세균을 이용한 복귀돌연변이 시험계는 Salmonella typhimurium 히스티딘 요구성 변이주를 이용하여 염기대치환(base change)의 돌연변이를 검출하는 S. typhimurium TA100, TA1535와 frameshift형의 돌연변이를 검출하는 S. Tphimurium TA98, TA1537로 구성되어 있으며, 화학물질의 변이원성에 의하여 히스티딘 비요구성으로 복귀하는 돌연변이를 검토하는 시험계로 널리 이용되고 있다. 시험결과, Yellow pigment는 S. typhimurium에 대한 독성도 나타나지 않았으며, 배지 1$m\ell$당 200$\mu\textrm{g}$ 이하의 모든 농도에서 S-9 Mix(대사활성계)의 유무에 관계없이 S. typhimurium 모든 변이주에서 히스티딘 요구성에 대한 복귀돌연변이를 유발하지 않는 물질로 판단되었다. 이상의 결과로부터 치자황색색소는 S. typhimurium을 이용한 복귀돌연변이 시험에서 유전독성이 없는 물질로 사료되었다.
The mutagenicities and antimutagenicities of butanol (PL I) and water (PL II) extracts from the filtrate of the cultured broth of Phellinus linteus were examined using the Ames/Salmonella test. No mutagenic activity of PL I and PL II was found in Salmonella typhimurium strains TA98 and TA100, either with or without S9 activation. In contrast, PL I and PL II showed inhibitory effects on the mutagenic activities induced by the directly-acting mutagens, 4-nitro-o-phenylenediamine (NPD) using the tester strain TA98 and sodium azide (NaN3) using the tester strain TA 100 in the absence of S9 mix. PLI and PL II also showed inhibitory effects on the mutagenicities of the indirectly-acting mutagens, 2-aminofluorene (2-AF) using the tester strain TA98 and benzo[a]pyrene (B[a]P) using the tester strain TA 100 in the presence of S9. These results suggest that P. linteus has an antimutagenic activity and may play a role in the prevention of cancer.
The antimutagenic activity of resveratrol on the mutagenicity induced by Trp P-1 (3-amino-1,4-dime-thyl-5H-pyrido{4,3-b}indole) was studied using the Ames test with Salmonella typhimurium TA98 and 100. Trp P-1 showed strong mutagenecity in S. typhimurium TA98, but was higly decreased mutagenecity in S. typhimurium TA100. This result suggests that the mutagenecity of Trp P-1 can be mainly induced by the DNA lesions causing frame shift. Resveratrol itself did not show antibacterial effect upon 300 $\mu\textrm{g}$/assay. Resveratrol showed the strongest inhibitory effect with dose dependent manner on the mutagenicity induced by Trp P-1. The inhibition rates of resveratrol at concentration of 2, 10, 25, 50, 100, 300 $\mu\textrm{g}$/assay were 13%, 37%, 52%, 65%, 81%, 89%, respectively.
In order to evaluate the mutagenic potential of SDK(skin decontamination kit) produced by Agency for Defense Development(ADD), were performed Salmonella typhimurium reversion assay, chromosomal aberration test on chinese hamster ovarian cells and in vivo micronucleus assay using mouse bone marrow cells according to the established regulation of Korean Food and Drug Administration. In the reverse mutation test using Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535 and TA1537 did not in-crease the number of revertant at any of the concentration tested in this study. SDK did not increase the number of cells having structural or numerical chromosome aberration in cytogenetic test. In mouse micronucleus test, no significant increase in the occurrence oj micro nucleated polychromatic erythrocytes were observed in ICR male mice intraperitoneally administered with SDK. These results indicate that SDK has no mutagenic effects under these experimental conditions.
The clastogenecity and mutagenicity of antifungal 6-[(N-halophenyl)amino]-7-chloro-5, 8-quinolinedione (RCK 3, 7, 13, 14, and 15) had been evaluated. Salmonella typhimurium reversion assay (Ames test) was used to test the mutagenicity of RCKs. RCK14 was mutagenic in S. typhimurium(TA98 and TA100) with and without rat liver microsomal activation. Whereas RCK3, 7, 13 and 15 were negative in Ames test with Salmonella typhimurium(TA98 and TA100), The clastogenecity was tested on the RCKs with in vivo mouse micronucleus assay. All of RCKs tested did not show any clastogenic effect in mouse peripheral blood. Thus RCKs were not supposed to cause any chromosomal damage termed micronuclei. These results indicate that RCK 3, 7, 13 and 15 have no genotoxic potential under these experimental condition.
변이원물질인 N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, $benzo{(\alpha)}pyrene,$ 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido[4,3-b] indole에 대한 컴프리의 생즙과 가열즙의 항돌연변이 효과를 spore rec-assay 및 Ames test방법을 이용하여 검토하였다. Bacillus subtilis $H17(rec^+)$와 $H45(rec^-)$를 사용한 spore rec-assay에서 comfrey의 생즙시료 $40{\mu}l$처리시에 MNNG에 대한 강한 항돌연변이 효과를 나타내었다(p<0.01). Salmonella typhimurium TA98과 /TA100의 두 균주를 이용한 Ames test에서는, comfrey생즙의 경우 $B{(\alpha)}P$에 대해 TA98과 TA100 두균주 모두에서 각각 43% 및 52%의 다소 낮은 항돌연변이 효과를 나타낸 반면, 가열즙의 경우 Trp-P-1에 대해 TA98과 /TA100의 균주에 대해서 각각 75% 및 76%의 강한 항돌연변이 효과를 나타내었다(p<0.01).
Salmonella typhimurium LT-2의 histididine auxotroph 중 base substitute mutant인 TA 1535와 TA100, 그리고 frame-shiftmutant인 TA 1538과 TA 98을 각각 사용하였고 microsomal enayme activation system을 병용하여 국내 사용농약 20종에 대한 돌연변이 유발성을 검하였다. 이중 다음 4종의 농약이 양성 및 의양성의 유발성을 나타냈다. (1) Captan은 강력한 돌연변이 유발성질로서 TA1535, TA100 및 TA98에 대해 직접적으로 10$\mu\textrm{g}$/plate의 농도에서 plate당 각각 205, 1012, 그리고 297의 돌연변이 균종의 출현을 나타냈으며 microsomal enzyme activation에 의해 그 유발능력이 약간 감소되는 경향을 보였다. (2) Micut는 TA100에 대해 직접적으로 10mg/plate의 농도에서 55 revertant 정도의 미비한 돌연변이 유발성을 나타냈다. (3) Dimethoate는 TA100에서 역시 직접성으로 처리가능 최고농도인 0.2λ/plate에서 55 revertant/plate 정도의 징약한 돌연변이 유발성을 바타냈다. (4) Triforing도 역시 TA 100에서 직접적으로 10mg/plate로 처리된 농도에서 78 revertant/plate정도의 약한 돌연변이 유발성을 나타했다.
산삼배양추출물의 세균에서의 돌연변이 유발성 검색을 위하여 Salmonella typhimurium의 히스티딘 요구성 균주 LA100, TA1535, TA98 및 TA1537의 4개의 균주와 대장균 Escherichia coli의 트립토판 요구성 균주인 WP2 uvrA를 이용해 복귀돌연변이 시험을 실시하였다 시험물질은 멸균생리식염수에 용해하여 처리하였다. 대사활성계 적용 및 미적용시 모든 균주에 대해 0, 62, 185, 556, 1,667 및 5,000{\mu}g/plate의 범위를 설정하고 각각 음성 및 양성대 조군으로 시험군을 구성해 본 시험을 실시하였다. 시험 결과 모든 균주에서 최고농도에 이르기까지 집락수의 일관성 있는 증가는 나타나지 않았다. 이상의 결과를 종합할 때, 시험물질 산삼배양추출물은 본 시험조건 하에 사용한 시험균주들의 복귀돌연변이를 유발하지 않는 것으로 사료된다.
본 연구는 섬오갈피 뿌리 추출물을 이용하여 돌연변이 유발을 관찰하기 위해 S. typhimurium TA100, TA98, TA1535, TA1537과 E. coli WP2 uvr A를 이용해 Ames test을 하였고 또한 S. typhimurium TA100, TA98을 이용한 항돌연변이원 억제 시험을 시행하였다. Ames test에 필요한 시험물질들은 최고농도 결정을 통해 $5000\;{\mu}g$/plate, $2500\;{\mu}g$/plate, $600\;{\mu}g$/plate의 시험물질을 양성대조군, 실험군, 음성대조군을 비대사활성계와 대사활성계로 나누어 시험을 시행하였다. 시험 결과 모든 농도에서는 집락군의 일관성 있는 증가는 보이지 않았고 이 점으로 미루어 보아 복귀돌연변이는 일어나지 않았고 음성으로 판정하였다. 항돌연변이원 시험에서는 양성물질의 농도결정과 시험물질의 최고농도 결을 통해 양성대조군, 실험군, 음성대조군을 비대사활성계와 대사활성계로 시험을 하였고 시험결과 S. typhimurium TA100, TA98 두 균주 돌연변이 억제를 보였으며 TA98에서 더 높은 억제율을 보였다. 시험결과로 섬오갈피의 뿌리는 항돌연변이 억제효과에 탁월한 효과가 있음을 시사하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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