Previously, we identified the 20S proteasome ${\alpha}$-subunit of Magnaporthe oryzae (M. oryzae) induced during appressorium formation, and detected an increase in multiple protein ubiquitination during the early appressorium formation process (Kim et al., 2004). In this study, we further attempted to determine whether the proteasome is involved in the appressorium formation of M. oryzae both in vitro and in planta, using proteasome inhibitors. A significant increase in 20S proteasome during fungal germination and appressorium formation was observed using Western blot analysis with 20S proteasome antibody, demonstrating that proteasome-mediated protein degradation was involved in appressorium formation. Pharmacological analysis using proteasome inhibitors, MG-132, proteasome inhibitor I (PI) and proteasome inhibitor II (PII) revealed that germination and appressorium formation were delayed for 4 to 6 h on rice leaf wax-coated plates. Similarly, the treatment of proteasome inhibitors with fungal conidia on the rice leaf surface delayed appressorium formation and host infection processes as well. Additionally, fungal pathogenicity was strongly reduced at 4 days' postfungal infection. These data indicated that the fungal 20S proteasome might be involved in the pathogenicity of M. oryzae by the suppression of germination and appressorium formation.
For isolation of antagonistic fungi antagonistic to Phytophthora capsici, a total of 157 isolates of fungi were screened from soil. Among the 157 isolates further screened by the dual culture test on potato dextrose agar and V-8 juice agar, 16 isolates were tested to show their antagonistic activity against P. capsici and Fusarium oxysporum. Fungal cul-ture filtrates of screened 16 isolates were shown to inhibit germination of zoospoorangia of P. capsici entirely and conidia of F. oxysporum considerably. Antagonistic fungi were shown to suppress of P. capsici infection of red-pepper plants maintained in the green house. Four isolates. 27 J5, 37 J10, 36 J13 and 31 K10, with the reduced disease incidence 53.3∼60.0% were identified as Fusarium sp. (27 J5). Trichoderma sp. (37 J10, 36 J13) and Penicillium sp. (31 K10).
The soil-borne ascomycete fungus Cylindrocarpon destructans causes ginseng root rot disease and produces various secondary metabolites such as brefeldin A and radicicol. The slow growth of this fungus compared with other plant pathogenic and saprophytic fungi in soil disturbs isolation of this fungus from soil and infected ginseng. In this study, we developed a selective medium for C. destructans using radicicol produced by this fungus. Supplementing 50 mg/L of radicicol to medium inhibited the mycelia growth of other fungi including Botrytis cinerea, Rhizoctonia solani and Alternaria panax, but did not affect the growth of C. destructans. In addition, conidia germination of other fungal species except for C. destructans was inhibited in submerged culture supplemented with radicicol. This medium provides a very efficient tool for isolating C. destructans and also can be used as an enrichment medium for this fungus.
Tolerance against mercuric chloride in mutants of Pyricularia oryzae Cavara induced by ultraviolet(UV) irradiation has been investigated. The tolerant isolates obtained using ultraviolet(UV) irradiation were maintained a high level of tolerance even after 15 times transfer to the chemical free media. Each isolate of mutants UM-1, UM-2, and UM-3 on the successive monoconidial culture has genetically homogeneous for tolerance. The tolerant isolates sporulated less and showed a higher percentage of germination of conidia on media without the chemical than the parental isolate. The xotins released from the parental and the tolerant isolates have been identified as piricularin and $\alpha$-picolinic acid by paper-chromatography. The tolerant isolates produced more piricularin and its virulence on seedlings of rice varieties were higher than the parental isolates. Both piricularin production and virulance on rice were highest in the UM-2 isolate.
Botrytis cinerea was isolated from a gray mo이 leaf lesion on persimmon in fields of Kyeonsangnam-do from 1996 to 1998, and etiological study was conducted including physiological characteristics. It formed gray mold lesion with light green color on leaves of persimmon (Diospyros kaki). The temperature range for mycelial growth was between $5^{\circ}C$ and $30^{\circ}C$ with the optimum temperatures of $20^{\circ}C$ to $25^{\circ}C$. Conidia were oviod, cylindric, and colorless and their dimensions in culture were $8.4~11.5\times7.0~8.9\mu\textrm{m}$. The optimum temperature of conidial germination was $25^{\circ}C$. Sclerotia on potato dextrose agar medium were well formed and brownish condiophores were observed with their size of $18.5~64.9\times4.5~8.0\mu\textrm{m}$. Symptoms on artificially inoculated plants were similar to those of gray mold disease on persimmon caused by Botrytis cinerea in fields.
Incubation period of rice neck blast was investigated by injection of conidial suspension of Pyricularia oryzae into young panicles inside the flag leaf sheath at booting stage. Eleven to fifteen days were taken for symptom appearance from the date of injection. About two days were taken from conidia germination until infection occurred, the incubation period was determined as nine to thirteen days for the symptom development of neck blast in rice plants.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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1994.06a
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pp.27-49
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1994
Root colonization of biocontrol agents via seed treatment was investigated and a compatible combination, Gliocladium virens G872B and Pseudomonas putida Pf3, in colonizing cucumber rhizosphere was confirmed through the study. Much higher number of fungal and bacterial propagules were detected when two isolates were inoculated together. The presence of Pf3 in root system was greatly helpful to G872B to colonize at root tip. The mechanism of this phenomenon is partially elucidated through the results of in vitro experiments and the observations of scanning electron and fluorescence microscope. Addition of Pf3 cells resulted earlier germination of G872B conidia and increased mycelial growth. And the more number of germinated conidia on seed coat, the more vigorous hypal streching and sporulation on the root surface were observed in coinoculated treatment. The propagules of G872B on the cucumber root when they were challenged against the pathogenic Fusarium oxysporum, were even higher than that of G872B treated alone, and the magnitude of such a difference was getting grater toward the root ip and the population of F. oxysporum on the root was reduced by seed inoculation of G872B. The rhizosphere competence was obviously reflected to disease suppression and plant growth promotion that induced by the given isolate. Green house experiments revealed that the combined treatment provided long-term disease suppression with greater rate and the larger amount of fruit yield than single treatments. Through this study the low temperature growing Pseudomonas fluorescens M45 and MC07 were evaluated to apply them to the winter crops in field or plastic film house. In vitro tests reveal that M45 and MC07 inhibited the mycelial growth of Pythium ultimum, Rhizoctona solani and Phytophthora capsici and enhanced growth of cucumber cotyledon in MS agar. This effect was more pronounced when the bacteria were incubated at 14$^{\circ}C$ than at 27$^{\circ}C$. And disease suppression and plant growth promotion in green house were also superior at low temperature condition. Seed treatment of M45 or soil treatment of MC07 brought successful control of damping-off and enhanced seedling growth of cucumber. The combined treatment of two isolates was more effective than any single treatment.
From soil samples, 380 antagonistic microorgnisms were isolated. Among the isolates, 42 strains had mycelia growing inhibition ability against Fusariun solani, ginseng root rot causing pathogen. Isolates CHA 1 and S-PFHR 6 were proposed as antagonists for this study and they were identified as Promicromonospora sp. and Pseudomonas pseudoalcaligenes respectively. As an antagonism against hyphae of F. solani in dual culture test, CHA 1 and S-PFHR 6 inhibited linear growing, caused abnormal branching, and the membrane projection which formed by cell wall destruction. The secondary metabolites contained in the culture filtrates which prepared from PD broth and Nutrient broth inhibited the spore germination to 14.3%. The culture filtrate of S-PFHR 6 which prepared by a little amount of soil extract addition to nutrient rich medium had more strongly. inhibited the spore germination and spore germination decreased to less than 4.0% in it. The soil used in this study had fungistasis and the germination rate of macroconidia and chlamydospore of F.solani was 19.4% and 17.7% respectively. The steam sterilized soil lost fungistasis and germination rate of conidia increased to more than 97.9%. The soils amended with the propagule of CHA 1 and S-PFHR 6 increased fungistasis and the germination rate of macroconidia decreased to 14.7% and 11.7% respectively in each treatments. But the soil ammended with glucose and asparagine annulled fungistatic ability and the germination rate of macroconidia increased to more than 48.0%. As an antagonistic activity of the secondary metabolites of two antagonistic isolates in soil, the germination rate of macroconidia of F. solani was 9.3% in the soil amended with the culture filtrate of CHA 1 but the culture filtrate of S-PFHR 6 had no such activity. In the soil which treated with antagonist propagule or culture filtrate, the chlamydospore germination rate was lower than that in natural soil. The addition of glucose and asparagine to antagonist propagule treated soil did not enhanced the chlamydospore germination.
Park, Jaejin;Kong, Sunghyung;Kim, Seryun;Kang, Seogchan;Lee, Yong-Hwan
The Plant Pathology Journal
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v.30
no.2
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pp.136-150
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2014
Although multiple transcription factors (TFs) have been characterized via mutagenesis to understand their roles in controlling pathogenicity and infection-related development in Magnaporthe oryzae, the causal agent of rice blast, if and how forkhead-box (FOX) TFs contribute to these processes remain to be characterized. Four putative FOX TF genes were identified in the genome of M. oryzae, and phylogenetic analysis suggested that two of them (MoFKH1 and MoHCM1) correspond to Ascomycota-specific members of the FOX TF family while the others (MoFOX1 and MoFOX2) are Pezizomycotina-specific members. Deletion of MoFKH1 (${\Delta}Mofkh1$) resulted in reduced mycelial growth and conidial germination, abnormal septation and stress response, and reduced virulence. Similarly, ${\Delta}Mohcm1$ exhibited reduced mycelial growth and conidial germination. Conidia of ${\Delta}Mofkh1$ and ${\Delta}Mohcm1$ were more sensitive to one or both of the cell cycle inhibitors hydroxyurea and benomyl, suggesting their role in cell cycle control. On the other hand, loss of MoFOX1 (${\Delta}Mofox1$) did not show any noticeable changes in development, pathogenicity, and stress response. Deletion of MoFOX2 was not successful even after repeated attempts. Taken together, these results suggested that MoFKH1 and MoHCM1 are important in fungal development and that MoFKH1 is further implicated in pathogenicity and stress response in M. oryzae.
Bahadur, A.;Singh, U. P.;Sarma, B. K.;Singh, D. P.;Singh, K. P.;Singh, A.
Mycobiology
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v.35
no.3
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pp.129-134
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2007
Systemic effect of two plant growth-promoting rhizobacterial (PGPR) strains, viz., Pseudomonas fluorescens (Pf4) and P. aeruginosa (Pag), was evaluated on pea (Pisum sativum) against the powdery mildew pathogen Erysiphe pisi. Foliar spray of the two PGPR strains was done on specific nodal leaves of pea and conidial germination of E. pisi was observed on other nodal leaves, distal to the treated ones. Conidial germination was reduced on distant leaves and at the same time, specific as well as total phenolic compounds increased in the leaves distal to those applied with PGPR strains, thereby indicating a positive correlation. The strains induced accumulation of phenolic compounds in pea leaves and the amount increased when such leaves were get inoculated with E. pisi conidia. Between the two strains, Pag was found to be more effective than Pf4 as its effect was more persistent in pea leaves. Foliar application of PGPR strains for the control of powdery mildew of pea is demonstrated in vitro while correlating it with the increased accumulation of plant phenolics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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