1998년 7월 섬진강 하구에서 채집한 참재첩, Corbicular leana를 대상으로 전자현미경적 연구를 수행하였다. 정원세포는 웅성생식세포 가운데서 가장 크고, 제1차 정모세와와 제2차 정모세포는 크기와 핵내 이형염색질의 응축정도로서 구분이 가능하였다. 정세포에서 정자로의 변태과정에서 핵내의 물질은 섬유상 다발을 형성한 이후 변태완료 후에는 섬유상 다발은 사라졌다. 성숙정자는 채찍모양으로 전형적인 primitive type이었으며, 첨체부는 $3\;{\mu}m$, 핵질부는 $9\;{\mu}m$ 전후 였다. 핵질부 후반부는 중심체쪽으로 융기되어 있고, 중편에는 2개의 중심체와 4개의 신장된 미토콘드리아를 가지고 있었다. 꼬리는 전형적인 9+2구조를 가졌다.
Early growth response (Egr)-1 is a $Cys_2-His_2-type$ zincfinger transcription factor. It has been shown to induce survival and proliferation of immature and mature B cells, respectively, but its role in the differentiation of B cells into plasma cells remains unclear. To examine the effects of Egr-1 deficiency on the activation of B cells, naive B cells from $Egr1^{-/-}$mice and their wild-type (WT) littermates were activated to proliferate and differentiate, and then assayed by FACS. Proportions of cells undergoing proliferation and apoptosis did not differ between $Egr1^{-/-}$ and WT mice. However, $Egr1^{-/-}$ B cells gave rise to fewer plasma cells than WT B cells. Consistently, $Egr1^{-/-}$ mice produced significantly lower titer of antigen-specific IgG than their WT littermates upon immunization. Our results demonstrate that Egr-1 participates in the differentiation program of B cells into plasma cells, while it is dispensable for the proliferation and survival of mature B cells.
경제성분석 기능을 가진 생물공정 flowsheeting 소프트웨어인 BioPro Designer를 이용하여 외부단 백질 생산 시스템의 최적 공정설계가 수행되었다. BioPro Designer를 이용하여 Salmonella phage P P22의 tailspike protein의 생산시스템에 적용되었 는데 최적공정을 선택하는 과정에서 투입되는 시간 과 노력에 획기척인 개선이 있었다. 숙주의 내부에 서 생산되는 외부 단백질의 folding 특성이 가장좋 은 생산시스템을 선택하는데 영향을 미 친다는 것을 보여주기위하여 wild type의 tailspike와 두개의 다른 변종 tailspike들, 즉 tsf G244→R과 Su A334 -V을 비교 검토되었다. 회수된 tailspike 단백질의 단위질량 대비 자본투자비를 비교 척도로 하여 최척 의 tailspike 생산 시스템이 선택되었다.
신호배열 돌연변이인 rbsB 103는 전구체 리보스 결합단백질을 세포질내에 축적시키고, rbsB 106 복귀유전자는 이 전구체를 숙성 가능하게 하여 페리플라슴으로 수송되게 한다.(Iida el at., 1985, Park, el at., 1988). 본고에서는 rbsB 유전자의 세 allele, rbsB, rbsB 103와 rbsB 106를 이들이 코딩하는 단백질을 대량생산 하그l자 람다 P 프로모터 조절하에 클론하고 나아가서 다섯종의 단백질을 순수정제하였다.. 전구체 단백질의 pI는 8.0, 숙성단백질의 $P_{L}$는 7.5임을 밝혔다. 순수정제된 단백질의 아마노 말단의 아미노산 배열을 결정하여 DNA 염기서열로부터 밝혀진 아미노산 변화를 확인하였다.
Salsoloid Kranz구조를 지닌 다육질성의 Salsola komaravii의 두 단계 잎의 광합성 엽육조직에 대하여 LM 및 TEM에 의한 구조적 분화발달 양상을 연구하였다. 수분저장조직을 둘러싸는 내부 유관속세포층 및 외부 엽육세포층으로 구성된 두 층의 광합성조직은 어린 잎에서는 연결되어 발달하나 성숙한 잎에서는 불연속적으로 발달하였다. 중앙의 유관속 외 다수의 미세맥들은 대개 내부 유관속세포층과 접하여 형성되며 발달초기에는 이 두 세포층의 구조적 차이는 뚜렷하지 많았다. 이들 엽육조직이 신장 발달하면 franz구조 내 내부 유관속 세포층과 외부 엽육세포층은 세포형태, 세포소기관의 분포, 엽록체의 내부 특성, 세포벽의 비후, 원형질연락사의 발달양상 등에서 현저한 차이를 보이며 구조적으로 분화하였다. 특히 이들이 지닌 엽록체의 미세구조 및 원형질 연락사 등의 특성은 생화학적으로 알려진 NADP-ME 유형과 거의 일치하였다. 이들은 세포특이성을 나타내는 C-4 광합성 효소의 발현양상을 조사하는 세포 면역화학법과 접목되어 연구될 것이다.
The RNA genome of poliovirus encodes a long polyprotein precursor and this polyprotein is cleaved proteolytically by viral protease to yield mature proteins. The mature proteins derived from the P1 polyprotein precursor are the component of capsids. To further delineate the process of capsid assembly and encapsidation, in a first attempt, a cell line which expresses the authentic P1 polyprotein was established. CV-1 cells were transfected with the pRCRSVS1P1 plasmid DNA which contains 5'ncr sequences, whole authentic capsid gene of poliovirus and neomycin resistance gene. These cells were treated with G418 for 3 months, and eventually G418 resistant cells were selected and formed colonies. Each colony was picked and grown in the media containing G418. DNA analysis indicated that 1 of 13 neomycin resistant cell lines (R2-18) contains whole poliovirus P1 capsid gene segment which was incorporated into the genome. Immuneprecipitation of cell lysates with sera from rabbit immunized with inactivateded Sabin type 1 particles demonstrated the constitutive expression of the poliovirus P1 capsid protein from R2-18.
티모시의 colt 품종을 이용하여 최적 조직배양조건을 확립하기 위하여 성숙종자를 배양함에 있어 첨가되어지는 식물 생장조절 물질의종류와 농도가 배발생 캘러스 유도 및 식물체재분화에 미치는 영향을 조사하였다. 배발생 캘러스 유도시 첨가되는 2,4-D는 3 mg/L 첨가 구에서 78%로 캘러스 유도율이 가장 높았으며, 3 mg/L 2,4-D와 0.1 mg/L의 BA를 첨가하여 배양했을 때 형성된 캘러스는 조직적으로 치밀하며 유백색의 배발생 캘러스가 가장 많이 형성되었다. Type B 캘러스만을 이용하여 식물체재분화에는 1 mg/L 2,4-D와 3 mg/L BA가 첨가된 배지에 캘러스를 배양했을 때 25.3%의 재분화율을 나타내었다. 본 연구를 통하여 확립된 효율적인 재분화 시스템은 분자육종을 통한 신품종 티모시의 개발에 유용하게 이용될 수 있을 것이다.
Arteriovenous malformations (AVMs) are direct communications between primitive reticular networks of dysplastic vessels that have failed to mature into capillary vessels. Based on angiographic findings, peripheral AVMs can be classified into six types: type I, type IIa, type IIb, type IIc, type IIIa, and type IIIb. Treatment strategies vary with the types. Type I is treated by embolizing the fistula between the artery and the vein with coils. Type II (IIa, IIb, and IIc) AVM is treated as follows: first, reduce the blood flow velocity in the venous segment of the AVM with coils; second, perform ethanol embolotherapy of the residual shunts. Type IIIa is treated by transarterial catheterization of the feeding arteries and injection of diluted ethanol. Type IIIb is treated by transarterial or direct puncture approaches. A high concentration of ethanol is injected through the transarterial catheter or direct puncture needle. When the fistula is large, coil insertion is required to reduce the amount of ethanol. Type I and type II AVMs showed the best clinical results; type IIIb showed a satisfactory response rate. However, type IIIa showed the poorest response rate, either alone or in combination with other types. Clinical success can be achieved by using different treatment strategies for different angiographic AVM types.
들잔디 (Zoysia japonica Steud.)의 성숙종자 유래의 캘러스를 사용하여 캘러스 생장 및 재분화에 적합한 몇 가지 조건과 캘러스 유형에 따른 재분화 효율을 검토하였다. 종자로부터 캘러스 유도는 2 mg/L 2,4-D, 0.2 mg/L BAP, 4 mg/L thiamine-HCl, 100 mg/L $\alpha$-ketoglutaric acid를 포함한 MS 배지에서 가장 좋았다. 캘러스 증식은 0.5 mg/L 2,4-D, 0.05mg/L BAP, 4 mg/L thiamine-HCl, 100 mg/L $\alpha$-ketoglutaric acid를 포함한 MS 배지가 가장 좋았다. 식물체의 재분화는 3% maltose, 1 mg/L BAP 또는 1 mg/L TDZ를 포함한 MS배지에서 좋았다. 캘러스의 Type과 빈도는 2,4-D와 BAP 조합과 농도에 따라 크게 영향을 받았고, 형태적으로 4가지 Type이 뚜렷하게 나타났다. Type I, II, III 캘러스는 계대배양으로 신초가 형성된 반면, 물기가 많은 캘러스인 Type IV에서는 뿌리만이 분화되었다. 이 중 Type I 캘러스는 신초의 재분화율이 82%로 가장 높고 albino체의 출현빈도가 4%로 가장 낮았다. 이와같이 캘러스를 유형별로 구분하여 배양함으로써 잔디 캘러스로부터 식물체의 재분화를 높일 수 있었다.
Kim, Yun-Kyeong;Choi, In-Geol;Nam, Won-Woo;Yu, Yeon-Gyu
BMB Reports
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제33권6호
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pp.493-498
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2000
Aquifex pyrophilus, a hyperthermophilic bacterium, has a serine-type protease that is located at the cell wall fraction with a mature size of 43 kDa. Molecular cloning of the protease gene revealed that it has an ORF of 619 amino acids with homologous catalytic site of serine-type proteases [Choi, I.-G., Bang, W.-K., Kim, S.-H., Yu, G. Y., J. Biol. Chem. (1999), Vol. 274, pp. 881-888]. Constructs containing different regions of the protease gene, including a alanine-substituted mutant at the active site serine, were constructed, and the factors affecting the expression level of the cloned protease gene in E. coli were examined. The presence of the C-terminus hydrophobic region of the protease hindered over-expression in E. coli. Also, the proteolytic activity of the expressed protein appeared to toxic to E. coli. An inactive form that deleted both of the N-terminal signal sequence and the C-terminal polar residues was over-expressed in a soluble form, purified to homogeneity, and its thermostability examined. The purified protein showed three disulfide bonds and three free sulfhydryl group. The thermal denaturation temperature of the protein was measured around $90^{\circ}C$ using a differential scanning calorimeter and circular dichroism spectrometry. The disulfide bonds were hardly reduced in the presence of reducing agents, suggesting that these disulfide bonds were located inside of the protein surface.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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