Among the organic sources of nitrogen tested, yeast extract and soytone were excellent for the mycelial growth of Tricholoma matsutake DGUM 26001. The mycelial growth was enhanced, when yeast extract at the concentration up to 1.0% was added to the starchpyridoxine medium. After 30-day cultivation of the mycelia at $24^{\circ}C$ in the medium supplemented with yeast extract, 518 mg/50 ml of dry mycelia could be harvested.
Tricholoma matsutake has been the most valuable ectomycorrhizal fungi in Asia because of its unique flavor and taste. However, due to the difficulty of artificial cultivation, the cultivation of T. matsutake has relied on natural growth in forests. To cultivate the T. matsutake artificially, microorganisms in fairy rings were introduced. In this study, we isolated 30 fungal species of microfungi from the soil of fairy rings. Among them, one single fungal strain showed a promoting effect on the growth of T. matsutake. The growth effect was confirmed by measuring the growth area of T. matsutake and enzyme activities including a-amylase, cellulase, and b-glucosidase. In comparison with control, microfungal metabolite increased the growth area of T. matsutake by 213% and the enzyme activity of T. matsutake by 110-200%. The isolated fungal strain was identified as Penicillium citreonigrum by BLAST on the NCBI database. The Discovery of this microfungal strain is expected to contribute to artificial cultivation of T. matsutake.
Kang, Jung-A;Ka, Kang-Hyeon;Kim, Jun Young;Kim, Seong Hwan
The Korean Journal of Mycology
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v.46
no.3
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pp.271-280
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2018
The ectomycorrhizal basidiomycete Tricholoma is one of mushroom groups that cannot be cultivated artificially. To use this mushroom as applicable resource for food production, it is necessary to obtain information about their mycelial growth properties in various environmental conditions. This study investigated the mycelial growth of four domestic isolates of Tricholoma species (T. bakamatsutake, T. fulvocastaneum, T. matsutake, T. terreum) at different physical and chemical conditions. The optimal physical conditions for their mycelia growth were found to be a temperature range of $20{\sim}25^{\circ}C$ and a pH range of 4.0~7.0 in dark condition. The growth of T. matsutake was retarded at high temperature ($30^{\circ}C$). Tests to determine the chemical factors that affected mycelial growth showed that the four Tricholoma spp. grew 1% saline. T. matsutake grew in up to 2% saline. In the presence of various heavy metals (50 ppm) and pesticides (suppliers' recommended concentration), mycelial growth was inhibited the most by cadmium and emamectin benzoate, respectively. However, all the four Tricholoma spp. grew with $Cu^+$. The growth of T. matsutake was not inhibited by abamectin, acetamiprid, and thiacloprid. Extracellular enzyme activities of amylase and ${\beta}$-glucosidase were detected only in T. bakamatsutake and T. fulvocastaneum. The results of the present study allowed us to determine suitable or harmful environmental conditions for the mycelial cultivation of the Tricholoma spp.
The purpose of this paper was to ensure the basis for effective management of Tricholoma matsutake mountain province, to perform biotope mapping of Pinus densiflora based on growth environment of Tricholoma matsutake, target a cluster of Yangyang-gun, Kang Won-do. Study Methods were to review on growth and environmental characteristics of Tricholoma matsutake through internal and external documents and to identify vegetational structure and soil characteristics. This paper studied growth structure and soil environment of Pinus densiflora forest where a farm of production area for Tricholoma matsutake of in order to set the standard of Pinus densiflora biotope. Mapping standards were derived by separating of landform conditions, soil conditions, vegetation conditions. Biotope types were divided into possible production area for Tricholoma matsutake and potential production area for Tricholoma matsutake, possible production area for Tricholoma matsutake were Pinus densiflora biotope in landform and soil structure that enables Tricholoma matsutake production and Single-layered Pinus densiflora biotope of less than 30cm(DBH)-Tree species that other shrub is dominant in shrub layer, Multi-layered Pinus densiflora biotope that Pinus densiflora forest was predominant in understrory layer. Potential production area for Tricholoma matsutake were single-layered Pinus densiflora biotope of more than 30cm(DBH) in landform that enables Tricholoma matsutake production, Pinus densiflora biotope with Quercus predominant in the understrory layer, single-layered Pinus densiflora biotope with Quercus predominant in shrub layer, inappropriate vegetation structure area that the induction of production of Tricholoma matsutake was possible through future vegetation management. According to the research results, Pinus densiflora forest were divided into 16 types; 6 types of possible Tricholoma matsutake production areas, 9 potential Tricholoma matsutake production areas and 16 types of areas where Tricholoma matsutake production was impossible. Possible production areas account for 15.48%, or $9.8km^2$ out of the total Pinus densiflora forest while potential production areas take up 32.42%, or $20.52km^2$, and areas where Tricholoma matsutake production was impossible was 52.10%, or $32.97km^2$.
The mycelium was isolated from the fruiting body of Tricholoma matsutake collected from Mt. Namsan, Kyongju and it was named as Tricholoma matsutake DGUM 26001. For the mycelial growth of T. matsutake DGUM 26001, the complex media, yeast-malt extract medium and Czapek-Dox medium supplemented with yeast extract, were excellent. The media such as nutrient glucose medium, mushroom complex medium, and Tricholoma matsutake medium (TMM), were effective. However, There was no a mycelial growth in the media used for bacterial cultivation such as colombia medium, brain heart infusion medium, Luria-Bertani medium supplemented with glucose, and brucella medium. When carbohydrate as a carbon and energy source was supplemented in the TMM medium for the mycelial growth, starch as a polysaccharide was best. As a disaccharide, trehalose and maltose were excellent. Sorbitol, xylitol and glucose were excellent carbon sources of monosaccharose. When the mycelia were cultivated for 30 days at $24^{\circ}C$ in the TMM supplemented with 2.0% starch, the dry weight of the mycelia harvested was 8.85 g/L. When organic acid was given as a carbon source, only succinic acid was utilized. As a vitamin source, coconut water and pyridoxine were excellent. After 30 day-cultivation in the TMM medium, the dry weights with coconut water and pyridoxine were 8.65 and 8.32 g/L, respectively.
Correlation between Songyi(Tricholoma matsutake, pine mushroom, matsutake) production and the annual pine tree growth in Korea was analyzed with 18 years data of the mushroom production in Sangju area and the annual ring-growth of pine trees at Mt Sogni in the area. The two parameters were not significantly related to each other(r=0.408). A possible reason of this low relationship is that September and October climate affected annual Songyi production through mushroom primordial formation, continued growth of the primordia, while May and June climate did the annual tree-ring growth. Songyi production at Mt. Wolak in Chungcheongbukdo peaked while the minimum daily air temperature ranged about $7^{\circ}C$ to $13^{\circ}C$ during the first week of October in 1999. These show that Songyi production variation is not a simple trend depending on the energy the pine trees have accumulated. Rather, controlling soil moisture and air temperature during Songyi fruiting season can be a significant management option for improving the mushroom production.
Two isolates of Tricholoma matsutake T-008 and T-034, preserved in Entomopathogenic Fungal Culture Collection (EFCC) of Korea, were used in the present study. The isolates had 100% Bootstrap homology with Tricholoma matsutake U62964 and T. matsutake AB188557 and AF309538 preserved in Gene Bank of NCBI. Mycelial growth of T. matsutake was highest in TMM and MYA at $25^{\circ}C$. The highest dry wt. of mycelium was obtained after 65 days of culture, when 6 mycelial discs were inoculated in 100 ml of broth in 250 ml shaking flask. Mycelial mats were observed in clumped condition at the inoculation sites of pine forest after two weeks of inoculation. After 5 months of inoculation, mycelia mats were observed growing inside soil and walls of a few inoculation sites, while mycelial mats growth up to $5{\sim}8$ cm were observed in the roots of pine tree after 6 months. The survival rate of the inoculum was about 40% of the total inoculation sites. The survival rate was found below 20% when the mycelium was inoculated in the summer. The reasons for low survival rates of the mycelium were mainly due to dry season and the soil-borne small animals such as earthworm and mole. After one year of inoculation, no external difference was observed between the artificially inoculated mycelia and the naturally existing mycelia of T. matsutake. The present study showed that fruiting bodies of T. matsutake could be produced by artificial inoculation under the appropriate environmental conditions.
Tricholoma matsutake is an ectomycorrhizal fungus that has a symbiotic relationship with the root of Pinus densiflora. Soil microbial communities greatly affect the growth of T. matsutake, however, few studies have examined the characteristics of these communities. In the present study, we analyzed soil fungal communities from Gyeongju and Yeongdeok using metagenomic pyrosequencing to investigate differences in fungal species diversity, richness, and taxonomic composition between the soil under T. matsutake fruiting bodies (Sample 2) and soil where the fairy ring of T. matsutake was no longer present (Sample 1). The same spot was investigated three times at intervals of four months to observe changes in the community. In the samples from Yeongdeok, the number of valid reads was lower than that at Gyeongju. The operational taxonomic units of most Sample 2 groups were less than those of Sample 1 groups, indicating that fungal diversity was low in the T. matsutake-dominant soil. The soil under the T. matsutake fruiting bodies was dominated by more than 51% T. matsutake. From fall to the following spring, the ratio of T. matsutake decreased. Basidiomycota was the dominant phylum in most samples. G-F1-2, G-F2-2, and Y-F1-2 had the genera Tricholoma, Umbelopsis, Oidiodendron, Sagenomella, Cladophialophora, and Phialocephala in common. G-F1-1, G-F2-1, and Y-F1-1 had 10 genera including Umbelopsis and Sagenomella in common. From fall to the following spring, the amount of phyla Basidiomycota and Mucoromycota gradually decreased but that of phylum Ascomycota increased. We suggest that the genus Umbelopsis is positively related to T. matsutake.
This research is to suggest an ecological management methods by classification of biotope type and its mapping for Tricholoma matsutake. The target area was construction site of the East Hongchun - Yangyang Highway (Yangyang section) where massive production of Tricholoma matsutakes is in place. Specifically, the 700 m long range of area around the road route, Yangyang section, which is over a total area of $19,79km^2$. The flow of this research was as follows: first studied were the characteristics of the Yangyang Tricholoma matsutakes; second, reviews on previous studies on Tricholoma matsutakes; third, the formulation of standards and processes of biotope type considering Tricholoma matsutake production; and fourth, mapping of biotope considering the production area of Tricholoma matsutake. In 24.77% of the region, slope angle measured $30{\sim}40^{\circ}C$, which is suitable for Tricholoma matsutake production. Also, 17.44% of the region had southward vegetation structures, and as for the Pinus densiflora; 26.00% had average receipts; the tree ages was $38{\pm}8.34$ years; and the average density of canopy layer was $9.55{\pm}4.89/100m^2$. The soil acidity (pH) values of 5.0 to 5.6(47.96%) > 5.6 to 7.0(42.90%) > 4.0 to 5.0(9.14%) were slightly high for Tricholoma matsutake growth; but 57.10% of the area had a soil pH of 4.0-5.6. The organic horizon (A0 layer) was $3.39{\pm}2.14cm$, and the mean depths were 4-6cm(78.03%) > 0-2cm(18.10%) > 2-4cm(3.87%). Based on the results of previous studies and field researches on the presence of vegetation (the pine dominance ratio), the topographic structure (the terrain characteristics and slopes), the receipt, the soil structure (the soil acidity and the organic layers interposed between the depths), and the vegetation density, six clusters based on the identified types of biotopes are produced in this paper. Area of distribution according to the type of biotope was Tricholoma matsutake of the potential-production (II) biotope (32.86%) > Tricholoma matsutake of the inadequate-production biotope (22.17%) > Tricholoma matsutake of the adequate (II)-production biotope (17.79%) > Tricholoma matsutake of the adequate (I)-production biotope (14.86%) > Tricholoma matsutake of the potential-production (I) biotope (9.77%) > Tricholoma matsutake of the produced biotope (2.55%).
In this study, the optimum conditions for mycelium culture of the mushroom Tricholoma matsutake and the inhibitory effect of the mycelium extracts no tyrosinase activity have been examined. When the extracts of the Tricholoma matsutake mycelia were tested for inhibitory activity on tyrosinase, it was found that the components extracted with ethyl acetate and water showed the highest inhibitory activity. The effect of antioxidants on the growth of mycelium and tyrosinase-inhibiting activity was also investigated. The results showed that tocopherol inhibited the growth in a concentration-dependent manner. In terms of tyrosinase-inhibiting activity, however, tocopherol was found to enhance the inhibitory activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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