• 제목/요약/키워드: extracellular production

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발색반응 분석법을 이용한 표고 교배균주의 세포외효소 분비 능력 평가 (Assessment of the Ability of Extracellular Enzyme Production in Hybrid Strains of Lentinula edodes by Chromogenic Reaction-based Plate Assay)

  • 권혁우;김준영;고한규;박흥수;김성환
    • 한국균학회지
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    • 제39권2호
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    • pp.99-104
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    • 2011
  • 표고버섯의 육종은 두 개의 다른 모균주에 의한 교배와 버섯생산에 좋은 형질을 지닌 교잡균주의 선발이 요구된다. 본 연구에서는 서로 다른 두 계통의 표고 모균주에서 유래한 단핵균주와 이들 단핵균주간의 교배로부터 만들어진 교잡균주에 대하여 발색반응 배지를 이용하여 세포외 분해효소의 분비능력 정도를 비교하여 생화학적 특성이 우수한 균주를 선발할 가능성에 대하여 조사하였다. 모균주로부터 유래한 단핵균주들 간에 ${\beta}$-glucosidase, avicelase, CM-cellulase, amylase, pectinase, xylanase, protease의 분비능력에 차이가 있음을 확인하였다. 교잡균주에 있어서도 단핵균주의 조합에 따라 효소 분비능력이 달라지는 것을 볼 수 있었다. 이에 따라 발색반응배지를 이용한 세포외효소 평가법이 표고의 육종과정 중에 생성되는 교잡균주들의 평가에 활용 할 수 있을 것으로 사료된다.

Attenuation of Extracellular Acidic pH-induced Cyclooxygenase-2 Expression by Nitric Oxide

  • Cha, Seok Ho;Park, Ji Eun;Kwak, Jin-Oh;Kim, Hyun-Woo;Kim, Jong Bong;Lee, Kwang Youn;Cha, Young-Nam
    • Molecules and Cells
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    • 제19권2호
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    • pp.232-238
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    • 2005
  • Corneal endothelial cells play an important role in maintaining the transparency and ionic balance of the cornea. Inflammation causes many changes in the intracellular and extracellular environment of the cornea, including acidosis. We examined the relationship between changes in extracellular pH and expression of cyclooxygenase-2 in cultured bovine corneal endothelial cells. When extracellular pH ($[pH]_o$) was reduced to pH 6.4, COX-2 mRNA increased, with a peak at 2 h. This was blocked by pretreatment with actinomycin D and incubation with spermine NONOate (SPER/NO, a nitric oxide donor). Exposure to the $H^+$ ionophore, carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone (CCCP), also raised COX-2 mRNA levels. CCCP-induced COX-2 mRNA expression was also reduced by SPER/NO. These results were confirmed immuno-cytochemically. These data demonstrate that COX-2 expression is stimulated by the lowering of extracellular pH that could result from bacterial infection, and that this is countered by over-production of nitric oxide, which could also result from bacterial infection.

인간조직인자 세포외 부분의 효과적인 제조 방법 (An Efficient Method for Production of Extracellular Human Tissue Factor in Escherichia coli)

  • 유환구;박양진;이우일
    • 생명과학회지
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    • 제19권5호
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    • pp.561-565
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    • 2009
  • 인간조직인자는 혈액응고인자 factor VII 과 복합체를 형성하며 연속적인 혈액응고 연쇄반응을 촉매하는 효소 활성체이다. 복합체 형성에 필수적인 이 조직인자의 세포 외 부분이, 기존의 융합 단백질 및 히스티딘 말단이 없는 새로운 발현 벡터에 의해 대장균 내에서 과량 발현 되었다. 봉입체 형태로 발현된 재조합 인간조직인자는 DEAE-Sephacel 크로마토그라피 기술을 적용하여 분리, 정제 및 구조적 복원이 동시에 시도 되었다. 정제된 재조합 단백질은 SDS-PAGE 분석에서 순수한 형태로 나타났으며, 생물학적 활성도 또한 기존의 조직인자와 거의 동등함을 보였다. 본 연구의 발현 및 정제 시스템은 이전의 보고에서 보여진 방법들에 비해 단백질 분해효소를 사용하지 않아 추가적인 크로마토그라피 과정이 필요 없어 좀 더 효율적이기 때문에 기존의 발현 시스템에 대해 대체할 수 있는 매우 유용한 방법으로 제공된다.

Yarrowia lipolytica 504D의 Extracellular Alkaline Proteinase 생산성 (Production of the Extracellular Alkaline Proteinase by Yarrowia Lipolytica 504D)

  • 유춘발;김창화;김태곤
    • 생명과학회지
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    • 제8권3호
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    • pp.333-338
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    • 1998
  • Productivity of alkaline proteinase from Yarrowia lipolytica 504D was investigated. For the production fo the enzyme, hemoglobin was the best nitogen source, however, casein and skim milk were also good. All carbon sources inhibited strongly the producitivity of the enzyme. Yeast extract increased the productivity of the enzyme to 220%, but almost mineral salts except monovalant ions decreased it. Based on these results, optimal medium was composed of 1.2% casein, 0.2% glucose, 0.16% yeast extract, and 0.1% ammonium sulfate. the best condition for the production of the enzyme was observed at pH 9 and $20^{\circ}C$ for 42 hours.

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Production of Extracellular Polysaccharide, EPS WN9, from Paenibacillus sp. WN9 KCTC 8951P and Its Usefulness as a Cement Mortar Admixture

  • Kahng, Goong-Gjung;Lim, Seo-Hyung;Yun, Han-Dae;Seo, Weon-Taek
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제6권2호
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    • pp.112-116
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    • 2001
  • The production of extracellular polysaccharide, EPS WN9, from Paenibacillus sp. and its suitability as a viscosity modifying admixture for cement mortar mixing were investigated. After 48h culture in an optimized medium, cell growth and EPS production were 1.2g/L and 4.0g/L, respectively. By adding EPS WN9 to mortar, it was possible to prepare a homogeneous mortar without material segregation and excess air entrapment. The optimal amount of EPS addition to mortar found to be 0.02 to 0.05%(w/w) of the cement used. Increasing the dosage of EPS WN9 from 0 to 0.05%(w/w) resulted in a setting retardation of 0.14h to 0.8h and an increase in the compressive strength of mortar of 10 to 20%.

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내염성 효모의 분리 및 세포외 Protease의 생산 (Isolation of a Halotolerant Yeast and the Production of Extracellular Protease)

  • 정승찬;현광욱;김재호;이종수
    • KSBB Journal
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    • 제16권2호
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    • pp.158-162
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    • 2001
  • A halotolerant and extracellular protease-producing yeast was isolated from traditional Meju and identified as a strain of Hansenular polymorpha by investigating its microbiological characteristics. The optimum pH, temperature and NaCl concentration reauired for the growth of Hansenular polymorpha S-9 were found to be pH 6.0, 30$^{\circ}C$ and 0.5 M, respectively. Extracellular protease was produced maximally at 10 U ml(sup)-1 when Hansenular polymorpha S-9 was grown on the medium containing 1.0% beef extract and 0.1 M NaCl for 12 hr at 30$^{\circ}C$. About 13% of the angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitory activity was shown in the hydrolysates which were obtained from the digestion of soybean protein (6 mg) for 6 hr at 30$^{\circ}C$ by the crude enzyme (1 U).

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Rhodocyclus gelatinosus KUP-74의 휴지균체를 이용한 ${\delta}-Aminolevulinate$의 생산 (Production of ${\delta}-Aminolevulinate$ by Using the Resting Cells of Rhodocyclus gelatinosus KUP-74)

  • 이소희;안영철;임왕진;황세영
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제37권6호
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    • pp.427-432
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    • 1994
  • 광합성세균인 Rhodocyclus gelatinosus KUP-74의 휴지균체에 의한 균체외 ${\delta}-aminolevulinate$(ALA) 생산 효율성에 관하여 검토하였다. 균체외 ALA의 최대 생산치를 위하여 1 ml ALA 생산계는 1.05 mg의 휴지균체로 6시간의 배양을 필요로 하였다. 또한, 이 조건에서 ALA 생산의 유도물질인 levulinate나 L-glutamate 등은 균체외 ALA 생산에 있어서 비교적 낮은 효과를 나타내었다. 반면에, ALA 생산계의 부피와 이에 적합한 균체밀도가 효과적인 ALA 생산을 위하여 중요한 요인으로 나타났다. 휴지균체의 안정한 ALA 생산유지를 위한 수명은 휴지균체를 고정화 시키므로써 크게 연장되었다.

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차가버섯의 균사체 및 세포외다당체의 생산조건과 면역활성 (Optimun Conditions for Production of Mycelia and Extracellular Polysaccharide from Inonotus obliquus and Their Immunomodulating Acitivities)

  • 박희성;신동일;정일경;양병근
    • 생명과학회지
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    • 제19권11호
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    • pp.1617-1622
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    • 2009
  • 차가버섯의 균사체 생장과 세포외 다당체 생산을 위한 최적의 배양조건을 조사하고, 세포내 외 다당체의 항보체 활성과 대식세포의 lysosomal enzyme 활성을 관찰하였다. 균사체 생장과 세포외 다당체 생산을 위한 최적 pH, 온도, 및 교반속도는 각각 5.5, $25^{\circ}C$, 150 rpm으로 나타났으며, 배양기간은 11일째 최대 균사체 생장(10.89 g/l)과 세포외다당체 생산(1.25 g/l)을 보였다. 항보체 활성은 세포내 외 다당체의 처리 농도가 높을수록 활성이 증가함을 보였고, 대식세포의 lysosomal enzyme 활성은 $100{\mu}g/ml$ 농도에서 음성대조군에 비해 세포내 다당체는 약 2.2배, 세포외 다당체는 약 2배 정도 증가하였다.

Pseudomonas sp. GP32에 의해 생산된 세포 외 다당류의 생산 및 특성 (Production and Characterization of Extracellular Polysaccharide Produced by Pseudomonas sp. GP32)

  • 이명은;이현돈;서현효
    • 생명과학회지
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    • 제25권9호
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    • pp.1027-1035
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    • 2015
  • 미생물유래 다당류 생산균주를 분리하기 위해 전국 각지의 토양시료로부터 가장 높은 점성과 다당류 생산성을 나타내는 균주 GP32를 분리하였으며, 분리균주 GP32의 동정을 분리균주의 형태학적, 생리학적 특성을 조사한 결과, Pseudomonas 속 세균으로 확인되었으며 최종적으로 Pseudomonas sp. GP32로 명명하였다. 플라스크 수준에서 Pseudomonas sp. GP32의 다당류 생산을 위한 가장 적합한 탄소원과 질소원은galactose와 (NH4)2SO4를 이용하였을 때 가장 많은 다당류를 생산하는 것으로 확인되었으며, 다당류 생산을 위한 최적의 C/N ratio는 50이었다. 다당류 생산을 위한 최적 pH와 온도는 각각 7.5와 32℃였다. 최적화된 배지를 이용한 fermentor 배양에서 다당류 생산은 배양 70시간에 최고치를 나타내었으며, 이때 다당류 생산량은 15.7 g/l이었다. Pseudomonas sp. GP32로부터 생산된 다당류는 ethanol 침전, cetylpyridimium 침전과 gel permeation chromatography를 통하여 정제하였으며, 정제된 다당류는 Biopol32로 명명하였다. Biopol 32의 분자량은 3×107 datons이었으며, Biopol32가 함유하고 있는 구성당은 galactose : glucose : gulcouronic acid : galactouronic acid 등이 1.85 : 3.24 : 1.00 : 1.42의 몰비로 함유되어있다. Biopol32 용액은 의가소성 성질을 갖는 고분자 화합물로서 Zoogloea ramigera가 생산하는 생물고분자인 zooglan보다 모든 농도에서 높은 점성을 나타내었다. Biopol32의 실제 폐수처리현장에서 응집제로의 사용 가능성을 검토하기 위하여 식품폐수, 섬유폐수와 제지폐수를 대상으로 응집효율을 조사한 결과, 높은 COD 감소율 (58.4~67.3%)과 SS제거율(82.6~91.3%)를 나타내어 실제 산업폐수에서 뛰어난 응집효율을 나타내었다.

Production and Location of Xylanolytic Enzymes in Alkaliphilic Bacillus sp. K-1

  • Lee Yun-Sik;Ratanakhanokchai Khanok;Piyatheerawong Weela;Kyu Khin-Lay;Rho Min-Suk;Kim Yong-Seok;Om Aeson;Lee Joo-Won;Jhee Ok-Hwa;Chon Gil-Hyung;Park Hyun;Kang Ju-Seop
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제16권6호
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    • pp.921-926
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    • 2006
  • The production and location of xylanolytic enzymes in alkaliphilic Bacillus sp. K-1, isolated from the wastewater treatment plant of the pulp and paper industry, was studied. When grown in alkaline xylan medium, the bacteria produced xylanolytic enzymes such as xylanase, $\beta$-xylosidase, arabinofuranosidase, and acetyl esterase. Two types of xylanases (23 and 45 kDa) were found to be extracellular, but another type of xylanase (35 and/or 40 kDa) was detected as pellet-bound that was eluted with 2% triethylamine from the residual xylan of the culture. The xylanases were different in their molecular weight and xylan-binding ability. Arabinofuranosidase and $\beta$-xylosidase were found to be intracellular and extracellular, respectively, and acetyl esterase was found to be extracellular. The extracellular xylanolytic enzymes effectively hydrolyzed insoluble xylan, lignocellulosic materials, and xylans in kraft pulps.