Objectives: This study was performed to evaluate the effect of Samkieumgamibang (SKG) on osteoporosis. Methods: The osteoclastogenesis and gene expression were determined in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. And, osteoblastogenesis was also determined in rat calvarial cell. Results: SKG decreased the number of TRAP positive cell in osteoclast. It also decreased the expression of Cathepsin K, MMP-9, TRAP, c-fos, NAFTc1 and JNK1 in osteoclast. SKG increased the expression of iNOS in RANKL-stimulated in osteoclast. Otherwise, SKG inhibited TRAP activity in osteoclast. SKG increased cell proliferation, ALP activity, bone martix protein, collagen and nodule in osteoblast. Conclusions: It is concluded that SKG might decrease the bone resorption resulted from decrease of osteoclast differentiation and it's related gene expression. And, SKG might increase the bone formation resulted from increase of osteoblast function.
Objectives : The present study, to confirm the osteoblast differentiation effects of Acer tegmentosum Maxim. (AT) extract. Methods : In this experiment, cell viability, Alizarin red S assay, and Alkaline phosphatase (ALP) activity with AT extract (50, $100{\mu}g/m{\ell}$). Also, we studied the expression of differentiation regulator with AT extract in primary calvarial osteoblasts cells (pOB). Results : As a result of AT treatment, we determined that AT extract stimulates ALP activity and alizarin red activities in the pOB cells for mineralization for 18 days. Moreover, these factors increasing osteogenic markers such as Runt-related transcription factor2 ($Run{\times}2$), osteocalcin (OC), osteopontin, osterix, smad1, smad5, activating transcription factor4 (ATF4) and collagen type I alpha 1. Conclusions : These results indicate that AT extract have effect on bone through the promotion of osteoblastic differentiation, suggesting that it could be used for the treatment of bone diseases.
There is a potential role of collagenase-3 in alveolar bone loss and periodontal disease progression, we need to develope or find chemotherapeutic drugs or herbal agents which may regulate the expression of MMP-13. Ginseng saponin, one of the major components of Korea ginseng(panax ginseng) root, has many various biologic effects, such as cytotoxic effect, tumoricidal effects, cytokine regulations, and protein biosynthesis effect. The purpose of this study was to determine the effects of Korea red ginseng saponin on MMP-13 gene expression in osteoblasts. The experimental groups were cultured with ginseng saponin in concentration of 1.0, 10, 25, 50, 100, 250 and $500{\mu}g/ml$ for MTT assay. Primary rat calvarial cells were pre-treated for 1 hour with ginseng saponin(100 ${\mu}g/ml$) and then stimulated with $IL-1{\beta}(1.0ng/ml)$ and PTH(10 nM). MMP-13 gene expression was evaluated by RT-PCR. The results were as follows: Ginseng saponin was cytotoxic to osteoblast at concentration exceeding $250{\mu}g/ml$ for longer than 24 hours in tissue culture(p<0.01). In RT-PCR analysis, steady state MMP-13 mRNA levels were increased approximately 350% by $IL-1{\beta}$, and 400% by PTH when normalized to untreated control. $IL-1{\beta}-indued$ MMP-13 mRNA expression was reduced 50% by pretreatment with ginseng saponin. But ginseng saponin didn't inhibit MMP-13 expression from PTH stimulated cells. This results suggest that ginseng saponin Inhibit $IL-1{\beta}-indued$ MMP-13 mRNA expression.
The purpose of this study was to evaluate the osteogenic capacity of water extract of danshen (Salvia miltiorrhiza Bunge). We have established in rat critical-sized calvarial defect model using the combination with collagen scaffold and danshen hydrophilic extract. All rats were extinguished at 8 weeks after bone graft surgery, and the bone regeneration ability of bone grafting sides was evaluated by plain radiography and micro-CT. These results revealed water extract of danshen had the potential to promote osteogenesis especially continuous oral administration with local treatment compared to one-shot local treatment. This compound may provide a new alternative agent for growth factors to promote bone healing and bone regeneration. In conclusion, these results suggest that danshen hydrophilic extract have the potential to promote osteogenesis in bone defects. Further studies about fusion technology with salvianolic acid B, peptides, growth factors, and scaffolds using of the combination of tissue engineering, cell engineering and mechanical engineering are needed.
Kim, Ha-Eun;Yoon, Hun-Young;Kim, Eun-Jin;Kim, Sun-Jong
대한수의학회지
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제60권3호
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pp.145-153
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2020
This study aimed to evaluate the effects of a bioabsorbable bone hemostatic agent comprising poly (ethylene glycol-propylene glycol) copolymers (PEG-PPG) on hemostasis and osteogenesis. Bilateral 3 mm diameter calvarial defects were created in 99 male Sprague-Dawley rats. The defects were filled with PEG-PPG or bone wax. The defects of control group were left unfilled. Virtual autopsy was performed to evaluate bioabsorption. The calvaria were subjected to x-ray microtomography (microCT) and histological examination. Bone volume fraction (BV/TV) and bone mineral density (BMD) were measured using microCT; furthermore, white blood cell count and histological examination were performed. After application of PEG-PPG and bone wax, immediate hemostasis was achieved. Autopsy revealed that PEG-PPG disappeared within 48 h at the application site; in contrast, bone wax remained until 12 weeks. The PEG-PPG and control groups showed significantly more osteogenesis than the bone wax group with respect to BV/TV and BMD at 3, 6, and 12 weeks (p < 0.05). Histology revealed that the bone wax group exhibited little bone formation with inflammation. In contrast, PEG-PPG and control groups showed significantly more qualitative osteogenesis than the bone wax group (p < 0.01). In conclusion, PEG-PPG showed immediate hemostasis and was absorbed to allow progressive osteogenesis.
The ReCell system (Avita Medical) is a cell culture product that allows the immediate processing of a small split-thickness skin biopsy to produce a complete population of cells including keratinocytes, melanocytes, Langerhans cells and fibroblasts. This series is the first to highlight the reconstructive applications of ReCell following ablative skin cancer surgery. The ReCell system was utilized for three patients following skin cancer excision. In two cases, the cells were applied to forehead flap donor sites following nasal reconstruction. In one case, the cells were applied to the calvarial periosteum following wide local excision of a melanoma scar. Assessment of the treated area was performed using the patient and observer scar assessment scale after 1 year. The Patient and Observer Scar Assessment Scale (POSAS) scores for the 2 patients treated with ReCell following forehead flap surgery were 22 and 32. The score for the patient that underwent wide local excision of a melanoma scar was 45. The absence of a donor site, accelerated healing and the satisfactory aesthetic appearance of the mature scars in this series suggest that ReCell may play a useful role in reconstruction following skin cancer excision.
Purpose: The study was aimed to detect the induction of apoptosis, cell cycle arrest and calcified nodule formation after irradiation on primarily cultured osteoblasts. Materials and Methods: Using rat calvarial osteoblasts, the effects of irradiation on apoptosis, cell cycle arrest, and calcified nodule formation were studied. The single irradiation of 10 and 20 Gy was done with 5.38 Gy/min dose rate using the l37Cs cell irradiator at 4th and 14th day of culture. Apoptosis induction and cell cycle arrest were assayed by the flowcytometry at 1, 2, 3, and 4 days after irradiation. The formation of calcified nodules was observed by alizarin red staining at 1, 3, 10, 14 days after irradiation at 4th day of culture, and at 1, 4, 5 days after irradiation at 14th day of culture. Results: Apoptosis was not induced by 10 or 20 Gy independent of irradiation and culture period. Irradiation did not induced G1 arrest in post-irradiated ostedblasts. After irradiation at 4th-day of culture, G2 arrest was induced but it was not statistically significant after irradiation at 14th-day of culture. In the case of irradiated cells at 4th day of culture, calcified nodules were not formed and at 14th-day of culture after irradiation, calcified nodule formation did not affected. Conclusion: Taken together, these results suggest that irradiation at the dose of 10-20 Gy would not affect apoptosis induction of osteoblasts. Cell cycle and calcified nodule formation were influenced by the level of differentiation of osteblasts.
Introduction : The purpose of this study was to evaluate the possibility of the acellular dermal matrix (ADM) as a barrier membrane for bone regeneration, and to evaluate the osteogenic effect of ADM as a carrier system for rhBMP-2 in the rat calvarial defect model. Materials and Methods: An 8-mm, calvarial, critical-size osteotomy defect was created in each of 60 male Spraque-Dawley rats(weight $250{\sim}300g$). Three groups of 20 animals, each received either rhBMP-2(0.025mg/ml) in an ADM carrier, ADM only, or negative surgical control. And each group was divided into 2- and 8-weeks healing intervals. The groups were evaluated by histologic and histomorphometric parameters(10 animals/group/healing intervals). Data were expressed as $means{\pm}standard$ deviations($m{\pm}SD$). Comparisons between experimental and control groups were made using two-way ANOVA and post hoc t-test. Comparisons between 2 weeks and 8 weeks were made using paired t-test. The level of statistical difference was defined as P< 0.05. Results : The ADM group and rhBMP-2/ADM group results in enhanced local bone formation in the rat calvarial defect at both 2 and 8 weeks. The amount of defect closure and new bone formation were significantly greater in the rhBMP-2/ADM group relative to ADM group(P<0.05). At 8 weeks, the majority of ADM in the defect was contracted, and integrated with surrounding host tissues. In addition, host cell infiltration and neovascularization of the ADM in the absence of an inflammatory response were observed, and the newly formed bone around ADM showed a continuous remodeling and consolidation. Conclusion : The results of the present study indicated that ADM may be used as a barrier membrane for bone regeneration and that may be employed as a delivery system for BMPs.
Purpose: Recombining bone morphogenetic protein (BMP) is usually acquiredfrom high level animals. Though this method is effective, its high cost limits its use. The purpose of this study was to evaluate the effect of bone morphogenetic protein-2 with protein transduction domain (BMP-2/PTD;TATBMP-2) on bone regeneration. Rat calvarial defect model and osteoblastic differentiation model using MC3T3 cell were used for the purpose of the study. Materials and Methods: MC3T3 cells were cultured until they reached a confluence stage. The cells were treated with 0, 0.1, 1, 10, 100, 500 ng/ml of BMP-2/PTD for 21 days and at the end of the treatment, osteoblastic differentiation was evaluated usingvon Kossa staining. An 8mm, calvarial, critical-size osteotomy defect was created in each of 48 male Spraque-Dawley rats (weight $250{\sim}300\;g$). Three groups of 16 animals each received either BMP-2/PTD (0.05mg/ml) in a collagen carrier, collagen only, or negative surgical control. And each group was divided into 2 and 8 weeks healing intervals. The groups were evaluated by histologic analysis(8 animals/group/healing intervals) Result: In osteoblastic differentiation evaluation test, a stimulatory effect of BMP-2/PTD was observed in 10ng/ml of BMP-2/PTD with no observation of dose-dependent manner. The BMP-2/PTD group showed enhanced local bone formation in the rat calvarial defect at 2 weeks. New bone was observed at the defect margin and central area of the defect. However, new bone formation was observed only in 50% of animals used for 2weeks. In addition, there was no new bone formation observed at 8 weeks. Conclusion: The results of the present study indicated that BMP-2/PTD(TATBMP-2) have an positive effect on the bone formation in vitro and in vivo. However, further study should be conducted for the reproducibility of the outcomes.
Bone remodeling results from the combined process of bone resorption and new bone formation which is regulated in part by some of Dexamethasone related proliferation & mineralization of cultured bone cell and polypeptide growth factors such as platelet derived growth factor(PDGF), which has been known to be an important local regulator of bone cell activity and participate in normal bone remodeling. To evaluate the effects of Dex and PDGF on bony healing of calvarial defect in rats, 10 ng/ml PDGF were applied on P group and 10 ng/ml PDGF and $10^7$ M Dex were applied PD group. 4 rats in each group were sacrificed at 7, 14. 21 days after operation respectively, and the tissue blocks were prepared for light microscope with H-E for evaluation of overall healing, with TRAP(tartrate resistant acid phosphatase) for evaluation of osteoclastic activity and with immunohistochemical staining for macrophages. The results were as follows : 1. In all group, healing aspects were progressed from 7 days to 21 days in soft and bony tissue, but complete repair were not observed in bony defect 2. PDGF and control group were showed similar bony healing aspect , but bony healing in combination of PDGF-BB and Dex were observed slower aspect compared to PDGF and control group from early healing times. 3. There were no significant difference on activities of osteoclast and macrophages in bony healing between control and experimental group In conclusion, PDGF were not influenced on bony healing of defect and combination of PDGF-BB and Dex were showed slower healing through early healing times. it was considered that Dex compared to PDGF did influenced on early hone formation factors in healing period
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[게시일 2004년 10월 1일]
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