To investigate the usability of frozen canine embryos for embryo transfer in the dog, 19 donors, 3 recipients, and 6 male dogs were used for the experiment. Natural mating or artificial insemination was performed for breeding the bitches in natural estrus. Vaginal smear test along with progesterone titre test were performed to detect the appropriate mating time and the bitches were bred twice during 3-6days following LH surge. Embryo collection was done on 8, 9-11, 12-13 days after the second mating to collect morula and blastocyst. Embryos were frozen using a programmable freezer and preseued in LNE tank. Embryos were thawed in 37$^{\circ}C$ water for 15 seconds and transferred into each uterine horn within 30 minutes. Embryos were collected from 13 bitches of 19 donors(68.4%) and the collected embryos were from between 9 and 13 days after 2nd mating. Embryos were produced both by natural mating(60.0%, 9115) and AI with frozen semen(100.0%, 4/4). Embryos were collected from the donors weighed between 2.5 and 30 kg and their age was from 1.5 to 3 years. 52 embryos were collected from 13 donors and the mean number of embryos was four. The stage of embryos was from 2-cell to gastrula and morulae were colledted mostly from 10 to 11 days after 2nd mating. Embryos were collected evenly from each uterine horn and the rate of embryo collection for the number of corpus luteum was 83.9%. Embryos were transferred to 3 recipients(morula 8, blastocyst 1, gastrula 8), however, no offspring was produced.
Serial ultrasonographic examinations were daily performed from 15 days after ovulation until parturition to determine the time of first detection and ultrasonographic appearance of the fetal and extra-fetal structures in pregnant 10 Maltese, 10 Yorkshire Terrier, 15 Shih-tzu, and 10 Miniature Schnauzer bitches, respectively. Gestational age was timed from the day of ovulation (day 0), which was estimated to occur when plasma progesterone concentration was first increased above 4.0ng/ml. The gestational length was $63.4{\sim}63.6$ (range: $61{\sim}65$) days and the geatational length was no statistically significant difference among bitches (p>0.05). The initial detection of the extra-fetal structures were; gestational sac at days $18.9{\sim}19.5\;(17{\sim}22)$, zonary placenta at days $24.6{\sim}25.5\;(23{\sim}28)$, yolk sac membrane at days $24.6{\sim}25.5\;(23{\sim}27)$, yolk sac tubular shape at days $26.1{\sim}26.3\;(24{\sim}28)$, and amniotic membrane at days $26.1{\sim}28.2\;(24{\sim}31)$, respectively. The time of the first detection of the extra-fetal structures were no statistically significant difference among bitches (p>0.05). The initial detection of the fetal structures were; embryo initial detection at days $22.5{\sim}22.9\;(21{\sim}24)$, heartbeat at days $23.2{\sim}23.8\;(21{\sim}25)$, embryo bipolar shape $27.6{\sim}28.9\;(26{\sim}30)$, fetal movement at days $31.9{\sim}32.8\;(27{\sim}34)$, limb buds at days $29.1{\sim}30.7\;(27{\sim}33)$, stomach at days $31.1{\sim}33.1\;(29{\sim}34)$, urinary bladder at days $32.4{\sim}33.2\;(29{\sim}35)$, skeleton at days $34.7{\sim}35.9\;(34{\sim}39)$, and kidney at days $42.1{\sim}44.7\;(41{\sim}48)$, respectively. The the time of the first detection of the fetal structures were no statistically significant difference among bitches (p>0.05). These results indicate the evaluation of the time of first detection and ultrasonographic characteristics of the gestational structures might be useful for pregnancy diagnosis, estimating fetal age, embryonic resorption, fetal monster, abnormal fetal growth and fetal viability, respectively.
To study the conditions to enhance success of embryo transfer in the dog, 20 mixed-breed bitches were used for the experiment along with 4 male dogs for mating. The bitches were paired according to synchronism of natural estrus, or the counterpart as donor or recipient was treated with gonadotropin as FSH (follicular stimulating hormone) or PMSG (pregnant mare serum gonadotropin) for induction of estrus to be synchronized with estrus of the other bitch in natural estrus. Embryo recovery was performed in two ways for comparison, either by flushing each uterine horn after ovariohysterectomy or by flushing each horn in the state of non-ovariohysterectomy. In addition, the result of pregnancy according to the embryo stage and the repeatability of the experimental animals as donor or recipient were also investigated. FSH or PMSG was administered to the bitches which had passed over 4 months from last estrus, resulting in estrus-positive in 3 dogs of 6 FSH-treated dogs (50.0%), and in 5 dogs of 9 PMSG-treated dogs (55.6%), determined by proestrus signs and vaginal smear test. Estrus-positive bitches induced with gonadotropin were used as donor or recipient resulting in one embryo-recovered bitch as donor and one offspring-delivered bitch as recipient in 5 PMSG-treated dogs, whereas no result was obtained from 3 FSH-treated dogs. The rate of embryo recovery to be compared with number of corpus luteum was 68.2% in ovariohysterectomized dogs and 55.2% in non-ovariohysterectomized dogs, respectively. The number of dogs from which embryo was collected were 4 dogs of 6 ovariohysterectomized dogs (66.7%) and 6 dogs of 7 non-ovariohysterectomized dogs (85.7%), respectively. The result of parturition was obtained from one dog of 5 estrus-induced recipients, whereas no result was obtained from 3 natural-estrus recipients. The only dog which delivered a male puppy had been transferred 3 morulae and 2 blastocysts. Of 6 repeat-used bitches in canine embryo transfer, 3 dogs showed repeatability either as donor or recipient. These results indicated that inducing estrus of a dog with gonadotropin is feasible in canine embryo transfer to be synchronized with that of a natural-estrus dog, that embryo recovery is also possible in non-hysterectomized dogs, that the estrus-induced dog is also usable as recipient to result in parturition, and that repeat-use of a bitch as donor or(and) recipient is possible in canine embryo transfer.
This study was undertaken to determine the normal serial ultrasonographic appearance of the postpartum uterine involution. Postpartum changes in uterine shape, architecture, echogenicity and diameter were monitored by ultrasonography in 10 Shih-tzu bitches. Serial ultrasonographic examination was done daily during the first week, 3 days interval from 8 to 30 days, and weekly from 31 to 100 days postpartum. All 10 postpartum bitches had normal involution by gross finding, vaginal discharges, and by ultrasonographic findings, uterine shape and echogenicity. The uterine diameter in the placental sites was decreased from $23.56{\pm}1.45$ mm at 1 day to $14.08{\pm}1.55$ mm at 7 day, and in the interplacental sites was decreased from $14.64{\pm}1.28$mm at 1day to $9.61{\pm}1.46$mm at 7 day postpartum. At 65 days postpartum the uterine diameter was 5-6 mm both placental and interplacental sites, and the uterine horns were uniform hypoechic, tubular structures without enlargement. Therefore, complete involution of the uterus occured 65 days. It was concluded that normal postpartum uterine involution in Shih-tzu bitches appeared to be completed 65 days postpartum by gross findings such as vaginal discharges, and ultrasonographic findings. And ultrasonographic characteristics of the postpartum uterine involution were described. Therefore, these result suggest that ultrasonographic assessment is a reliable method for diagnosing the subinvolution of placental sites and uterine dysfunction, such as pyometra in the bitch.
Semen were collected from 9 male dogs and frozen by liquid nitrogengas. Frozen semen were thawed at 7$0^{\circ}C$ for 8 seconds. About $2{\timss}10^8$ sperm per insemination were inseminated to 10 bitches (3 Retrievers, 4 Chihuahuas, 1 Yorkshire Terriers, 1 Maltese, and 1 Poodle) at three and six days after the estimated peak of luteinizing hormone. For small breed dogs, uretero-renoscope (Kahl Storz, Germany, 12.5 Fr) was used for trans-cervical insemination, whereas cystoscope(Kahl Storz, Germany, 22Fr) was used for large breeds (Retrievers). Pregnancy was diagnosed by ultrasonography at 30 days after insemination. All of 3 Retrievers (100.0%) and 3 bitches of 7 small breed dogs (42.9%) were conceived (60.0% in total). This result indicated that trans-cervical insemination using endoscope is an effective method for AI with frozen semen not only for large breed dogs such as Retriever but also for small breeds.
Two bitches were presented to the Teaching Animal Hospital, Chonbuk National University with vagina prolapse along with prolapse of the bladder. Case 1 was a 2 years old, 38.5 kg, female Tosa dog which had slight shock and depression. She had a labor pain vagina prolapse since last 3 days. Case 2 was a 2 years old, 25 kg, female Rottweiler dog which was presented with the similar clinical signs with case 1. In both the dogs we performed plain radiography, CBC, blood chemistry and urine analysis. In case 1, we performed cesarean section along with the repositioning the vagina and the bladder. We found 13 fetuses among which 7 were alive. In case 2, we also performed cesarean section and recovered the fetuses. There were 7 fetuses but only one was alive. Among the 6 dead fetuses 3 were congenitally deformed. Then we reduced prolapsed vagina and bladder, and repositioned them. After that we performed ovariohysterectomy. Both the bitches become recovered from the prolapse of the vagina and bladder and there was no recurrence of the condition.
The effectiveness of two different methods for the treatment of mammary tumors in bitches was examined in 30 dogs to determine the use of homepathy induction by Phytolacca $D_{2}$ preparations. The animals in group 1 received only Phytolacca $D_{2}$. In group 2the tumors were removed surgically and were treated with Phytolacca $D_{2}$ post operation. For the clinical sigh post treatment the dogs were examined regularly to detect neoplasia, reoccurrences and metastases. Treatment with Phytolacca $D_{2}$ resulted in following effects; In group 1 was not efficient. In group 2 was an inhibition of tumor growth and treated animals appeared to be revitalized.
Stump pyometra is defined as a reinfection or inflammation of uterine remnant after ovariohysterectomy. We surveyed four bitches which were serviced in the veterinary medical teaching hospital of Seoul National University. In this Paper we studied the method for diagnosis of stump pyometra by symptoms, blood tests, and ultrasound films. To detect the stump pyometra is difficult because clinical signs are verb similar to the normal pyometra. Especially symptoms could noticed be noticed even by their owner until dogs have a vaginal discharge. Blood test also were in normal range in each item except in the elevation of the number of while blood cells. We conclude ultrasonic observation add experimental laparotomy has a significant meaning to diagnosis the stump pyometra.
To confirm the accuracy of the prediction of parturition day, the actual parturition days were compared with each day of the prediction of parturition day (n = 80). The accuracy of the prediction of parturition day was 80.0% (64/80) with a precision of ± 2 days from the first day of estrus after the first vaginal discharge, 97.5% (78/80) from the day when plasma progesterone concentrations increase above 4.0 ng/ml, and 72.5% (58/80) from the first day of diestrus, respectively. The accuracy of the prediction of parturition day by plasma progesterone concentration was higher than that by the first day of estrus and diestrus after the first vaginal discharge. These results indicated that the determination of plasma progesterone concentrations at estrus were a useful method for estimating of parturition day and for the reproductive management in pregnant bitches.
In dogs, correct diagnosis of estrus is important and the exact time of ovulation can be determined by variouse methods. Vaginal cytology has commonly used in conjunction with the physical examination, clinical history, vaginoscopy, and hormonal assays to determine the stage of the reproductive cycle. This study was therefore investigated the effectiveness of direct ovulation detector designed by changes of electrical resistance in vaginal mucus following different estrus cycles with several methods; vaginal cytology, concentration of plasma estrogen and progesterone, and direct examination by laparotomy. A total of 12 bitches was selected for the study and observed estrus signs. The bitches were evaluated clinical sign (vulvar swelling and bleeding), cytological examination (keratocyte and RBC), electrical resistance, plasma estrogen and progesterone concentration for estrus assessment. Accuracy of ovulation detection by vaginal cytology was significantly (p<0.05) lower than those by electrical resistance and plasma progesterone concentration, based on the confirmation by laparotomy. Vaginal smear is not confidential method compared to detection of electrical resistance and plasma progesterone concentration at ovulation. Although the value of electrical resistance was varied at the same points of estrus in individuals, ovulation was occurred at the first day which shown the peak of electrical resistance and mating time was third day after peak. In conclusion, ovulation detector designed by changes of electrical resistance is an effective and economic instrument for predicting estrus and ovulation in bitches.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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