It is very difficult to get the information about semen quality analysis in transgenic pigs because of limited numbers and research facilities. Therefore, in the present study, we analyzed the semen quality of transgenic boars generated for xenotransplantation research. Briefly, the semen samples were collected from 5 homozygous ${\alpha}1,3$-Galactosyltransferase knock-out ($GalT^{-/-}$) transgenic boars and immediately transported to the laboratory. These semen samples were decupled with DPBS and conducted to analyze semen parameters by a computer-assisted semen analysis (CASA) system. The boar semen were examined all 12 parameters such as total motility (TM), curvilinear velocity (VCL), straight line velocity (VSL), average path velocity (VAP), and hyperactivated (HYP), etc. In results, among the 5 $GalT^{-/-}$ boars, three boars (#134, 144, and 170) showed normal range of semen parameters, but #199 and 171 boars showed abnormal ranges of semen parameters according to standard ranges of semen parameters. Unfortunately, #171 boar showed azoospermia symptom with rare sperm counts in the original semen. Conclusively, assessment of semen parameters by CASA system is useful to pre-screening of reproductively healthy boar prior to natural mating and artificial insemination for multiplication and breeding.
HPLC analysis of three Prunus species, Armeniacae Semen. Persicae Semen, and Mume Semen, showed that 24. 06 mg/g, 5. 79 mg/g and 3/ 10 mg/g of amygdalin in the MeOH extract and 3. 59 mg/g, 5. 41 mg/g and 13. 48 mg/g of benzaldehyde in the MeOH extract hydrolyzed with ${\beta}-glucosidase$ were contained respectively. The MeOH extract of Mume Semen showed strong antibacterial activities against two species of bacteria (E. coli and B. subtilis) while that of Armeniacae Semen showed mild, and that of Persicae Semen showed no effect. Against A. niger, a strong antifungal activity was observed with Armeniacae Semen and only mild activities with Persicae Semen and Mume Semen. None oh the three inhibited the growth of S. cervisiae. The above results may possibly be suggestive of the correlationships between the contents of amygdalin and benzaldehyde in the test extracts with the antimicrobial potencies.
A reversed phase HPLC method was developed to determine the major components of Psoralea corylifolia, psoralen, isopsoralen, bakuchiol, and corylin. Quantitative analysis of the above compounds was performed by C-18 column using a gradient solvent system of acetonitrile and water with UV detection at 310 nm. The comparison of contents of psoralen, isopsoralen, bakuchiol, and corylin in psoraleae semen and the processed psoraleae semen was also investigated. In result, processed psoraleae semen showed more amounts of psoralen, isopsoralen, and corylin with 1.6, 4.3, and 1.3 mg/g, respectively, except bakuchiol (66.98 mg/g) while psoraleae semen showed 0.53, 1.56, 1.0, and 76.3 mg/g of psoralen, isopsoralen, corylin, and bakuchiol, respectively.
The aim of this experiments were to assess the time-interval change of motional characteristics in frozen-thawed semen of Korean native cattle (KNC) by using computer aided semen analysis (CASA) technology. Twenty-six KNC frozen semen straws were obtained from Korean KNC improvement department, livestock improvement main division, national livestock cooperatives federation in Korea. Specimens were allowed to thaw at $37^{\circ}C$ for 30 sec in water bath. Semen analysis was performed on semen image analysis system (SIAS, Medical supply, Korea) adjusted to the gate settings and used the semen droplet ($5{\mu}l$) placed on Makler counting chamber (Sefi medical instrument, Israel) prewarmed at $37^{\circ}C$. The same person used the same micropipette to fill the Makler counting chamber. A total of 150 or more of sperms were analysed in each specimen by a single trained person by scanning at least 5 to 10 fields. The measurement parameters in SIAS were as follows ; frame rate = 30 frames per sec, image capture = 1 sec, minimum motile speed = $10{\mu}m/s$, maximum countable sperm number = 400. Statistical analysis was done by Student t-test with use of the Sigma plot program on a IBM personal computer. The dancemean(DNM) and hyperactivated sperm(HYP) of frozen-thawed KNC semen kinematics were significantly decreased(p < 0.05) after 10 min of incubation at $37^{\circ}C$ water bath. But, wobble(WOB) of same sample semen was significantly increased(p < 0.05) after 10 min of incubation and significantly decrease(p < 0.05) after 60 min of same incubation. And, after 30 mim of incubation, significantly differences were found most of motion kinematics, motifity(MOT), curvilinear velocity(VCL), straight line velocity(VSL), average path velocity(VAP), amplitude of lateral head displacement(ALH), beat cross frequency(BCF), mean angular displacement(MAD), dance(DNC), on same sample semen. The DNM of KNC semen sample was variable kinematics after 30 min of incubation. Also, the linearity(LIN) and straightness(STR) was significantly decreased(p < 0.05) from 60 min of incubation. In conclusion, the AI within 30 min after thawing of frozen semen can be an effective method for obtaining high fertility rate in KNC reproductive program.
Objectives : To present a differential standard of Armeniacae Semen and Persicae Semen that are easily confused. Methods : It was planed a differential standard form through outer appearance of the original plant, outer appearance in the form of each medicines and the appearance of the interior form through a microscope for each samples. Using an standard compound amygdalin, each samples have been analyzed by HPLC and TLC. Results : It was possible to distinguish the orignal plant between Armeniacae Semen and Persicae Semen through its leaf shape and calyx type. In Outer appearance in the form of each medicines, there was no difference pre-existing method(measuring length and width). In vascular pattern of the surface, however, there was a clear difference that Armeniacae Semen was developed more reticulated branches than Persicae Semen. In appearance through a microscope, it has not been possible to find a clear difference in the per original plant. However, there was a clear difference between Armeniacae Semen(1 layer) and Persicae Semen(3 layer) in inner albubemen cell. In TLC analysis, there was no difference in the pattern between samples. But in HPLC analysis, Armeniacae Semen showed amygdalin content higher on average. Conclusions : It will be possible to find various differences in the outer appearance of the original plant, the outer appearance in the form of each medicines, the appearance of the interior form through a microscope and physical and chemical research component.
This experiment was conducted to predict the effects of motional characteristics on the fertility of Korean native cattle(KNC) by using CASA technology and in vitro fertilization system. Twenty-six KNC frozen semen straws were obtained from Korean KNC improvement department, livestock improvement main division, national livestock cooperatives federation in Korea. Specimens were allowed to thaw at $37^{\circ}C$ for 30 sec in water bath. Semen analysis was performed on semen image analysis system(SIAS, Medical supply, Korea) adjusted to the gate settings and used the semen droplet ($5{\mu}l$) placed on Makler counting chamber(Sefi medical instrument, Israel) prewarmed at $37^{\circ}C$. The same person used the same micropipette to fill the Makler counting chamber. A total of 150 or more of sperms were analysed in each specimen by a single trained person by scanning at least 5 to 10 fields. The oocytes collection, in vitro maturation, IVF, in vitro culture and determination of the cleavage rate were performed by the technique, as described by Hwang et al (1997). Statistical analysis was done by linear regression with use of the Sigma plot program on a IBM personal computer. The cleavage rate in vitro fertilized oocyte was significantly correlated(P<0.05) with MOT, VCL, VSL, VAP, ALH, BCF and MAD, but not CON, LIN, STR, WOB, DNM, DNC and HYP in regressional analysis. The results show that some kinematic characteristics of frozen-thawed semen by CASA can be predict the fertility in in vitro model system.
Objective: To explore potential relationships between sperm DNA integrity and both semen parameters and clinical outcomes. Methods: Semen analysis of 498 samples was performed according to the 2010 criteria of the World Health Organization. The sperm DNA fragmentation Index (DFI) of the semen samples was assessed using a neutral comet assay. Results: Sperm DFI showed a significant correlation with semen parameters, including the patient's age, sperm viability, motility, morphology, and number of leukocytes (p<0.05). The sperm DFI values for asthenozoospermic (15.2%), oligoteratozoospermic (18.3%), asthenoteratozoospermic (17.5%), and oligoasthenoteratozoospermic semen samples (21.3%) were significantly higher than that observed in normozoospermic semen samples (10.5%, p<0.05). A sperm DFI value of 14% was used as a threshold of sperm DFI in assessing whether DNA was highly damaged. In 114 IVF-ET cycles, the fertilization rate of the sperm DFI <14% group (70 cycles, 61.7%) was significantly higher than that observed for the ${\geq}14%$ group (44 cycles, 55.3%), but there was no difference in the other clinical outcomes between the two groups. In the ${\geq}14%$ group, the pregnancy rates of the ICSI cycles (40.0%) and half-ICSI (44.0%) were higher than conventional IVF cycles (30.7%), but the difference was not statistically significant. Conclusion: Along with the conventional semen analysis, the sperm DFI assessed using the comet assay was shown to improve the quality of the semen evaluation. To evaluate the precise effect of ICSI on pregnancy rates in the patients who demonstrate high sperm DFI values, further study is necessary.
The purpose of this study was to evaluate the effect of lower numbers of sperm $(3{\times}10^9)$ per dose liquid semen and type of semen used in artificial insemination (AI) on sow reproductive performance in subtropical area. Semen was supplied by two commercial AI centers. A total of 671 female pigs from seven farms were inseminated with either $3{\times}10^9$ or $5{\times}10^9$ sperm per dose. Two types of semen were used: heterospermic semen from two boars of the same breed and homospermic semen from a single boar. After insemination, conception rate, farrowing rate, total litter size, and number of dead piglets were recorded. The analysis of variance indicated that there was no significant effect of interactions between pig farm, type of semen, or number of sperm on any of the traits measured. There were significant differences in conception rate, farrowing rate, and total litter size among pig farms (p<0.05). The effect of number of sperm per dose liquid semen ($3{\times}10^9$ or $5{\times}10^9$) was not significant. Sows inseminated with homospermic semen showed significantly higher conception and farrowing rates but significantly lower total litter size (p<0.05). In conclusion, the number of sperm per dose liquid semen for AI could be lowered to $3{\times}10^9 $ without affecting reproductive performance in subtropical areas like Taiwan.
Psoralen is used in the treatment of vitiligo and angelicin(isopsoralen) is a photosensitizing agent. A reversed-phase high performance chromatographic method was developed to determine the contents of psoralen and angelicin from Psoraleae Semen and processed Psoraleae Semen. The contents of psoralen and angelicin from Psoraleae Semen showed 0.39% and 0.34% respectively. Processing Psoraleae Semen showed that increased the contents of psoralen (0.52%) and angelicin (0.50%).
Objective : This study was to investigate the effects of distilled Cervi Pantotrichum Cornu Pharmacopuncture and Zizyphi Spinosi Semen Pharmacopuncture on autonomic nervous system with Heart Rate Variability(HRV). Purpose of the trial was to observe what influence distilled Cervi Pantotrichum Cornu Pharmacopuncture and Zizyphi Spinosi Semen Pharmacopuncture have on the autonomic nervous system. Methods : 60 healthy male volunteers were divided into three groups which consist of two experimental groups such as Cervi Pantotrichum Cornu Pharmacopuncture and Zizyphi Spinosi Semen Pharmacopuncture, and a control group. Study design was a randomized, placebo-controlled, double-blind clinical trial. 20 subjects in experimental group were injected distilled Cervi Pantotrichum Cornu Pharmacopuncture at $GB_{21}$(Kyonjong), 20 subjects in other experimental group were injected distilled Zizyphi Spinosi Semen Pharmacopuncture and 20 subjects in control group were injected Normal Saline at $GB_{21}$(Kyonjong). One volunteer of each groups were excluded from analysis because of error during measuring HRV. At the end of the study 57 volunteers completed HRV analysis. HRV was measured by QECG-3:LXC3203(LAXTHA Inc. Korea) at P0, P1, P2, P3, P4, P5 and P6 and its time-course dependent change in each group was analyzed using paired t-test, and the difference of HRV fluctuation among two experimental group and a control was evaluated by one way ANOVA(p<0.05). Results : A. Time Domain Analysis 1. Analysis of Mean HRV, SDNN and Complexity After injection of distilled Cervi Pantotrichum Cornu Pharmacopuncture, Mean HRV was significantly decreased only at 20 minutes after injection. SDNN was significantly increased from 15 minute after injection. Complexity was significantly decreased only at 15 minute after injection. After injection of distilled Zizyphi Spinosi Semen Pharmacopuncture, Complexity was significantly decreased at 10, 15 and 30 minutes after injection. 2. Analysis of HRV index, pNN50 After injection of distilled Cervi Pantotrichum Cornu Pharmacopuncture, pNN50 was significantly decreased at 15, 20 and 25 minutes after injection. Compared with Normal Saline injection, distilled Cervi Pantotrichum Cornu Pharmacopuncture and Zizyphi Spinosi Semen Pharmacopuncture showed significant difference on HRV index and pNN50 at 5 minutes after injection. B. Frequency Domain Analysis 1. Analysis of Ln(TP), Ln(VLF) After injection of distilled Cervi Pantotrichum Cornu Pharmacopuncture, Ln(TP) was significantly increased at 15 and 30 minutes after injection. Ln(VLF) was significantly increased at 10, 15 and 30 minutes after injection. After injection of distilled Zizyphi Spinosi Semen Pharmacopuncture, Ln(VLF) was significantly increased only at 30 minutes after injection. Compared with Normal Saline injection, distilled Cervi Pantotrichum Cornu Pharmacopuncture showed significant difference on Ln(TP) after 5 minutes of injection. Conclusions : Our results suggest that Cervi Pantotrichum Cornu Pharmacopuncture and Zizyphi Spinosi Semen Pharmacopuncture in healthy adult man tend to activate the autonomic nervous system and sympathetic nervous system compared to Normal Saline within normal range.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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