 continuous days by oral gavage to male ICR mice at doses of 2000, 1000, and 500 mg/kg. Cyclophosphamide was used as a known genotoxic agent in a positive control. The appearance of a micronucleus is used as an index for genotoxic potential. No PR extracts treatment-related abnormal clinical signs, body weight changes and mortalities were detected. Significant (p<0.01) increases of the numbers of polychromatic erythrocytes contain micronucleus in prepared bone marrow cells were detected in CPA and PR extracts 2000 mg/kg treated groups as compared with intact control, respectively. The results of intraperitoneal dose mouse bone marrow cell micronucleus test of PR extracts were positive in the present study. It is considered that there were no problems from cytotoxicity of PR extracts tested in this study because the polychromatic erythrocyte ratio was detected as > 0.42 in all tested groups.
Objectives : In this study, erythrocyte micronucleus test of pomace Schisandra chinensis extracts was conducted in order to up-cycling to a high value-added industry using by-products discarded in the production process of Schisandra chinensis products and active ingredients such as dibenzocyclooctadiene lignans in Schisandra chinensis. Methods : The micronucleus test was performed according to the 'OECD Guidelines'. Including the negative control group(0 mg/kg) and the positive control group(CPA 70 mg/kg), pomace Schisandra chinensis extracts were orally administered to ICR mouse at doses of 500, 1,000, and 2,000 mg/kg. After sacrificing the experimental animals bone marrow cells were collected and micronucleated polychromatic erythrocyte were counted. And genetic toxicity was confirmed according to the frequency of micronucleus. Results : As a result of the micronucleus test, there were no changes in body weight, clinical signs, or death in any group. But, a significant increase was observed in the frequency of micronucleated polychromatic erythrocyte among polychromatic erythrocytes in the positive control group administered with CPA compared to the negative control group(p<0.05). Whereas, no significant increase was observed in the group administered with pomace Schisandra chinensis extracts compared to the negative control group. Conclusions : Pomace Schisandra chinensis extracts did not induce micronucleus in bone marrow cells of ICR mouse up to a concentration of 2,000 mg/kg, and it was judged that no genetic toxicity was observed.
본 시험물질인 GMP으로부터 sialic acid를 분리 및 이의 농도를 23%로 높게 정제한 GMP 가수분해물(23%-GNANA) 분말에 대해 발암성 유발 유 무 판단의 기초자료를 얻기 위하여 마우스 골수세포를 이용한 소핵시험을 실시하였다. 결과로서, 다염성 적혈구의 소핵출현 적혈구의 출현비율은 음성 대조군과 시험물질 투여군간 평균 차이의 유의성이 없었다(p<0.05). 또한 동물개체별로 관찰한 결과에서도 음성대조군과 시험물질 투여군간 유의성이 없었으며(p<0.05), 시험물질의 용량의존성 반응은 전체적으로 나타나지 않았다. 이러한 결과로 보아, GMP로부터 제조한 23%-GNANA는 고농도로 sialic acid가 농축되었을 뿐, 일반 식품인 GMP 수준에서 마우스 골수세포에 대해 소핵의 유발성이 없는 것으로 판단되었다.
Objectives : This study was to assessment the toxicity of Sipjeondaebo-tang(Shiquan dabu-decoction) by micronucleus test. Methods : Sipjeondaebo-tang(Shiquan dabu-decoction) water-extract in vivo micronucleus test was performed using 7 weeks ICR mice. At 24 hours after with Sipjeondaebo-tang extract at the doses of 0, 500, 1000 and 2000 mg/kg/day by peritoneal route mice were sacrificed and bone marrow cells were prepared for smear slides. Results : As a result of counting the micronucleus polychromate erythrocyte of 2000 polychromate erythrocyte, all treatment groups did not show statistically significant increase than negative control group. and there was no clinical sign and body weight connected with injection of Sipjeondaebo-tang(Shiquan dabu-decoction) extract. Conclusions: It was concluded that Sipjeondaebo-tang extract did not induce micronucleus in the bone marrow cells of ICR mice
Interest in the studies of diesel exhaust emission has been increasing by the expected increase in the use of diesel powered automobiles out of concideration of fuel economy. It was well known that diesel exhaust emission was mutagenic in the bioassay as Ames test. The authors tried to find out the cytogenetic effect of diesel exhaust emission by the operational condition of engine such as speed and load. For the investigation of those effects, 66 male mice of ICR strain were used. The benzene-ethanol extracts of diesel exhaust emission were injected intra peritoneum 25rng/kg and 50mg/kg respectively. To evaluate the cytogenetic effect, mouse bone marrow micronucleus test was carried out. The frequency of micronucleus was different among the various groups according to the operational conditions of engine. The frequency of micronucleus in idling group was the highest of all the groups the subgroup of 50mg/kg showed the rate of 1.30%, 25rng/kg subgroup 0.55%. And the group of 2000rpm with 50% load showed the lowest rate of micronucleus appearance as 0.20% and 0.15%. In general, the frequency of micronucleus was shown higher in propotion to load and was shown inversely proportional to speed.
Objectives : TA, a polyherbal extract, typically is used for pharmacopuncture therapy on patients with traffic accident-related injuries and musculoskeletal diseases. This study was performed to evaluate the safety of the TA extract, using a micronucleus test. Methods : The dose range and sampling time were first established. An in vivo micronucleus test was then performed to determine the induction of micronuclei in mouse bone marrow cells after a single intramuscular administration of TA to 7-week-old ICR mice (0.2 ml/animal, at 24 hours post-dosing). Results : The incidence of micro-nucleated polychromatic erythrocytes (PCEs) in PCEs in the TA group was similar to that in the negative-control group, while that in the positive-control group was significantly greater. The positive- and negative-control groups did not differ in the ratio of PCEs to total erythrocytes. Conclusions : Our toxicity study indicates that the TA extract does not induce micronucleus formation in mouse bone marrow cells.
The genotoxicity of water extract of Bojungikkeehapdaechilki-tang was tested by In Vitro Chromosome Aberration Test. Bacterial Reverse Mutation Assay and Micronucleus test according to OECD Guidelines and KFDA Guidelines. The obtained results were as follows : 1. Chromosome Aberration Test: In Vitro Chromosome Aberration Test of Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts was carried out using cultured Chinese hamster lung cells in the presence and absence of metabolic activation system(S-9 mix). No significant changes in the number of aberrant metaphases having structural and number of aberrations were detected in Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts treated groups. 2. Bacterial Reveres Mutation Assay: Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts was evaluated for its potential to induce reverse mutation in the histidine auxotroph strains of Salmonella typhimurium such as TA100, TA1535, TA98 and TAl537 and the tryptophan auxotroph strain of Escherichia coli WP2 uvrA. No significant changes in the number of revertant colonies compared to its negative control were detected in Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts treated groups against all 5 strains. 3. Micronucleus test: Micronucleus test of Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts were performed using specific pathogen free 7-week old male ICR mouse. No significant changes in the number of micronucleated polychromatic erythrocytes among 2000 polychromatic erythrocytes compared to negative control were detected in all Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts treated groups. In summarized above-mentioned results, it is concluded that Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts have not genotoxicity against In Vitro Chromosome Aberration Test, Bacterial Reverse Mutation Assay and Micronucleus test.
In this research, the genotoxic effect of Picrorrhiza Rhizoma (PR) aqueous extract was evaluated using the mouse micronucleus test. PR extract was administered once a day for 2 continuous days by oral gavage to male ICR mice at doses of 2000, 1000 and 500 mg/kg. Cyclophosphamide was used as a known genotoxic agent in a positive control. The appearance of a micronucleus (MN) in polychromatic erythrocyte (PCE) is used as an index for genotoxic potential, and PCE ratio is used as an index of cytotoxicity. Although significant (p < 0.01) increase of the number of PCE with one or more nuclei (MNPCE) was detected in cyclophosphamide treated groups, no significant increases of MNPCE numbers were observed in all three different dosages of PR extracts treated mice with over 0.39 of the individual polychromatic erythrocyte ratio in all mice used in this study. The results obtained indicated that PR extract shows no genotoxicity effects up to 2000 mg/kg dosing levels.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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