생쥐에서 페르몬으로 알려진 소수성의 분자와 결합하는 major urinary proteins(MUPs)는 부분적으로 성장 호르몬(GH)의 조절을 받는다. 본 연구에서는 MT-GRF로 형질전환되어 성장호르몬이 증가된 생쥐에서 MUP의 발현을 조사하였다. 이 MT-GRF로 형질전환된 생쥐의 소변에서 MUP이 대조군보다 심하게 저하되어 나타났고, 암컷보다 수컷에서 더 저하되어 나타났다. 또한 MT-GRF를 근육에 주사한 생쥐에서도 MUP는 저하되어 나타났다. 부가하여, MT-GRF로 형질전환시킨 생쥐의 소변에서 전기영동상에서 albumin과 동일하게 이동하는 고분자의 단백질이 다량으로 관찰되었는데 신장의 사구체 여과가 손상되었음을 암시하고 있다. 이 혈장 단백질의 손실도 암컷보다 수컷에서 심하게 나타났다. 결과적으로 GRF의 과다생성은 성별에 차별화된 영향을 미치면서 GH로 형질전환된 동물모델에서 관찰되는 MUP의 발현과 사구체 기능의 변화를 동일하게 유발하고 있었다.
Many literatures focus on the biological relevance and the identification of biomarkers for disease activity assessment while less attention has been paid to the development of standard procedures for sample preparation and storage based on liquid chromatography technique. The influencing factors including protein precipitation, storage temperature, storage time, and reconstitution by ultra pure water were analyzed employing HPLC-DAD. The effects were investigated from five participants over three months by principal components analysis (PCA) and the values of percent changes (PC). The samples with protein precipitation might slow the rate of bacterial enzymatic conversion. After protein precipitation, the average PC of urine samples ($0.136{\pm}0.013$, n = 5) is relatively less than that of the serum samples ($0.173{\pm}0.026$, n = 5) for three months. Minimal effects on metabolic profiles of serum and urine (PC < 0.15) are reasonable for metabolomic studies after protein precipitation and storage at $-20^{\circ}C$ for two months.
Du, Chung-Li;Lin, Mia Chihya;Lu, Luo;Tai, John Jen
Safety and Health at Work
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제2권2호
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pp.169-175
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2011
Objectives: The questionnaire of occupational stress index (OSI) has been popular in the workplace, and it has been tailored for bus drivers in Taiwan. Nevertheless, its outcomes for participants are based on self-evaluations, thus validation by their physiological stress biomarker is warranted and this is the main goal of this study. Methods: A cross-sectional study of sixty-three city bus drivers and fifty-four supporting staffs for comparison was conducted. Questionnaire surveys, 24-hour urine cortisol testing, and blood draws for dehydroepiandrosterone-sulfate (DHEA-S) testing were performed. The measured concentrations of these biological measures were logarithmically transformed before the statistical analysis where various scores of stressor factors, moderators, and stress effects of each OSI domain were analyzed by applying multiple linear regression models. Results: For drivers, the elevated 24-hour urine cortisol level was associated with a worker's relationship with their supervisor and any life change events in the most recent 3 months. The DHEA-S level was higher in drivers of younger age as well as drivers with more concerns relating to their salary and bonuses. Non-drivers showed no association between any stressor or satisfaction and urine cortisol and blood DHEA-S levels. Conclusion: Measurements of biomarkers may offer additional stress evaluations with OSI questionnaires for bus drivers. Increased DHEA-S and cortisol levels may result from stressors like income security. Prevention efforts towards occupational stress and life events and health promotional efforts for aged driver were important anti-stress remedies.
본 연구의 목적은 30세이상 성인을 대상으로 간접흡연노출과 치주질환과의 관련성을 파악하고자 하였다. 연구자료는 2014년, 2015년 국민건강영양조사 자료를 이용하였으며, 5,146명을 최종분석대상자로 선정하였다. 치주질환은 지역사회 치주지수로 파악하였다. 이분형 로지스틱회귀분석을 이용하였으며, 95% 신뢰구간을 산출하였다. 본 연구결과 성별, 연령, 교육수준, 그리고 수입을 보정한 경우에서 요코티닌 수준이 50ng/mL미만에 비해 550ng/mL이상인 경우에서 치주질환 위험이 2.08배(95% CI=1.73-2.50) 높게 나타났다. 요코티닌 수준과 치주질환 위험 증가에 대한 용량-반응관계가 나타났다. 본 연구결과 간접흡연자에서 요코티닌 수준이 증가할수록 치주질환 위험이 증가하는 것으로 나타났다. 향후 간접흡연에 대한 노출을 감소시키기 위해 흡연자의 자발적인 금연참여를 권장하여야 할 것이다.
A simple, specific, and economical LC-MS/MS method was investigated for the screening of 43 prescribed antihypertensive and related drugs in human urine. The urine samples were simply prepared by diluting and mixing with internal standard before directly introduced to the LC-MS/MS system, which is fast, straightforward, and cost-effective. Fractional factorial, Box-Behnken, and I-optimal design were applied to screen and optimize the mass spectrometric and chromatographic factors. The analysis was carried out on a triple quadrupole mass spectrometer system utilizing multiple reaction monitoring with positive and negative electrospray ionization method. Chromatographic separation was performed on a Thermo Scientific Accucore RP-MS column (50 × 3.0 mm ID., 2.6 ㎛) using two separate gradient elution programs established with the same mobile phases. Chromatographic separation was performed within 12 min. The optimal method was validated based on FDA guideline. The results indicated that the assay was specific, reproducible, and sensitive with the limit of detection from 0.1 to 50.0 ㎍/L. The method was linear for all analytes with coefficient of determination ranging from 0.9870 to 0.9981. The intra-assay precision was from 1.44 to 19.87% and the inter-assay precision was between 2.69 and 18.54% with the recovery rate ranges from 84.54 to 119.78% for all drugs measured. All analytes in urine samples were stable for 24 h at 25℃, and for 2 weeks at -60℃. The developed method improves on currently existing methods by including larger number of cardiovascular medications and better sensitivity of 12 analytes.
Cho, Kyung Lae;Kim, Yeo Jin;Yang, Song Hyun;Kim, Gu-Hwan;Lee, Jun Hwa
Clinical and Experimental Pediatrics
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제59권sup1호
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pp.41-44
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2016
We report here a case of maternal 3-methylcrotonyl-coenzyme A carboxylase (3-MCC) deficiency in a Korean woman. Her 2 infants had elevated 3-hydroxyisovalerylcarnitine (C5-OH) on a neonatal screening test by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS), but normal results were found on urine organic acid analysis. The patient was subjected to serial testing and we confirmed a maternal 3-MCC deficiency by blood spot and breast milk spot test by LC-MS/MS, serum amino acid analysis, urine organic acid and molecular genetic analysis that found c.838G>T (p.Asp280Tyr) homozygous mutation within exon 9 of the MCCB gene. Especially, we confirmed marked higher levels of C5-OH on breast milk spot by LC-MS/MS, in the case of maternal 3-MCC deficiency vs. controls.
Mitochondrial disease is a group of disorders caused by dysfunctional mitochondria, the organelles that generate energy for the cell. Diagnosis of mitochondrial disease is difficult, subtle, and has many problems. It is more likely to miss the diagnosis of mitochondrial disease, especially in borderline cases where the symptoms of the disease are not severe. In this regard, urine organic acid analysis is noninvasive and can increase the sensitivity and specificity through repeated load test with few changes according to the specimen. And, It is considered to be suitable as a screening test for mitochondrial diseases because it has a great advantage of distinguishing from organic aciduria, urea cycle disorder and fatty acid oxidation disorder which may have similar symptoms. The purpose of this study was to investigate the clinical features and age distribution of mitochondrial diseases diagnosed by organic acid analysis and to establish the policy of diagnosis and treatment based on this study.
Park, Kyung-Su;Kim, Sun-Tae;Kim, Young-Man;Kim, Yun-je;Lee, Won
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제24권3호
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pp.285-290
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2003
An analytical method for the simultaneous determination of trace Ge, As and Se in biological samples by inductively coupled plasma/mass spectrometry has been investigated. The effects of added organic gas into the coolant argon gas on the analyte signal were studied to improve the detection limit, accuracy and precision. The addition of a small amount of methane (10 mL/min.) into the coolant gas channel improved the ionization of Ge, As and Se. The analytical sensitivity of the proposed Ar/CH₄system was superior by at least two-fold to that of the conventional Ar method. In the present method, the detection limits obtained for Ge, As and Se were 0.014, 0.012 and 0.064 ㎍/L, respectively. The analytical reliability of the proposed method was evaluated by analyzing the certified standard reference materials (SRM). Recoveries of 99.9% for Ge, 103% for As, 96.5% for Se were obtained for NIST SRM of freeze dried urine sample. The proposed method was also applied to the biological samples.
Natural human epidermal growth factor (nhEGF) was purified from pregnant human urine by benzoic acid adsorption, DEAE-Sepharose ion exchange, and immunoaffinity chromatography. The purified nhEGF was further separated into four fractions using Bondapak C$_{18}$ HPLC system. Following characterization by Western blot analysis and double immu- nodiffusion, we found that each fraction corresponds to four derivatives of the nhEGF. For biological analysis of nhEGF, we optimized the labeling time and serum concentration for the incorporatioin of 5-bromo-2'-deoxy uridine (BrdU), a non-radioactive alternative for [$^{3}$H]-thymidine uptake, into NIH 3T3 cells. The DNA synthesis of NIH 3T3 cells was gradually increased at the nhEGF concentrations between 0.1 - 10 ng/ml in the Dulbecco's Modified Eagles Medium (DMEM) containing 0.2% Fetal calf serum (FCS). When we assayed the biological activity of four fractions, the activity of the second fraction was superior to that of the others. Based on the results from the HPLC analysis spiked with recombinant human epidermal growth factor (rhEGF) and amino acid sequencing, we concluded that the second fraction was nhEGF and the other three fractions were the derivatives of nhEGF. In addition, the proportion of nhEGF was approximately 46% is compared with that of the other three derivatives.
Objectives: This study was conducted to examine blood pressure and other characteristics of a high sodium intake group assessed with 24-hr urine analysis and the dietary factors related to the risk of high sodium intake among Korean adults. Methods: A cross-sectional study was conducted with adults aged 20-59 years. Subjects who completed 24-hr urine collection (N = 205) were divided into 3 groups (tertile) according to the sodium intake estimated with 24-hour urine analysis. We compared the blood pressure, BMI and dietary related factors of the 3 groups (low, medium, high sodium intake group) with General Linear Model (GLM) and Duncan's multiple range test (p < 0.05). The risk factors related to high sodium intake were assessed with odds ratio (p < 0.05). Results: The sodium intake (mg/day) of the 3 groups were $3359.8{\pm}627.9$, $4900.3{\pm}395.1$ and $6770.6{\pm}873.9$, respectively, corresponding to daily salt intake (g/day) 8.5, 12.4 and 17.2, respectively. High sodium group showed significantly elevated age, BMI and systolic/diastolic blood pressure. Being male gender was associated with significantly increased risk of sodium intake (OR = 1.972; 95%CI: 1.083-3.593). The other factors related to high sodium intake were higher BMI (${\leq}25$) (OR = 2.619; 95% CI: 1.368-5.015), current alcohol consumption (OR = 1.943; 95%CI: 1.060-3.564), and having salty soybean paste with salt percentage > 14% (OR = 3.99; 95% CI: 1.404-6.841). The dietary attitude related to increased risk of high sodium intake included 'enjoy dried fish and salted mackerel' (p < 0.001) and 'eat all broth of soup, stew or noodle' (p < 0.001). Conclusions: Because high sodium intake was associated with higher blood pressure, nutrition education should focus on alcohol consumption, emphasis on related dietary factors such as using low salt soybean paste, improvements in the habit of eating dried fish and salted mackerel or eating all broth of soup, stew or noodle.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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