Phellinus linteus was artificially cultivated in kangwon province in Korea. The air-dried phellinus linteus was frozen in liquid nitrogen tank and powdered in jar. 10g of the powder was extracted with each 200g of ethanol, methanol, distilled water and 1,3-butylene glycol/distilled water 4 hours under refluxing and then the liquidextract was concentrated under reduced pressure. As a result of analysis by high performance liquid chromatography and thin layer chromarography, many kinds of sugar and flavonoids were detected. Also we knew that phellinus linteus' extract had a strong UV-ray absorption. In the efficacy test for applying to cosmetics, free radical scavenging effect was confirmed. As a result, 2% of sample was the most potent inhibitory effect and the free radical savenging activity, was 0.31%. This is more effective than any other meterial. In the test of antioxidative activity against lipid autoxidation, phellinus linteus' extract had a good effect by 46% while vitamine E was 42.3%. The immunological activity of phellinus linteus was showed through the activation of macrophage cell. Actually, phellinus linteus activated macrophage function of 1.1-1.8 times including nitrite production compared to control. The whitening effect of phellinus linteus was showed through the inhibition of tyrosinase activity, melanin biosynthesis of S. bikiniensis and B-16 melanoma cells. Phellinus linteus' extract was showed strong mushroom tyrosinase inhibitory activity with IC50 value of 0.5% and inhibited melanin biosynthesis with 28mm inhibition zone at 0.005%/paper disc in S. bikinniensis, a bacterium used as an indicator organism in this work. Also it inhibited melanin biosynthesis in B-16 melanoma cells with a minimum inhibitory concentration of 0.134%.
Ding, Yuling;Kim, So Hui;Lee, Jeong Jun;Hong, Jin Tae;Kim, Eun-A;Kang, Do-Hyung;Heo, Soo-Jin;Lee, Seung-Hong
ALGAE
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제34권2호
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pp.177-185
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2019
Ecklonia cava is popular in Korea as a marine functional materials. E. cava is generally collected and used on the coast of Jeju Island. However, the continuous use of collected natural E. cava may be limited because difficult to secure throughout the year and may be exposed to environmental pollution. Jeju magma seawater (MSW) was known to be significant advantages such as safety, cleanness, stability, and functional improvement. Attempts have been reported on application of MSW to the culturing of macro- and microalgae and showed improved results. Thus, the objective of the present study was to explore the anti-melanogenesis activity of brown seaweed E. cava (E. cava cultured with MSW [MSWE]) extract cultured in tanks with MSW of Jeju Island to evaluate the possibility of cosmeceutical industrial application. MSWE extract showed the higher polyphenolic and dieckol contents than natural E. cava (NE) extract. Anti-melanogenesis activity of MSWE extract and NE extract are tested and compared using tyrosinase and dihydroxyphenylalanine (DOPA) oxidation inhibition assay. MSWE extracts evidenced more effective tyrosinase and DOPA oxidation inhibition activity than that of the NE extracts and the commercial whitening agent, arbutin. MSWE extracts also markedly inhibited melanin synthesis and decreased the expression of melanogenesis-related protein in ${\alpha}$-melanocyte stimulating hormone-stimulated B16F10 melanoma cells without cytotoxicity. These results suggest that MSW cultivation process would be more effective in releasing bioactive compounds with whitening effect from seaweed such as E. cava at an industrial scale.
새로운 기능성 소재를 탐색하기 위하여, 13종의 식용 및 약용식물의 종자추출물을 조제하여 생리활성물질 함량, 항산화활성 그리고 tyrosinase 억제활성을 분석하였다. 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량은 주목에서 각각 $57.51mg{\cdot}g^{-1}$과 $7.98mg{\cdot}g^{-1}$으로 가장 높게 나타났다. 종자추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성은 머루$\times$'캠벨얼리' 교배종에서 $RC_{50}$이 $0.03mg{\cdot}ml^{-1}$로 가장 높았고, ABTS 라디칼 소거활성은 고음나무 종자에서 $RC_{50}$이 $0.109mg{\cdot}ml^{-1}$로 가장 높게 나타났다. Ferric thiocyanate(FTC) 방법으로 linoleic acid에 대한 과산화 억제효과를 조사한 결과, 감나무, 고욤나무, 당후박나무, 쪽동백나무, 머루, 머루$\times$'캠벨얼리' 교배종, 묏대추나무, 대추나무의 종자추출물에서 BHT와 유사한 수준의 억제활성을 보였다. 종자추출물의 tyrosinase 억제활성은 감나무, 고욤나무, 탱자나무, 벚나무, 묏대추나무, 대추나무에서만 나타났으며, 특히 고음나무에서 가장 높았다.
순비기나무(Vitex rotundifolia)의 줄기를 새로운 천연 항산화제나 생리활성 재료로 이용하기 위하여 한류 물 추출물(WE)과 에탄을 추출물(EE) 그리고 열수 추출물(HWE)에 대하여 총 폴리페놀 함량과 전자공여능, SOD 유사활성능, 아질산염 소거능 및 xanthine oxidase와 tyrosinase 저해 활성을 측정하였다. 총 폴리페놀의 함량을 측정한 결과 122.01 mg/g${\sim}$176.34 mg/g으로 EE에서 가장 많은 폴리페놀을 함유하였다. 전자공여능은 1.0 mg/mL의 농도에서 93.46${\sim}$96.92%로 EE가 가장 높았으며 0.1 mg/mL에서도 90% 이상이었으며, SOD 유사활성능은 WE가 47.32%로 가장 높은 활성을 나타내었다. 아질산염 소거능은 pH 1.2의 조건에서 세가지 추출물이 84.61${\sim}$88.36%였으며 pH 3.0에서는 25.83${\sim}$30.24%였다. Xanthine oxidase 저해 활성을 측정한 결과 0.5 mg/mL의 농도에서 세 가지 추출물 모두 90% 이상이었으며, 1.0 mg/mL에서도 91.02${\sim}$97.51%로 EE 추출물이 가장 높은 저해 활성을 나타내었다. 미백효과와 관련이 있는 tyrosinase 저해 활성을 측정한 결과 HWE와 WE는 57.84%와 53.47%를 나타내어 EE(28.79%)보다 높은 저해 효과가 나타났다. 따라서 순비기나무 줄기 추출물은 다량의 폴리페놀을 함유하며 항산화 활성과 xanthine oxidase 및 tyrosinase 저해 활성이 우수하므로 천연 항산화제나 미백 및 기능성 식품소재로써 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
꾸지뽕나무(Cudrania tricuspidata(Carr.) Bureau) 뿌리껍질에서 3종의 xanthones 화합물을 분리하였으며, 분광학적인 자료를 바탕으로 cudraxanthone L (1), cudraxanthone D (2), 그리고 cudraxanthone M (3)으로 구조동정되었다. 분리된 화합물을 L-tyrosine이 기질로 작용할 때 tyrosinase 저해 활성을 측정한 결과 cudraxanthone M (3)의 $IC_{50}$ 값이 $16.5{\mu}M$로 가장 높은 저해 효능을 보였으며, kinetic type은 uncompetitive inhibition로 저해 상수($K_i$)는 $1.6{\mu}M$로 측정되었다. 또한 이 화합물은 $20{\mu}M$의 농도에서 lag time이 310초로 측정 되어 대조화합물인 kojic acid와 유사한 저해능을 나타내었다.
The EtOAc fraction of Lespedeza cyrtobotrya showed mushroom tyrosinase inhibitory and radical scavenging activities. Four active compounds were isolated based on Sephadex LH-20 chromatography and HPLC, and the structures were elucidated, on the basis of their LC-MS and NMR spectral data, as 2-(2,4-dihydroxyphenyl)-6-hydroxybenzofuran (1), eriodictyol-7-O-glucopyranoside (2), haginin A (3), and dalbergioidin (4), respectively. Compound (1) showed mushroom tyrosinase inhibitory activity with an $IC_{50}$ value of $5.2\;{\mu}M$ and acted as a competitive inhibitor. Furthermore, $37.3\;{\mu}M$ of compound 1 reduced 50% of the melanin content on human melanoma (MNT-1) cells. The radical scavenging activities of compounds 1, 2, 3, and 4 were shown to have $IC_{50}$ values of 11.0, 24.5, 9.0, and $36.5\;{\mu}M$, respectively, in an ABTS system and $IC_{50}$ values of 42.7, 36.0, 37.7, and $61.7\;{\mu}M$, respectively, in a DPPH system. The mushroom tyrosinase inhibitory activity of the EtOAc fraction of Lespedeza cyrtobotrya was contributed by compounds 1, 3, and 4, and its radical scavenging activity was contributed by compounds 1-4.
본 연구에서는 80% 식물성 알코올을 추출 용매로 사용해 오디를 빛을 차단 후 실온에서 3일 간 추출하였다. 3회 여과한 후 최소 온도($40{\sim}60^{\circ}C$)에서 농축한 뒤 동결 건조하여 파우더 형태로 사용하였다. 오디(Morus alba)의 에탄올 추출물은 B16/F10 세포의 항산화 및 멜라닌 합성 억제 효과를 나타내었다. 멜라닌 함량과 세포 내 tyrosinase 활성을 Western blotting으로 측정 하였다. Tyrosinase와 tyrosinase-related protein (TRP) -1은 tyrosinase-related protein (TRP) -2보다 강력하게 억제되었으며, 이들 결과는 tyrosinase와 TRP-1은 흑갈색을 띠는 eumelanin의 생합성의 억제와 강한 상관관계가 있음을 보여 주었다. ${\alpha}$-melanocyte-stimulating hormone (${\alpha}$-MSH) 처리 한 B16/F10 흑색 종 세포에서 M. alba 에탄올 추출물은 멜라닌 생성 연관 단백질의 발현 및 멜라닌 생성이 용량 의존적으로 억제 하였다. 멜라닌 함량과 세포 내 tyrosinase 활성을 Western blotting으로 측정 하였다. 또한 DPPH와 SOD를 사용하여 항산화 활성을 분석하였고 총 폴리 페놀과 총 플라보노이드 함량을 측정 하였다. MTT assay 분석을 사용하여 M. alba 에탄올 추출물의 세포 독성을 측정 하였다. B16/F10 멜라닌 생성 세포의 tyrosinase 저해 활성 및 사멸 효과가 일반적으로 효과적이었다. 따라서 M. alba 에탄올 추출물은 항산화 및 미백 효과를 나타내며, 기능성 화장품의 천연 성분으로서 우수한 것으로 여겨진다.
Melanogenesis is induced mainly by ultraviolet radiation of sunlight and ${\alpha}-melanocyte$-stimulating hormone (${\alpha}-MSH$) which binds to a specific G protein coupled receptor. The purpose of this study was to investigate the mechanism of melanogenesis inhibition in B16/F10 cells by methanol extract of Rubus coreanus Miquel (RCM). In the present study, ${\alpha}-MSH$ and forskolin led to a stimulation of melanin synthesis that appeared to result from an increased tyrosinase activity and melanin content. However, RCM inhibited the ${\alpha}-MSH$- and forskolin-induced melanin synthesis. In addition, RCM abolished the ${\alpha}-MSH$- and forskolin-induced cytoplasmic dendricity. Regarding protein levels of the melanogenic enzymes, the amounts of tyrosinase and tyrosinase-related protein 1 (TRP-1) were increased after incubation with α-MSH and forskolin. The treatment of RCM decreased the ${\alpha}-MSH$- and forskolin-induced expression levels of tyrosinase and TRP-1. Based on these findings, it is likely that RCM exerts its depigmenting effects in B16/F10 cells through the suppression of tyrosinase and TRP-1 expression, which are key enzymes for melanogenesis.
Objectives : The purpose of this study is to isolate tyrosinase inhibitory material from Pinellia ternata and characterize its own structure and activity. Methods : Pinellia ternata (600g) was extracted with 95% methanol (1L) at $37^{\circ}C$ for 4 days, with shaking at 250rpm. The extract was further solvent-fractionated with n-hexane, chloroform, ethylacetate and water. The active fraction was subjected to JAI recycling prep-HPLC JAIGEL GS-320 column. The structure was identified for the active peak with NMR and GC. Results : Tyrosinase was potently inhibited by 95% methanol extracts from Pinellia ternata. The $IC_{50}$ value of the extracts was estimated to be 0.05mg/ml. The extracts was divided into four solvent-fractions, and the most potent tyrosinase inhibition was found in ethylacetate layer. $IC_{50}$ value of ethylacetate fraction was 0.001mg/ml. This fraction was further purified with JAI Recycling Preparative HPLC (Model: LC 9104). The isolated compound showing inhibitory activity was characterized on its chemical structure by NMR and the compound was identified as 3,4-dihydroxybenzaldehyde. $IC_{50}$ was found to be 7.74 ${\mu}M$ which is much lower than that of kojic acid $(66.5{\mu}M)$. Conclusions : The data suggest that 3,4-dihydroxybenzaldehyde isolated and identified from Pinellia ternata is very strong inhibitor to melanin biosynthesis.
The aqueous extract from Asiasari radix (AEAR) was used to investigate the effect of ${\alpha}$-melanocyte stimulating hormone induced melanogenesis in B16F10 mouse melnoma cells. The treatment with AEAR at the 1.0 and 2.0 mg/ml level significantly inhibited the biosynthesis of melanin without changes of cell growth and morphology compared with untreated control. The AEAR-treated cells at the 2.0 mg/ml level were more efficient than commercial arbutin at 0.1 mg/ml. The tyrosinase activity also significantly decreased in AEAR-treated cells at the 1.0 and 2.0 mg/ml level. The Western analyses confirmed the slightly decreased expression of tyrosinase by AEAR treatment. These results indicate that AEAR may contribute to the inhibition of melanin biosynthesis through regulating tyrosinase activity and expression and serve as a new candidate in the design of new skin-whitening or therapeutic agents.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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