아프리카 왕달팽이 (Achatina fulica)의 난모세포 성숙과정을 전자현미경을 통해 관찰한 결과 3단계 과정으로 나눌 수 있었다. 제1기 난모세포는 그 크기가 $220\times400{\mu}m$정도의 작은 타원형의 세포로서 밝은 핵질속에 2개의 인이 존재하였다. 세포질에는 많은 수의 사립체와 조면소포체 그리고 리보솜이 있었으며 난황과립들은 관찰되지 많았다. 제2기 난모세포의 핵은 세포질의 용적에 비해 비교적크고 한 개의 인을 소지하고 있었다. 내, 외 이중막으로 구성된 핵막에는 많은 핵공이 관찰되고 이를 통해 물질 이동 현상이 관찰되었다. 세포질에는 많은 수의 사립체, 골지체 그리고 지방성 난황과립들이 출현하였으며, 대, 소형의 공포(직경, $0.8\sim3.0{\mu}m$)들 속에는 단백질성난황 과립들이 형성, 성숙되고 있었다. 제3기 난모세포는 핵에 비해 핵소체의 크기가 증대되었고 핵공을 통한 물질이동현상은 관찰되지 않았다. 세포질 속에는 성숙된 단백질성난황과립과 지방성난황과 립들로 가득 차 있었으며, 난막의 주위에는 미세융모가 발달해 있었다.
Flathead flounder Hippoglossoides dubius is a commercially important fish in the coastal waters of Gangwon Province, which is its spawning ground and breeding habitat. A total of 1,669 gonads were sampled monthly from February 2011 to May 2013 to investigate ecological characteristics, such as variations in maturation and spawning by gonad index, visual maturity stage, histological observations and oocyte diameter. Males were numerically dominant over females in the fishing grounds year round. The spawning season was from January to April, and the peak was from February to March. Oocyte number as a measure of fecundity was between 27,372 and 915,209 eggs with a length range of 26.0-48.7 cm TL, while the largest oocyte grew to 0.9-1.4mm in egg diameter during its spawning season. The relationship between fecundity and total length was $F=0.0016TL^{5.2539}$. The smallest mature lengths of the females and males were 28.4 and 22.6 cm respectively, and the 50% mature lengths of females and males were 32.9, 26.9 cm respectively.
Filefish Thamnaconus modestus has seen a sharp decline in their catch, we must strive for continuous resource management. We investigated the maturation and spawning of T. modestus by trawl net and set net from January 2018 to November 2019, off Jeju Is. and in coastal waters of North Gyeongsang Province's Korea. We analyzed monthly change total length (cm), gonadosomatic index (GSI) and maturity stages, egg diameter (mm), the relations fecundity and total length. GSI for Jeju Is. was the highest in April (3.17, 2.43), and decreased from July to 1.73 in August and GyeongBuk's GSI was the highest in Apri l (1.86, 2.58), followed by the high in May and the sharp decline in September, which is 0.23. Using a histological method, the annual reproductive cycle of T. modestus can be divided into 5stage in females; the early growing stage (Jan.-Mar.), late growing stage (Apr.-May), Mature stage, spent stage (Oct.), Recover and resting stage (Nov.-Jan.).We estimate the TL at 50% maturity as 24.1cm for female, fecundity ranged from 560,044 eggs at 23.4cm total length to 1,580,387 eggs at 36.6.cm TL.
Ko, Shin Ja;Kim, Yoo Kyung;Hong, Seong Wan;Kang, Min Su;Park, Chan Sun;Hwang, Eun Kyoung;Lee, Young Don
ALGAE
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제35권2호
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pp.123-131
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2020
Sargassum macrocarpum is a rich source of anti-inflammatory compounds. Recently, one of the compounds, tuberatolide B, has been reported as a functional anti-inflammatory additive for foods and nutraceuticals. The artificial seeding, growth and maturation of S. macrocarpum were investigated from May 2018 to September 2019. Indoor culture experiments for induction of egg release were conducted at temperatures of 17, 20, 23, and 26℃ and irradiances of 0, 10, 20, 40, and 80 μmol photons m-2 s-1 under 14 : 10 h (L : D) photoperiod. Within a given treatment combination, higher temperatures and irradiance levels favoured the maturation of receptacles in S. macrocarpum. Using artificial temperature and irradiance control, thalli matured one month earlier than thalli in nature. Under natural condition, receptacle formation began in April, and the eggs were released in June and July. The release of eggs from the receptacles was promoted at 17-20℃ and 40-80 μmol photons m-2 s-1, and the fastest growth of germlings occuring at 15-17℃ and 40 μmol photons m-2 s-1. For mature thalli, 300 g wet-weight was sufficient to seed 100 m of seed string. Thalli grew to 10.5 ± 2.6 cm in length at a density of 6.7 ± 3.3 individuals m-1 after 1 year of cultivation, from germination. This study demonstrates that it is possible to cultivate S. macrocarpum for the production of anti-inflammatory products.
안전방안에서 여포난자가 성숙한다는 것이 몇가지 동물을 이용한 실험에서 밝혀진 바가 있었거니와 여포 난자가 異種의 안전방내에서도 성숙이 가능한 가를 보기 위하여 본 실험을 행하였다. 토끼의 경우 자체의 안전방내에 이식한 여포난자가 다른 동물 즉 흰쥐나 흰생쥐의 안전방에 이식하였을 때보다 낮은 성숙률을 보여 주고 있을 뿐, 흰쥐, 흰생쥐들은 각각 상호간의 안전방에 이식하였을때 同種의 다른 개체의 안정방에서 얻은 결과보다 훨씬 좋은 성숙률을 나타내고 있다. 특히 흰쥐의 여포난자는 숫컷 흰쥐의 안전방에서 24시간 사이에 76%가 제 1및 제 2차 분렬의 증기에 있으며 같은 종류의 수컷 생쥐의 안전방에서 55%가 성숙한 것 보다 훨씬 높은 율을 보여주고 있는 것이다. 안전방의 전방수가 함유단백질의 양이거나 삼투압에 있어서 일반체액이거나 표준배양액의 것들과는 크게 다르며 세포나 조직의 배양액으로는 그다지 적당한 것으로 보이지 않으나 여포난자의 활성획득에는 큰 영향이 없다할 것이다. 특히 異種간의 이식실험에서 얻은 결과가 자체거나 同種간의 이식실험과 거의 같거나 오히려 더 나은 성과를 보여주고 있는데, 는 그 이유에 대해 더 밝혀야 할 문제로 본다. 단지 난자는 성숙분렬을 위한 활성을 갖는데 난자자체의 구성성분 즉 난황물질의 양에 크게 좌우되는 것같으며 또한 난자가 배양될 안전방의 환경요인이 성숙률을 결정하는 데 큰 영향을 주는 것으로 보인다.
Objective: Zona pellucida (ZP) has been thought to be the barrier of egg to sperm penetration before and after fertilization. The phenomenon of ZP hardening has been considered as a post-fertilization event until now, and it is generally accepted that it is caused by the secretory products of cortical granules released during the cortical reaction. Hardening of ZP could occur "spontaneously" in mammalian oocytes in standard culture conditions, and that it is probably not a consequence of cortical reaction. The purpose of our study was to investigate the effect of human amniotic fluid (HAF) on nuclear maturation (NM) and fertilization ability of mouse immature oocytes. Methods: HAF was obtained from patients undergoing amniocentesis at $16{\sim}20$ weeks of gestation. HAF from five to ten patients was centrifuged and the supernatants was pooled. Cumulusenclosed mouse immature oocytes were incubated in the medium containing HAF, and examined to confirm NM and fertilization. Female ICR mice (about 3 weeks old) were stimulated with 7.5 IU PMSG. Immature oocytes were isolated at $48{\sim}52$ hrs post PMSG injection and cultured in TCM-199 supplemented with 20% HAF for 18 hrs. FBS was used as a control for the examination. Matured oocytes (MII) were fertilized with sperms collected from the epididymis of male mice (over 10 weeks old). Fertilization was in conducted T6 medium containing 15 mg/ml BSA, and confirmed at 6 hrs post-insemination. Fertilization rate was assessed in zona-intact or zona-free oocytes (denuded by trypsin). Evaluation of NM and fertilization was carried out by rapid staining method. ZP hardening was evaluated by incubating cumulus cell-free mature oocytes in 0.001% chymotrypsin at $37^{\circ}C$ for 10 min. Results: There was no significant difference between the effects of HAF (86.6%) and FBS (87.7%) supplements on NM of immature oocytes. When maturation medium was supplemented with HAF, total fertilization rates (7%) were significantly lower (p<0.01) than that of FBS (85.1%). In HAF group, fertilization rate was increased (p<0.01) in zona-free oocytes (7% versus 100%). The resistance of mouse oocyte ZP to digestion by chymotrypsin after maturation in vitro was significantly higher (p<0.01) in HAF group (86.7%) than in FBS (6.7%). To culture oocytes in FBS were very effective in preventing ZP hardening. However cultured oocytes in HAF showed high rate of ZP hardening (p<0.01). Conclusions: These results suggest that HAF can be used as a supplement for the NM of mouse immature oocytes in vitro. However, HAF induces spontaneous hardening of ZP of mouse immaure oocytes during maturation in vitro.
During the rapid phase of gonadal development of the freshwater teleost, the catfish (Silurus asotus), the influence of hCG upon the inducement of final oocyte maturation and spawning was investigated electrophoretically and ultrastructurally. The electrophoretic patterns obtained were different in the presence and absence of some of the major or minor zones, because of the hormone level in catfish. The vitellogenin of hormone-treated fish was stained more intensively than that of sham-treated fish. These proteins showed some minor or main bands of egg extracts which migrated at positions corresponding to molecular weights of approximately 90,000. However, the thickness of electrophoretic band in molecular weight for hCG-treated fish was slightly lower than that for saline control. It seemed the plasma protein with molecular weight of approximately 45,000 in hCG-treated fish disappeared. In contrast to the control fish, the ovaries in the catfish treated with hCG shows a marked ultrastructural change under the electron microscope. No dilated profiles were seen in the granulosa cells of the mature oocyte before ovulation. After germinal vesicle breakdown (GVBD), the zona radiata interna (ZRI) becomes more compact, and there is a loss of all the processes from the pore canals. There is a wide space between the vitelline membrane and zona radiata. Also, during final maturation, the microvillar processes from the oocyte are seen no longer to penetrate deeply into the extracellular spaces of the overlying granulosa cells, and the reticulate patterns of the zona radiata interna becomes occluded, giving the zona radiata a more solid appearance. It has been possible to initiate 100% oocyte maturation in yolk granules and follicles in vivo by treatment with hCG and a high water temperature ($27^{\circ}C$). In hCG-treated fish, the percentages of successful artificial fertilization and hatching were maximal at 15 h after a single injection. It seems clear that a long acting preparation containing hCG can be successfully used in prespawning fish to advance the final events of gonadal maturation and initiate spawning. Further studies are necessary to evaluate the potential of hCG to either stimulate or inhibit the reproductive development of fish at other stages of the seasonal reproductive cycle.
Park, Jong Youn;Cho, Jae Kwon;Choi, Young Jae;Han, Kyeong Ho;Hong, Chang Gi
한국발생생물학회지:발생과생식
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제22권4호
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pp.369-378
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2018
We determined the morphologic characteristics (body weight and degree of abdomen inflation) of the red spotted grouper, Epinephelus akaara, mother fish producing healthy eggs. Experimental fish were chosen from fish reared in a sea cage. The fish were divided into four size groups by body weight: 400~600, 600~800, 800~1,000, and 1,000~1,200 g and four stages (I~IV) of the degree of abdomen inflation. After hormone treatment, we observed the amount of ovulation-induced eggs, and rates of buoyancy, fertilization, embryonic survival, and hatching. As a result, mother fish with a body weight of 600 g or more spawned, and the fertilization rate, embryonic survival rate, and hatching rate were high in the 800~1,000 g range, thus showing effective ovulation induction. As a result of dividing the degree of abdomen inflation based on the anal fin of the mother fish into I-IV stages and determining hormone treatment time, the GSI was $0.9{\pm}0.2%$ at stage I, $2.3{\pm}0.2%$ at stage II, $5.6{\pm0.2%$ at stage III, and $7.9{\pm}0.9%$ at stage IV. The flotation rate and hatching rate were highest at stage III, and the fertilization rate and embryonic survival rate were highest at stage IV. Therefore, in terms of egg quality, the amount of eggs collected per mother fish, maturation, and histology were different depending on the degree of abdomen inflation. At stage III, where the abdomen inflation degree of the mother fish was based on the basal part of the dorsal fin relative to the height of the anal fin was 1, the egg quality was highest.
The ability of oocytes to undergo normal fertilization and embryo development is acquired during oocyte maturation which is transition from the germinal vesicle stage (GV), germinal vesicle breakdown (GVBD) to metaphase of meiosis II (MII). Part of this process includes redistribution of inositol 1, 4, 5-triphosphate receptor (IP3R), a predominant $Ca^{2+}$ channel on the endoplasmic reticulum membrane. Type 1 IP3R (IP3R1) is expressed in mouse oocytes dominantly. At GV stage, IP3R1 are arranged as a network throughout the cytoplasm with minute accumulation around the nucleus. At MII stage, IP3R1 diffuses to the entire cytoplasm in a more reticular manner, and obvious clusters of IP3R1 are observed at the cortex of the egg. This structural reorganization provides acquisition of $[Ca^{2+}]_i$ oscillatory activity during fertilization. In this review, general properties of IP3R1 in somatic cells and mammalian oocyte are introduced.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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