Objectives : The purpose of this study is to observe the inhibitory effects of $Chrthami$ semen oil pharmacopuncture(CSOP) on CIA (collagen-induced arthritis) mice. Materials and Methods : Two types of experiments were conducted: $in$$vitro$ assay, inhibition of MIF mRNA and TNF-${\alpha}$ mRNA expressions in synovial membranes was observed, and $in$$vivo$ assay, $1{\mu}{\ell}/kg$ CSOP was injected every day to the left $Weizhong$ ($BL_{40}$) from day 3 to 21 after induction of CIA, and changes in paw edema, apical surface morphology, neovascularization in synovial membranes, fibrosis, pro-inflammatory cytokines production, Th-1 differentiation, and anti-inflammatory effect were investigated. Results : 1. In synoviocytes of the CIA mice treated with CSOP, MIF mRNA and TNF-${\alpha}$ mRNA expressions were down-regulated in a dose-dependent manner. 2. Paw edema of the CIA mice treated with CSOP was diminished. 3. Tissue injury in the synovial membranes, capillary distribution and fibrosis were reduced in CSOP-treated mice. 4. MIF, TNF-${\alpha}$, IL-6, MMP-9 expressions were repressed in CSOP-treated mice during the experiment to observe the inhibitory effect on cytokines production in early stage RA. 5. IL-12 and CD28 were reduced in CSOP-treated mice during the observation of inhibitory effect on Th 1 differentiation. 6. PPAR-${\gamma}$ was increased during the experiment to observe the anti-inflammatory effect of CSOP. Conclusions : The results may suggest that administration treatment using $Chrthami$ semen oil pharmacopuncture decreases the inflammatory response on an Animal Model with CIA.
Purpose: This study was conducted to evaluate the effect of beta-tricalcium phosphate (Cerasorb$^{(R)}$, Germany) and deproteinized bovine bone (Bio-Oss$^{(R)}$, Switzerland) grafted to the defect of rat calvaria artificially created and the effect of use of absorbable membrane (BioMesh$^{(R)}$, Korea) on new bone formation. Materials and Methods: Transosseous circular calvarial defects with diameters of 5 mm were prepared in the both parietal bone of 30 rats. In the control group I, no specific treatment was done on the defects. In the control group II, the defects were covered with absorbable membrane. In the experimental group I, deproteinized bovine bone was grafted without absorbable membrane; in the experimental group II, deproteinized bovine bone was grafted with absorbable membrane; in the experimental group III, beta-tricalcium phosphate was grafted without absorbable membrane; in the experimental group IV, beta-tricalcium phosphate was grafted with absorbable membrane. The animals were sacrificed after 3 weeks and 6 weeks respectively, and histologic and histomorphometric evaluations were performed. Results: Compare to the control groups, the experimental groups showed more newly formed bone. Between the experimental groups, beta-tricalcium phosphate showed more resorption than deproteinized bovine bone. Stabilization of grafted material and interception of the soft tissue invasion was observed in the specimen treated with membrane. There was no statistical difference between the experimental group I, III and experimental group II, IV classified by graft material, but statistically significant increase in the amount of newly formed bone was observed in the experimental group I, II and II, IV classified by the use of membrane (P<0.05). Conclusion: Both beta-tricalcium phosphate and deproteinized bovine bone showed similar osteoconductibility, but beta-tricalcium phosphate is thought to be closer to ideal synthetic graft material because it showed higher resorption rate in vivo. Increased new bone formation can be expected in bone graft with use of membrane.
Our previous proteomic study demonstrated that oxidative stress and antioxidant delphinidin regulated the cellular level of $p27^{kip1}$ (referred to as p27) as well as some heat shock proteins in human colon cancer HT 29 cells. Current study was conducted to validate and confirm the regulation of these proteins using both in vitro and in vivo systems. The level of p27 was decreased by hydrogen peroxide in a dose-dependent manner in human colon carcinoma HCT 116 (p53-positive) cells while it was increased upon exposure to hydrogen peroxide in HT 29 (p53-negative) cells. However, high concentration of hydrogen peroxide (100 ${\mu}M)$ downregulated p27 in both cell lines, but delphindin, one of antioxidative anthocyanins, enhanced the level of p27 suppressed by 100 ${\mu}M$ hydrogen peroxide. ICR mice were injected with varying concentrations of hydrogen peroxide, delphinidin and both. Western blot analysis for the mouse large intestinal tissue showed that the expression of p27 was upregulated by 25 mg/kg BW hydrogen peroxide. To investigate the association of p27 regulation with hypoxia-inducible factor 1-beta (HIF-$1{\beta}$), the level of p27 was analyzed in wild-type mouse hepatoma hepa1c1c7 and Aryl Hydrocarbon Nuclear Translocator (arnt, HIF-$1{\beta}$)-defective mutant BPRc1 cells in the absence and presence of hydrogen peroxide and delphinidin. While the level of p27 was responsive to hydrogen peroxide and delphinidin, it remained unchanged in BPRc1, suggesting that the regulation of p27 requires functional HIF-$1{\beta}$. We also found that hydrogen peroxide and delphinidin affected PI3K/Akt/mTOR signaling pathway which is one of upstream regulators of HIFs. In conclusion, hydrogen peroxide and antioxidant delphinidin seem to regulate intracellular level of p27 through regulating HIF-1 level which is, in turn, governed by its upstream regulators comprising of PI3K/Akt/mTOR signaling pathway. The results should also encourage further study for the potential of p27 as a biomarker for intracellular oxidative or antioxidant status.
Gamijiyu-tang (GJT) described originally in the Dong Eui Bo Gam, a traditional reference for oriental medicine in the Korea, has been clinically used for treatment of chronic liver disease. In order to evaluate scientifcally a hepatoprotective effect of GJT in the liver fibrotic disease, the present study investigated how GJT improves a hepatic function in the dimethylnitrosamine (DMN)-treated rat. DMN treatment caused a significant increase of relative liver weight to the body at 28 days after DMN induction. Administration of with a clinical dose decreased significantly the sAST level $(158.8{\pm}7.76\;IU/L)$ elevated by DMN in jection (p<0.01). A similar phenomenon was also observed at change of both Salt and Salt level in the GJT and/or DMN-treated animal (p<0.01, p<0.05, respectively). A remarkable increase of hydroxyproline was observed by treatment of DMN with comparing to the normal rat $(361.9{\pm}7.35\;vs.\;1278.1{\pm}52.9\;{\mu}g/g\;tissue,\;p<0.01)$. This was significantly reduced by a simultaneous treatment of GJT with DMN for 21 days (p<0.05), but not recovered completely to its normal value. In addition. GJT administration ameliorated conspicuously the DMN-induces histopathological changes of liver such as hemorrhage. Cell necrosis and fibrosis. Tak'en together, results described here demonstrated scientifically in first the medicinal efficacy of GJT by using in vivo animal model, indicating that GJT improves the DMN-induced hepatic injury through reducing an excessive accumulation of collagen and histopathological changes. The decreased collagen content may be a pivotal process for GJT to improve hepatic function in the DMN-induced liver fibrosis. The present study suggests that GJT may be useful for and applicable to the treatment of hepatic fibrosis in chronic liver disease.
목적: 인체대장암 HCT15/CL02 암세포와 인체 비소세포 폐암 A549세포를 대상으로 Pgp와 MRP발현을 조사하고, 세포와 이종이식된 종양조직에서 $^{99m}Tc$-MIBI와 tetrofosmin의 섭취정도를 비교하여 이들 방사성의약품의 Pgp와 MRP 추적자로서의 성능을 알아보고자 하였다. 또한 다약제내성 극복제인 CsA 처리에 의한 두 방사성 의약품의 암세포 내섭취정도를 비교해 보았다. 재료 및 방법: Pgp의 발현은 RT-PCR과 면역조직화학 염색으로, MRP발현은 MRPrl항체에 대한 western blot analysis와 면역조직화학 염색으로 확인하였다. 세포 섭취는 $37^{\circ}C$에서 $1{\times}10^6$개/ml 농도에서 MIBI와 tetrofosmin을 30분과 60분 동안 반응시킨 후 상층액과 침전물로 분리하여 각각의 방사능을 감마계수기로 측정하여, 50 ${\mu}M$의 cyclosporin A (CsA)를 처리한 성적과 비교하였다. 체내실험은 HCT15/CL02세포와 A549세포를 이종이식 한 누드마우스를 4군으로 구분하여, MIBI와 tetrofosmin 만을 주사한 군과, CsA를 70 mg/kg으로 1시간전에 주사한 후 체내분포를 측정한 군으로 구분하였다. MIBI와 tetrofosmin은 각각 370 KBq을 정맥주사하고 10분, 60분, 240분 후에 동물들을 희생시켜 종양조직내의 두 방사성의약품의 장기섭취율(%ID/gm)로 계산하여 비교하였다. 결과: HCT15/CL02세포와 A549세포에서 MIBI와 tetrofosmin의 섭취는 배양시간이 지남에 따라 증가하였으며 그 섭취정도는 MIBI가 tetrofosmin보다 높았다. CsA 50 ${\mu}M$에 의한 MIBI와 tetrofosmin의 섭취정도를 각각의 60분 대조군과 비교하면 각각 763%와 629% 증가하여 MIBI의 섭취증가 정도가 tetrofosmin보다 높았다. 체내에서 두 방사성의약품의 섭취정도는 유사하였다. CsA 처리군의 섭취정도는 각각의 대조군에 비교하여 MIBI는 10분에 114%, 60분에 257%, 240분에 396%로 증가하였으며, tetrofosmin은 10분에 110%, 60분에 205%, 240분에 410%로 증가하였다. HCT15/ CL02 세포실험에서도 두 방사성약품의 섭취정도에 유의한 차이가 없었으나, CsA를 처리하였을 때 MIBI와 tetrofosmin의 섭취율은 기저치보다 모두 증가하였다. CsA에 의한 MIBI와 tetrofosmin의 섭취율은 기저치보다 각각 10배와 2.4배 증가하여, MIBI의 섭취율이 tetrofosmin보다 1.2배에서 4배정도 높았다. HCT15/CL02 종양조직내의 섭취는 CsA 처치시 증가하였으나 MIBI와 tetrofosmin 간에 유의한 차이는 없었다. 결론: Pgp와 MRP를 발현하여 다약제내성을 나타내는 암세포에서 MIBI와 tetrofosmin 섭취율은 유사하였으나, Pgp와 MRP를 억제하는 CsA에 의한 섭취증가정도는 MIBI가 더 높았다. 그러나 두 약제 섭취율 증가의 차이는 동물실험에서는 관찰되지 않았다. 이러한 결과로 보아 MIBI와 tetrofosmin은 Pgp와 MRP에 의한 다약제내성의 발현을 평가할 수 있는 방사성의약품으로 판단되며, 다약제내성 극복제의 시험관내 효능평가에는 MIBI가 tetrofosmin보다 더 우수할 것으로 사료되었다.
1979년 경북지방에서 발생한 병잠으로부터 분리된 새로운 미포자충 K79의 형태, 성장, 발육경과 및 분류학적 위치를 구명하기 위하여 포자의 병원성, 광학현미경에 의한 감염조직의 소견, 전자현미경적 소견을 조사한 결과는 다음과 같다. K79포자의 병원성은 N. bombycis 보다 약하였고 누에에 대한 K79의 감염부위는 중양피막세포, 혈구, 기관피막, 지방조직, 견사선이었다. K79의 발육과정은 sporoplasm, schizont, sporont, sporoblast, spore의 단계로서 N. bombycis와 유사하였으나 발육속도는 늦었다. 미포자충 포자의 전자현미경적인 미세구조는 포자외각의 돌출부와 돌출부사이가 44.28mm였다. 또한 anchoring disk는 우산형이었고 polaroplast, lamellae는 manubroid 상단부에 부착되어 있었다. 극사의 coil 전회수는 K79 16회이고 coil 각도는 75$^{\circ}$였고, 핵은 두 개의 연핵으로 되어 있어 분류학적으로 보면 Nosema 속에 속하는 신종의 미포자충이라고 사료되며 그 표기는 Nosema sp. K79로 기록함이 타당하다고 본다.
Purpose: This study aimed to evaluate the effects of fibronectin and oxysterol immobilized on machined-surface dental implants for the enhancement of cell attachment and osteogenic differentiation, on peri-implant bone healing in the early healing phase using an experimental model in dogs. Methods: Five types of dental implants were installed at a healed alveolar ridge in five dogs: a machined-surface implant (MI), apatite-coated MI (AMI), fibronectin-loaded AMI (FAMI), oxysterol-loaded AMI (OAMI), and sand-blasted, large-grit, acid-etched surface implant (SLAI). A randomly selected unilateral ridge was observed for 2 weeks, and the contralateral ridge for a 4-week period. Histologic and histometric analyses were performed for the bone-to-implant contact proportion (BIC) and bone density around the dental implant surface. Results: Different bone healing patterns were observed according to the type of implant surface 2 weeks after installation; newly formed bone continuously lined the entire surfaces in specimens of the FAMI and SLAI groups, whereas bony trabecula from adjacent bone tissue appeared with minimal new bone lining onto the surface in the MI, AMI, and OAMI groups. Histometric results revealed a significant reduction in the BIC in MI, AMI, and OAMI compared to SLAI, but FAMI demonstrated a comparable BIC with SLAI. Although both the BIC and bone density increased from a 2- to 4-week healing period, bone density showed no significant difference among any of the experimental and control groups. Conclusions: A fibronectin-coated implant surface designed for cell adhesion could increase contact osteogenesis in the early bone healing phase, but an oxysterol-coated implant surface designed for osteoinductivity could not modify early bone healing around implants in normal bone physiology.
Objectives: The purpose of this study was to investigate the effects of Hyolbuchukeo-tang extracts on the hyperlipidemia rats induced by high fat diet. Methods and Materials: In vitro; The extracts prepared for Hyolbuchukeo-tang by hot water extraction (HH), fermentation(HF) and UMPM extraction(HU) method. The extracts were examined for levels of polyphenol compounds, antioxidant activities, and inhibitory potencies for HMG-CoA reductase. In vivo; Sprague-Dawley male rats of weighing $150{\pm}5g$ were randomly divided into six groups ; normal control diet(NC), and high fat diet(HC), high fat diet with treated lovastatin of 10mg/kg(PC), high fat diet with Hyolbuchukeo-tang extracts; HH, HF and HU treated extracts of 300mg/kg, respectively. Also, we compared the effects of the extracts of HH, HF and HU on rats fed high fat diet for four weeks. Results: 1. The content of polyphenol compounds and electron donating abilities(EDAs) was the HF higher than HH and HU. The superoxide dismutase(SOD)-like activities were proportionate in consistency and they appeared highly from all extracts. The HMG-CoA reductase inhibition activities was highest activities in the HU. 2. The activities of serum GOT and GPT were significantly lower in the HH and HF groups. The level of serum triglyceride was significantly decreased in the HF group. HH and HU groups were significantly decreased in the atherogenic index(AI). The total cholesterol concentration in liver was significantly decreased in the HF group, and HU showed more significantly decreased in the triglyceride than of the lovastatin. Also, photomicrographs of liver tissue showed higher fat accumulation in the HC group than in the HH, HF and HU groups. Conclusions: These result suggest that the hyper-lipidemia caused by a high fat diet was effectively inhibited the administration of HF and HU.
Background: We sought to evaluate the role of tumor associated macrophages (TAMs) on the promotion of coal tar pitch extract (CTPE)-induced tumorigenesis of human bronchial epithelial cells (BEAS-2B) and tumor metastasis in nude mice, and related mechanisms. Materials and Methods: BEAS-2B cells were first treated with 2.4 mg/mL CTPE for 72 hours. After removal of CTPE, the cells were continuously cultured and passaged using trypsin-EDTA. THP-1 cells were used as macrophage-like cells. BEAS-2B cells under different conditions (n=6/group) were injected into the back necks of nude mice, and alterations of tumor xenograft growth, indicative of tumorigenicity, and tumor metastasis were determined. Pathological changes (tumor nests and microvascular lesions) of HE-stained tumor tissues were also evaluated. The expression of AP-1(c-Jun) in xenografts and metastatic tumors was determined using immunohistochemistry. Results: Tumor size and weight in nude mice transplanted with the mixture of CTPE-induced passage 30 BEAS-2B and THP-1 cells (2:1) were increased compared to those from the CTPE-treated BEAS-2B cells at passage 30 alone at different observation time points. Tumor metastasis to lymph nodes and liver was only detected after transplantation of a mixture the two kinds of cells. The numbers of tumor nests and microvascular lesions, and the expression levels of AP-1 (c-Jun) in tumors from the mixture of two kinds of cells were increased apparently in contrast to those in tumor from the CTPE-treated BEAS-2B cells of passage 30 alone. In addition, there was positive correlation between AP-1 (c-Jun) expression level and the number of microvascular lesions, or between AP-1 (c-Jun) expression level and tumor metastasis in these two groups. Conclusions: TAMs not only facilitate tumorigenesis transformation of CTPE-induced BEAS-2B cells, but also promote tumor growth, angiogenesis and metastasis in nude mice in vivo, which may be mediated by AP-1.
Background and Aims: Dansamtongmek-tang (DSTMT) and Dansamsengmek-san (DSSMS) have been used for many years as therapeutic agents for the acute stage of cerebrovascular disease, hypertension and hyperlipidemia in Oriental medicine, but the effects of DSTMT and DSSMS on hyperlipidemia and safety for cell damage are not yet well-known. This study was done to investigate the effects of DSTMT and DSSMS on hyperlipidemia. Methods: In vivo test: after administering DSTMT and DSSMS to SHR and ICR occurred hyperlipidemia for 3 weeks, we analyzed body weight, cholesterol levels. TG, HDL-chol, LDL-chol, LDH in plasma, brain, liver and kidney tissue, and DNA by RT-PCR. In vitro test: after administering DSTMT and DSSMS to human hepatocellular carcinoma in hypoxia, we observed cell cohesion by light microscope, analyzed the inflow of Ca2+ by confocal laser scanning microscope and DNA by RT-PCR. Results: DSTMT significantly decreased the levels of triglyceride and increased the levels of HDL-cholesterol in SHR, and significantly decreased the levels of LDL-cholesterol and body weight and increased the levels of HDL-cholesterol in ICR. DSSMS significantly decreased body weight, total cholesterol levels, LDL-cholesterol, LDH and cardiac risk factor (CRE) in SHR and significantly decreased the levels of total cholesterol, triglyceride, LDL-cholesterol, LDH and CRF in ICR. DSTMT had an effect on protecting cells from damage by inhibiting production of p53 mRNA, and in DSSMS, by inhibiting production of p53 mRNA and p21 mRNA after hypoxia. DSTMT effectively blocked off Ca2+ at low density, but DSSMS effectively blocked off Ca2+ at high density. Both DSTMT and DSSMS had an effect on inhibiting lipid metabolism by blocking off production of apo B mRNA. Conclusions: These results suggest that DSTMT and DSSMS might be usefully applied for treatment of hyperlipidemia and suppression of brain damage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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