This study was designed to investigate the effects of silk fibroin powder on oxygen radicals and their scavenger enzymes in serum of rats. Sprague-Dawley(SD) male rats (160${\pm}$10 g) were fed experimental diets (SFP-2.5 and SFP-5.0 groups)added 2.5 and 5.0 g/kg BW/day for 6 weeks. Triglyceride levels were remarkably inhibited (15∼25%) in SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. Hydroxyl radical ($.$OH) formations resulted in a marked decrease (15%∼25%) compared with control group, while superoxide radical and hydrogen peroxide formations resulted in a significant decrease (6∼12% and 10%). Lipid peroxide and oxidized protein (>C=O group) productions resulted in a significant decrease (6∼12% and 6%) compared with control group. Superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities were remarkably increased (35∼55% and 40∼50%), but glutathione peroxidase (GSHPX) activities were significantly increased (13%) compared with control group. These results suggest that anti-aging effect of silk fibroin powder (SFP) may play a pivotal role in attenuating a various age-related changes.
This study was designed to investigate the effect of silk fibroin (Mw 500)power (SFP) on oxygen radicals and their scavenger enzymes in liver membranes of rats. Sprague-Dawley (SD) male rats (160$\pm$10 g) were fed basic diet (control group), and experimental diets (SFP-2.5 and SFP-5.0 groups) added 2.5 and 5.0 g/kg BW/day for 6 weeks. Hydroxyl radical (.OH) levels resulted in a considerable decreases (5.8% and 8.4%, 3.7% and 11.1%, respectively) in liver motochondria and micorsomes of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group, and $O_2$radical level was remarkably decreased about 15% and 20% in liver cytosol of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. Lipid peroxide (LPO) levels were significantly decreased (8.3% and 18.0%, 13.4% and 18.4%, respectively) in liver mitochondria and microsomes of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. Oxidized protein (OP) levels were remarkably decreased about 11.6% in liver mitochondria of SFP-5.0 group compared with control group. Mn-SOD activities were remarkably in creased (17.6% and 28.8%, respectively) in mitochondria of SFP-2.5 and SFP-5.0 groups, and Cu/Zn-SOD activities were also effectively in creased (about 14.4%) in liver cytosol of SFP-5.0 groups, but significant difference between GSHPx activity in liver cytosol of these two groups could be not obtained. These results suggest that anti-aging effect of silk fibroin may play an effective anti-aging role in a aattenuating a oxidative stress and increasing a scavenger enzyme activity in liver membranes.
This study was designed to investigate the effects of silkworm (Bombyx mori L.) powder (SWP) on oxygen radicals and their scavenger enzymes in liver membranes of rats. Sprague-Dawley(SD) male rats(160$\pm$10g) were fed basic diet (control group), and experimental diets(SWP-200 and SWP-400 groups) added 200 and 400 mg/kg BW/day for 6 weeks. Hydroxyl radical (.OH) levels resulted in a consistent decreases (4.0% and 7.2%, 5.0% and 14.1%, respectively) in liver mitochondria and microsomes of SWP-200 SWP-400 groups compared with control group, and O2 radical level was significantly decreased about 12% in liver cytosol of SWP-400 group compared with control group. Lipid peroxide(LPO) levels were significantly decreased (14.4% and 9.1%, respectively) in liver mitochondria and microsomes of SWP-400 group only compared with control group. Oxidized protein (OP) levels were remarkably decreased about 12.7% and 16.3% in liver microsomes only of SWP-200 and SWP-400 groups, but significant difference between liver mitochondria could not obtained. Mn-SOD activities were remarkably increased (15.8% and 25.2%, respectively) in mitochondria of SWP-200 and SWP-400 groups, but significant difference between Cu, Zn-SOD activities in these group could be not obtained. GSHPx activity was significantly increased in liver cytosol of SWP-400 group compared with control group. These results suggest that silkworm powder may play an effective role in a attenuating a oxidative stress and increasing a scavenger enzyme activity in liver membranes.
생체는 산소를 소비하는 대사 과정 중에 초산화물(superoxide, $O_{2}$), 과산화수소($H_2O_2$), 수산 라디칼(OH)과 같은 다양한 활성산소(reactive oxygen)들을 생성하게 되며, 그 중에서도 hydrogen peroxide ($H_2O_2$)는 biological membrane을 자유롭게 통과하며, 세포내에서 hydroxyl radical 등의 반응성이 큰 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)을 발생시키는 작용을 하는 강력한 산화제이다. 세포를 계대 배양 (5, 15, 25, 35 passage)하여 $H_2O_2$를 농도별(100 ${\mu}M$, 500 ${\mu}M$, 1 mM, 5 mM)로 처리하고, 또한 $H_2O_2$의 처리 시간(30 분, 1 시간)을 변화시킴으로써, Hepatoma 세포주에서 $H_2O_2$ 처리에 의한 Cu/Zn SOD의 발현을 Northern blot을 통하여 다음과 같이 분석하였다. 1)Hepatoma 세포주에서 시간별, 농도별로 산화제를 처리 했을 때 각각의 경우에서 발현양의 차이는 적었지만, 오랜 시간동안 고농도의 산화제에 노출시켰을 때 항산화 능력이 증가한다는 것을 확인할 수 있었다. 2)계대배양을 증가시키는 것은 노화가 진행된다는 것을 의미하므로, 산화제를 처리했을 때 25 passage에서 35 passage 단계에서 항산화 효소의 발현 정도가 급격히 감소되는 것으로 미루어 보아 이 단계에서 노화가 진행되었음을 추측할 수 있었다. 3)동일한 시간과 농도로 처리했을 때 각각의 passage의 발현 level에서 보이는 양상과는 다르게 35 passage에서는 500${\mu}M$이상의 농도를 1 시간동안 노출시켰을 경우에 Cu/Zn SOD가 거의 발현되지 않았으며, 30 분 동안 노출시켰을 때에는 500 ${\mu}M$의 농도까지 방어할 수 있는 능력을 가진 것으로 보인다.
The variation in the enzyme activities of human liver usually represents the particular physiological conditions of each individuals. Thus, we investigated the variation in the activities of SOD, HR and LPO of (1) non-exposed workers (56 subjects), and (2) exposed workers to DMF (43 subjects) in synthetic leather process. Serum levels of enzyme activities of exposed workers (AST:$30.26{\pm}20.041$U/L, ALT:$32.72{\pm}23.393$U/L, GGT:$28.47{\pm}18.635$ U/L, ALP:$81.77{\pm}34.879$ U/L)were slightly higher than those in nonexposed workers (AST:$24.00{\pm}9.441$ U/L, ALT:$23.89{\pm}18.305$U/L, GGT:$21.95{\pm}17.970$U/L, ALP:$70.84{\pm}24.678$U/L), but only the level of ALT was statistically significant (p< 0.05). Serum levels of LDH, TRF and CHOL in non-exposed workers were slightly higher than those of exposed workers. However, they were not statistically significant (p > 0.05). Serum levels of HR and LPO of the exposed workers appeared to be reduced, but not those of the non-exposed workers. The SOD activities of exposed workers were also slightly higher than those of non-exposed workers, but the results were not statistically significant (p > 0.05). The level of HR was increased with age, but the SOD level was not. These results suggest that the intermittent exposure to DMF at time-weighted average (TWA) level (10 ppm/$m^3$) has affected on the activities of enzymes such as AST, ALT, TRF, but not on the generation of HR, activity of SOD. However, if high dose of DMF was used, there would be severe effects for the generation of HR and LPO.
The ethanol extract of Rhus verniciflua Stokes (RVS), the Korean Lacquer tree, was subsequentely isolated and fractioned into two portions using distilled water (SED) and 99% ethanol (SEE) as elution buffers through silica gel column (4x28 em, 22 $\AA$. 28~200 mesh). To know the antioxidative effect of the RVS extracts, primary hepatocytes were exposed to hydroxyl radical generated by 20 mU/$m\ell$ glucose oxidase with SED or SEE for 4 hr. The addition of 100$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ SED in culture medium showed good protection from glucose oxidase (GO)-mediated cytotoxicity of hepatocytes, showing approximately equivalent to control. When the hepatocytes were incubated with 100 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ SED or SEE only for 4 hr. the activities of cell-associated superoxide dismutase (SOD) and catalase were elevated up to 1.22 fold and 1.4 fold, respectively, compared to control. Further increase, 1.88fold in SOD activity or 1.64fold in catalase activity, was also observed when the hepatocytes were incubated with 100 units/$m\ell$ of commercial SOD or catalase for 4 hr. Moreover. the glucose oxidase-mediated cytotoxicity in cultured hepatocytes was generally reduced upon addition of lysate obtained from SED or SEE-stimulated hepatocytes in a dose-dependent manner. From these results, we suggest that, in cultured hepatocytes, RVS ethanol extract can efficiently reduce cytotoxicity induced by glucose oxidase and may increase the activity of cell-associated SOD and/or catalase, thereby preventing and/or scavenging superoxides and hydroxyl radicals in this experiment.
This study was undertaken to investigate the effects of organic solvents on xenobiotic metabollzing enzyme system in vivo by meaas of experimental conditions i.e. (1) single group which was treated by benzene (B), toluene (T) and xylene (X), respectively, (2) combination group which was treated by mixture of benzene+toluene (BT), benzene+xylene (BX), and toluene+xylene (TX), respectively, (3) mixture group which was treated by benzene+ toluene+xylene mixture (M), and to interpreat the interaction between the organic solvents metabolizing enzymes. 1. The contents of cytochrome P-450 in liver microsomes were increased (p < 0.01) in organic solvents treated groups, and the contents of cytochrome P-450 were increased by following order of B < T < M < BT=BX < X < TX. 2. The activity of cytochrome P-450 dependent AHHase was significantly higher in organic solvents treated groups than in control group (p < 0.01), and the activity of AHHase was increased by following order of B < T < BT=BX=TX=xylene < M. 3. The activity of NADPH P-450 reductase was significantly higher in organic solvents treated groups than in control group (p < 0.01), and the order of M < combinated group < X < T
This study was designed to investigate the protective effect of fucoidan against AAPH-induced oxidative stress in LLC-PK1 cells (porcine kidney epithelial cells). Oxidative stress was induced by exposing of LLC-PK1 cells to the 1 mM 2,2'-azobis(2-amidino propane) dihydrochloride (AAPH) for 24 hr. Exposure of LLC-PK1 cells to 1 mM AAPH for 24 hr resulted in a significant (p<0.05) decrease in cell viability, but fucoidan treatment protected LLC-PK1 cells from AAPH-induced cell damage in a dose dependant manner. To investigate the protective action of fucoidan against AAPH-induced damage of LLC-PK1 cells, we measured the effects of fucoidan on lipid peroxidation and antioxidant enzymes activities of AAPH treated cells as well as scavenging activities on superoxide anion radical and hydroxyl radical. Fucoidan had protective effect against the AAPH-induced LLC-PK1 cellular damage and decreased lipid peroxidation and increased activities of antioxidant enzymes such as superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-px). Furthermore, fucoidan showed strong scavenging activity against superoxide anion radical. The $IC_{50}$ value of fucoidan was $48.37{\pm}1.54\;{\mu}g/mL$ for superoxide anion radical scavenging activity. The fucoidan also had high hydroxyl radical scavenging activity ($IC_{50}=32.03\;{\mu}g/mL$). These results indicate that fucoidan protects against AAPH-induced LLC-PK1 cell damage by inhibiting lipid peroxidation, increasing antioxidant enzyme activities and scavenging offree radicals.
This study was designed to investigate the effects of mulberry (Morus alba L.) leaf extract (MLE) on oxygen radicals and their scavenger enzymes in brain membranes of rats. Sprague-Dawley (SD) male rats (160$\pm$10 g) were fed basic diet (control group), and experimental diets (MLE-100 and MLE-300 groups) added 100 and 300 mg/kg BW/day for 6 weeks. Hydroxyl radical (.OH) lecels resulted in significant decreases (13.4% and 21.1%, 12.0% and 13.4%, respectively) in brain mitochondria and microsome of MLE-100 and MLE-300 groups compared with control group. Superoxide radical ($O_2$) levels were significantly decreased about 12% in brain cytosol of MLE-300 group compared with control group. Lipid peroxide (LPO) levels were effectively inhibited (18.1% and 12.3%, respectively) in brain mitochondria and microsomes of MLE-300 groups compared with control group. Oxidized protein (OP) levels were significantly decreased (14.2%, and 10.9%, respectively) in brain mitochondria and microsomes of MLE-300 groups compared with control group. Mn-SOD activities in brain mitochondria were significantly increased (13.5% and 18.6%, respectively) in MLE-100 and MLE-300 groups, and Cu/Zn-SOD activities in brain cytosol were also effectively increased (about 17.7%) in MLE-300 groups compared with control group. GSHPx activities in brain cytosol were remarkably increased (17.2% and 23.9%, respectively) in MLE-100 and MLE-300 groups compared with control group. These results suggest that anti-aging effect of mulberry leaf extract (MLE) may play a pivotal role in attenuating a various age-related changes in brain.
These studies were designed to investigate the effects of pine (Pinus densiflora Sieb et Zucc.) needle extract (PNE) on oxygen radicals and their scavenger enzymes in liver membranes of Sprague-Dawley (SD) rats as a study on investigation of anti-aging effect and determination of chemical structures of PNE through the animal experiments. Male SD rats were fed basic diets (control group) and experimental diets (0.5% and 1.0%-PNE group) for 6 weeks. There were no significant differences in hydroxyl radical (·OH) formations of liver mitochondria and microsomes in 0.5%-PNE group, while ·OH formations were significantly decreased (10% and 18%, respectively) in liver mitochondria and microsomes of 1.0%-PNE group compared with control group. Microsomal hydrogen peroxides and cytosolic superoxide radicals were remarkably decreased (20% and 20∼25%, respectively) in 0.5% and 1.0%-PNE groups compared with control group. Mn-SOD activities in mitochondria were significantly increased about 10% in 1.0%-PNE group, while Mn-SOD activities in mocrosomes were remarkably increased (16∼20%) in 0.5% and 1.0%-PNE groups compared with control group. There were no significant differences in Cu, Zn-SOD activities of liver cytosol in 0.5% and 1.0%-PNE groups, while glutathione peroxidase (GSHPx) and catalase (CAT) activities were significantly decreased (28∼30% and 15∼30%, respectively) in liver cytosols of 0.5% and 1.0%-PNE groups compared with control group. These results suggest that these PNE may play a effective role in a attenuating a oxygen radical formations and increasing a scavenger enzyme activities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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