Radical scavenging activity of water and methanol extracts of mulberry juice and cake prepared from mulberry fruit (Morus spp.) was evaluated using three in vitro assay systems. Mulberry fruits were homogenized with $0.5\%$ trifluoroacetic acid (TFA) in distilled water, filtered with cheeze-cloth and centrifuged to yield mulberry juice and cake. Mulberry juice was evaporated and solubilized in $0.5\%$ TFA in distilled water or $0.5\%$ TFA in $80\%$ aqueous methanol, followed by filtration and evaporation to obtain water (WMJ) and methanol (MMJ) extracts of mulberry juice. Mulberrry cake also was extracted with the above same solvents, and thereby finally obtaining water (WMC) and methanol (MMC) extracts of mulberry cake. Among four extracts, the MMC showed the most potent radical scavenging activity against DPPH radical $(IC_{50}=167.45\;{\mu}g/mL)$, and superoxide $(IC_{50}=36.18\;{\mu}g/mL)$ and hydroxyl radicals $(IC_{50}=467.08\;{\mu}g/mL)$. The WMC also exhibited stronger radical scavenging activity than those of two other mulberry juice extract, WMJ and MMJ. Meanwhile, the MMJ exerted stronger three radical scavenging activity than the WMJ. Total phenolic content of the water and MeOH extracts from mulberry cake was higher than that of the water and MeOH extracts from mulberry juice. Thus, these results suggest that the extracts of mulberry cake with high dietary phenolics may be useful potential source of natural antioxidant as radical scavenger.
The present study investigated the effects of Vaccinium uliginosum L. (bilberry) on the learning and memory impairments induced by amyloid-${\beta}$ protein ($A{\beta}P$) 1-42. ICR Swiss mice were divided into 4 groups: the control ($A{\beta}40$-1A), control with 5% bilberry group ($A{\beta}40$-1B), amyloid ${\beta}$ protein 1-42 treated group ($A{\beta}1$-42A), and $A{\beta}1$-42 with 5% bilberry group ($A{\beta}1$-42B). The control was treated with amyloid ${\beta}$-protein 40-1 for placebo effect, and Alzheimer's disease (AD) group was treated with amyloid ${\beta}$-protein 1-42. Amyloid ${\beta}$-protein 1-42 was intracerebroventricular (ICV) micro injected into the hippocampus in 35% acetonitrile and 0.1% trifluoroacetic acid. Although bilberry added groups tended to decrease the finding time of hidden platform, no statistical significance was found. On the other hand, escape latencies of $A{\beta}P$ injected mice were extended compared to that of $A{\beta}40$-1. In the Probe test, bilberry added $A{\beta}1$-42B group showed a significant (P<0.05) increase of probe crossing frequency compared to $A{\beta}1$-42A. Administration of amyloid protein ($A{\beta}1$-42) decreased working memory compared to $A{\beta}40$-1 control group. In passive avoidance test, bilberry significantly (P<0.05) increased the time of staying in the lighted area compared to AD control. The results suggest that bilberry may help to improve memory and learning capability in chemically induced Alzheimer's disease in experimental animal models.
An accurate and sensitive analysis method was established for simultaneous determination of three bioactive compounds (glycyrrhizin, 6-gingerol and ginsenoside Rg3) in the Ejung Tang with high-performance liquid chromatography (HPLC)-photodiode array detection (DAD)-electrospray ionization (ESI)-Mass spectrometry (MS). The optimizing chromatographic separations a were acquired by an $C_{18}$ column ($5{\mu}m$, $4.6I.D{\times}250mm$, SHISHEDO) using gradient elution with water comprising 0.1% TFA(trifluoroacetic acid) and acetonitrile at a performing temperature of $35^{\circ}C$. Flow rate was 1.0 ml/min. A detection UV wavelength set at 205 nm and 250 nm. The three compounds were identified by electrospray ionization mass spectrometry. All calibration curves indicated great linear regression within test ranges ($R^2>0.9997$). The established method provided acceptable precision and accuracy. The relative standard deviations (RSDs) of intra-day and inter-day were less than 2.00% and 3.00%, respectively. The recoveries were found to range from 94.49 to 101.10% for the three compounds analyzed. These results showed that this method was effective and reliable for quality control of Eiung-Tang.
High critical current density. $J_c$ over $1MA/cm^2$ at 77 K in a self field was successfully achieved from the YBCO film prepared on (100) $SrTiO_3$ single-crystal substrates by the TFA-MOD process. Unlike a normal TFA-MOD process, we prepared the TFA precursor solution by dissolving YBCO powder into the trifluoroacetic acid. A significant amount of the second phases, including $BaF_2$, was observed in the films fired at $700-725^{\circ}C$ for 2 h under $P(O_2)=10^{-3}$ atm and $P(H_2O)=4.2%$, most probably due to an insufficient reaction time, and hence $T_c$ was greatly degraded. However the films fired at $750-800^{\circ}C$ for 2 h were composed of strongly c-axis oriented YBCO grams without any second phases. and exhibited the $T_c$ values of 89.5 ~ 91 K with a sharp transition. With increasing the firing temperature from 750 to $800^{\circ}C$ average grain size of YBCO was increased and grain connectivity was enhanced. The highest $J_c$ value of $1.1MA/cm^2$ was obtained from the YBCO film fired at $800^{\circ}C$.
This study presents a sensitive and reliable method for determining tetracycline (TC), oxytetracycline (OTC), and chlortetracycline (CTC) residues in shrimp samples. A two-step process involving liquid-liquid extraction (LLE) followed by solid-phase extraction (SPE) was developed prior to HPLC analysis. The target analytes were effectively extracted using EDTA/McIlvaine buffer (pH 4.0): methanol (80:20, %v/v), with subsequent clean-up using a C18 SPE cartridge. HPLC separation was conducted on a C18 column (250 mm × 4.6 mm i.d., 5 ㎛) at 30 ℃, using 0.01 % trifluoroacetic acid (A) and acetonitrile (B) as the mobile phase. A gradient elution protocol was applied, transitioning from 85(A):15(B) %v/v to 70(A):30(B) %v/v at 7 min, with a 5 min hold, followed by adjustment to 85(A):15(B) %v/v for 13-14 min. The detection was performed using photodiode array (PDA) at 365 nm with a flow rate of 1.0 mL/min. The calibration curves exhibited good linearity within a concentration range of 0.4-6.0 ㎍/mL (R2 > 0.995). The limits of detection (LOD) for TC, OTC, and CTC in shrimp were 0.034, 0.029, and 0.021 ㎍/mL, respectively. The limits of quantitation (LOQ) for TC, OTC, and CTC were found to be 0.114, 0.097, and 0.071 ㎍/mL, respectively. Recoveries of TC, OTC, and CTC from spiked shrimp samples ranged from 91.0 % to 95.5 %, 92.4 % to 97.2 %, and 93.3 % to 96.6 %, respectively. This method was successfully applied to the determination of TC, OTC, and CTC residues in shrimp samples sourced from various local markets.
Kwon, Jin Gwan;Kim, Jin Kyu;Seo, Changon;Hong, Seong Su;Ahn, Eun-Kyung;Seo, Dong-Wan;Oh, Joa Sub
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.45
no.1
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pp.61-67
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2016
An HPLC analysis method was developed for standard determinations of chlorogenic acid, 3,4-di-O-caffeoylquinic acid, 3,5-di-O-caffeoylquinic acid, and 4,5-di-O-caffeoylquinic acid as functional health materials in Ligularia fischeri extract. HPLC was performed on a $C_{18}$ Kromasil column ($4.6{\times}250mm$, $5{\mu}m$ column) with a gradient elution of 0.1% (v/v) trifluoroacetic acid and acetonitrile at a flow rate of 1.0 mL/min at $30^{\circ}C$. The analytes were detected at 330 nm. The HPLC method was validated in accordance with the International Conference on Harmonization guideline of analytical procedures with respect to specificity, precision, accuracy, and linearity. The limits of detection and quantitation for the four compounds were 3.0~14.6 and $9.2{\sim}44.4{\mu}g/mL$, respectively. Calibration curves showed good linearity ($r^2$ > 0.999), and the precision of analysis was satisfied (less than 0.9%). Recoveries of quantified compounds ranged from 98.96 to 101.81%. This result indicates that the established HPLC method is very useful for the determination of marker compounds in Ligularia fischeri leaf extracts.
Lysozymes are innate immune factors that play a critical role in the defense against pathogens in various invertebrate animals including spoon worms. In this study, an invertebrate-type lysozyme was isolated from the body wall of spoon worm, Urechis unicinctus. The acidified body wall extract was partially separated using a Sep-Pak C18 cartridge. Among the fractions, the materials that were eluted with 60% methanol/0.1% trifluoroacetic acid showed the most potent antimicrobial activity against Bacillus subtilis KCTC 1021. A series of high performance liquid chromatography (HPLC) steps were then utilized to isolate a single antimicrobial absorbance peak. The molecular weight of the antimicrobial peak was approximated using sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), which was approximately 13 to 14 kDa. The partial primary structure of this antimicrobial protein that was analyzed, using LC-MS/MS, was CTGGRPPTCEDYAK (1611.69 Da). Homology search of these fourteen residues, using the National Center for Biotechnology Information Basic Local Alignment Search Tool (NCBI BLAST), revealed that the isolated protein was similar to the invertebrate-type lysozymes described in other animals. Then, the antimicrobial and lysozyme enzymatic (muramidase) activities of this protein were assessed. The isolated protein possessed antimicrobial activity and potent muramidase activity, which were comparable to those of hen egg white lysozyme. Therefore, the isolated protein was designated as Urechis unicinctus invertebrate-type lysozyme from the body wall, Uu-iLysb.
Kwon, Jin Gwan;Seo, Changon;Choi, Yun-Hyeok;Choi, Chun Whan;Kim, Jin Kyu;Jeong, Wonsik;Lee, Ji Eun;O, Kyeong Hee;Hong, Seong Su
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.46
no.8
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pp.952-956
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2017
An high performance liquid chromatography (HPLC) analysis method was developed for standard determination of coixol as a functional cosmetic material in Coix lachryma-jobi var. ma-yuen roots extract. HPLC was performed on a $C_{18}$ Unison US column ($4.6{\times}250mm$, $5{\mu}m$ column) using a gradient elution of 0.1% (v/v) trifluoroacetic acid and acetonitrile at a flow rate of 1.0 mL/min at $30^{\circ}C$. The analyte was detected at 290 nm. The HPLC method was validated in accordance with the International Conference on Harmonization guideline of analytical procedures with respect to specificity, precision, accuracy, and linearity. The limit of detection and quantitation were 0.07 and 0.25 mg/mL, respectively. Calibration curves showed good linearity ($R^2$>0.9995), and the precision of analysis was satisfied (less than 0.29%). Recoveries of quantified compounds ranged from 98.36 to 100.30%. This result indicates that the established HPLC method is very useful for the determination of a marker compound in C. lachryma-jobi var. ma-yuen roots extracts.
YBCO film was synthesized by using a new approach to the TFA-MOD method. In the fabrication process, $Y_2Ba_1Cu_1O_x\;and\;Ba_3Cu_5O_8$ powders were used as precursors (the so called '211 process'), instead of Y-, Ba-, and Cu-based acetates, and dissolved in trifluoroacetic acid followed by calcining and firing heat treatment. Consequently, we successfully fabricated YBCO film and evaluated the phase formation, texture evolution, and critical properties as a function of the calcining and firing temperature and humidity, in order to explore its possible application in coated conductor fabrication. The films were calcined at $430-460^{\circ}C$ and then fired at $750-800^{\circ}C\;in\;a\;0-20\%$ humidified $Ar-O_2$ atmosphere. We observed that $BaF_2$ phase was effectively reduced and that a sharp and strong biaxial texture formed under humidified atmosphere leading to increased critical properties. In addition, we found that the microstructure varied significantly with the firing temperature: the grain grew further, the film became denser, and the degree of texture and phase purity varied as the firing temperature increased. For the film fired at $775^{\circ}C$ after calcining at $460^{\circ}C$, the critical current was obtained to be 39 A/cm-width (corresponding critical current density is $2.0\;MA/cm^2$ which was probably attributed to such factors as the enhanced phase purity and out-of-plane texture, the moderate film density and grain size, and crack-free surface.
The ${\alpha}_{s1}$-and ${\beta}$-casein were purified by DEAE-cellulose chromatography and digested with alkaline protease from Bacillus subtilis. Bitter fractions from the hydrolyzates were isolated using n-butanol extraction, Sephadex G-25 gel chromatography, and high performance liquid chromatography. Peptide mixtures were separated by reverse-phase octadecyl silica column with linear gradient of 0-80% acetonitrile containing 0.1% trifluoroacetic acid. Major peaks were combined from replicate chromatographies and the bitterness of each peak was evaluated. The bitter-tasting peaks were rechromatograpied until isolated peaks were obtained. Three different bitter peptides(BP-I, BP-II, BP-III) were obtained from the ${\alpha}_{s1}$-casein hydrolyzate. BP-I was eluted at 34% acetonitrile and BP-II, 35%, BP-III, 26%, respectively. Two bitter peptides(BP-IV, BP-V) were isolated from the ${\beta}-casein$ hydrolyzate: BP-IV was eluted at 40% acetonitrile and BP-V, 42%. BP-V was the most hydrophobic peptide in the five bitter peptides. However, BP-I and BP-II tasted more bitter than BP-IV and BP-V.
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