• 제목/요약/키워드: RAW 264.7 macrophage cell

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Antitumor and Immunostimulating Activities of $Elfvingia$ $applanata$ Hot Water Extract on Sarcoma 180 Tumor-bearing ICR Mice

  • Shim, Sung-Mi;Lee, Jae-Seong;Lee, Tae-Soo;Lee, U-Youn
    • Mycobiology
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    • 제40권1호
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    • pp.47-52
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    • 2012
  • $Elfvingia$ $applanata$, a medicinal mushroom belonging to Basidiomycota, has been used in the effort to cure cancers of the esophagus and stomach, and is also known to have inhibitory effects on hepatitis B virus infection. The hot water soluble fraction (as Fr. HW) was extracted from fruiting bodies of the mushroom. $In$ $vitro$ cytotoxicity tests showed that hot water extract was not cytotoxic against cancer cell lines such as Sarcoma 180, HT-29, HepG2, and TR at concentrations of 10-2,000 ${\mu}g/mL$. Intraperitoneal injection with Fr. HW resulted in a life prolongation effect of 45.2% in mice previously inoculated with Sarcoma 180. Treatment of Fr. HW resulted in a 2.53-fold increase in the numbers of murine spleen cells at a concentration of 50 ${\mu}g/mL$, compared with control. Incubation of murine spleen cells with Fr. HW at a concentration of 500 ${\mu}g/mL$ resulted in improved immune-potwntiating activity of B lymphocytes through an 8.3-folds increase in alkaline phosphatase activity, compared with control. Fr. HW generated 12.5 ${\mu}M$ of nitric oxide (NO) when cultured with RAW 264.7, a mouse macrophage cell line, at the concentration of 50 ${\mu}g/mL$, while lipopolysaccharide, a positive control, produced 15.2 ${\mu}M$ of NO. Therefore, the results suggested that antitumor activities of Fr. HW from $E.$ $applanata$ might, in part, be due to host mediated immunostimulating activity.

Inhibition of Tumor Necrosis $Factor-{\alpha}$ mRMA Expression by a Limited Series of Tetrahydroisoquinolines in Mouse Peritoneal Macrophages

  • Jung, Tae-Ho;Lee, Young-Soo;Kang, Young-Jin;Lee, Bog-Kyu;Ko, Young-Shin;Seo, Han-Geuk;Chung, Soo-Youn;Lee, Duck-Hyung;Yun-Choi, Hye-Sook;Chang, Ki-Churl
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제4권4호
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    • pp.325-331
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    • 2000
  • Tumor necrosis $factor-{\alpha}\;(TNF-{\alpha})$ plays important roles in inflammatory responses. Some of tetrahydroisoquinoline (THI) compounds exhibited to inhibit iNOS expression in animal studies and RAW 264.7 cells, but the action of THI on inflammatory reaction was not fully investigated. In the present study, we examined a limited series of THIs (higenamine, YS-51 and THI-52) on the $TNF-{\alpha}$ mRNA expression in mouse peritoneal macrophages by Northern analysis. When thioglycollate-stimulated peritoneal macrophages were incubated with LPS (100 ng/ml), expression of $TNF-{\alpha}$ mRNA was evident and reached its maximum at 2.5 h, which was reduced concentration-dependently by treatment with THIs. When the $TNF-{\alpha}$ activity of macrophage-conditioned media was measured using a TNF-sensitive L929 fibroblast cell line, CCL 1, all THIs increased the cell viability in a concentration dependent manner. The concentrations of THIs used are not cytotoxic by itself when analysed by MTT. Furthermore, nitrite/nitrate level was significantly reduced by the presence of THIs in cells treated with $LPS+interferon-{\gamma}\;(IFN-{\gamma}).$ It is concluded, thus, that these results strongly indicated that THIs can suppress the $TNF-{\alpha}$ expression and reduce NO, which may be useful for the inflammatory disorders.

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LPS로 활성화된 RAW 264.7 cell에서 하경(荷梗)의 염증매개물질 억제효과 (Anti-inflammtory effects of the MeOH extract of Petiolus Nelumbinis)

  • 이원욱;조미정;박상미;정지윤;김상찬
    • 대한한의학방제학회지
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    • 제17권1호
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    • pp.175-185
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    • 2009
  • Petiolus Nelumbinis, branches of lotus leaf or lotus flower is a traditional oriental herbal medicine widely used for treating a superheat or disorder of qi flow. Although there are many clinical results and literature study, it has been rarely conducted to evaluate the immuno-biological activity. The present study was conducted to examine the anti-inflammatory effects of PNM (Petiolus Nelumbinis MeOH extract) in vitro. To determine cytotoxic concentration of PNM, the cells were treated with PNM for 24 h after LPS addition, and the cell viability was tested by MTT assay. Both of dosages (30 and 100 ${\mu}g/ml$) of PNM had no cytotoxicity. In these concentrations, PNM significantly reduced the elevated levels of NO and $PGE_2$ by LPS. These inhibitory effects of PNM were due to the reduced expressions of iNOS and COX-2 protein. TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$ and IL-6 are frequently encountered pro-inflammatory cytokines, and LPS plays a key role in inducing to the massive production of these cytokines. Thus, we next determined the levels of these cytokines. Although PNM had no significant inhibitory effect on the production of TNF-$\alpha$, the elevated levels of IL-1$\beta$ and IL-6 by LPS were dose-dependently reduced in PNM-treated groups. These results demonstrate that PNM has anti-inflammatory effects by inhibiting the production of proinflammatory cytokines, NO and $PGE_2$ in LPS-activated macrophage. Moreover, the reduction of NO and $PGE_2$ levels was due to the inhibition of iNOS and COX-2 protein expression by PNM.

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전통발효식품으로부터 Chitin 분해 미생물의 분리 및 특성 규명 (Isolation and Characterization of Chitinoloytic Strain, Bacillus atrophaeus CJ-3.)

  • 고보경;최인순;이상현;임채오;이성호;갈상완;최영주
    • 생명과학회지
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    • 제14권3호
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    • pp.501-508
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    • 2004
  • 전통발효 식품인 간장으로부터 chitinase활성이 높으면서 갈변반응을 일으키는 균주인 CJ-3를 분리하여 갈변반응생성물이 면역기능, 항산화력 및 세포활성에 미치는 영향과 생화학적 특성을 규명하였다. 분리된 CJ-3 균주는 16S rDNA 염기서열분석에 의하여 Bacillus atrophaeus로 동정되었으며 분리된 균주의 분자량은 대략 31.0 kDa으로 colloidal chitin(0.5, 1.0, 2.0%)의 첨가에 의하여 chitinase 활성이 현저히 증가되었다 B. atrophaeus CJ-3에 의해서 유도되는 갈변반응물 200${\mu}\ell$ 첨가로 LPS에 의하여 유도되는 nitric oxide (NO) 활성을 45%까지 감소시켰다. MTT 분석을 통한 세포활성에서도 갈변반응물은 LPS에 의하여 세포활성을 정상수준으로 회복하였다. CJ-3. 균주의 DPPH 전자공여능법에 의한 항산화력은 갈변반응에 의하여 약 55% 증가하였다 . 이러한 결과들은 갈변반응생성물은 면역기능 및 세포활성을 증가시키는 것으로 추정된다. 분리된 균주의 최적 생육조건은 최적온도 37$^{\circ}C$, 최적 pH 7.0 및 염 농도는 9% NaCl농도까지는 잘 생육하는 것으로 나타났으며 분리된 균주의 주요 intracellular 유리아미노산은 glutamate로 나타났다.

Immunomodulatory activity of acharan sulfate isolated from Achatina fulica

  • Kim, Hyeon-Seon;Lee, Jae-Kwon;Yang, In-Ho;Lee, Young-Ran;Shin, Hyun-Jeong;Park, Eun-Ju;Park, Hyung-Seok;Kim, Yeong-Shik;Lee, Chong-Kil
    • 대한약학회:학술대회논문집
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    • 대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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    • pp.307.2-308
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    • 2002
  • Acharan sulfate. a new glycosaminoglycan(GAG) isolated from the giant African snail Achatina fulica. was shown to have antitumor activity in vivo. To elucidate the mechanisms for the antitumor activity. we examined its impact on professional antigen presenting cells such as macrophages and dendritic cells (DCs). Acharan sulfate stimulated cytokine production (TNF-a and IL -1b). nitric oxide release. and morphological changes in a dose dependent manner on a macrophage cell Line Raw 264.7 cells. The differentiation-inducing activity of acharan sulfate was examined on immature DCs. Immature DCs were generated from mouse bone marrow (BM) cells by culturing with GM-CSF and IL-4, and then stimulated with acharan sulfate. The resultant DCs were then examined for funcional and phenotypic properties. It was found that acharan sulfate could induce functional maturation of immature DCs as determined by increased allogenic mixed lymphocyte reaction (MLR) and IL-12 production. Phenotypic. analysis for the expression of class II MHC molecules and major co-stimulatory molecules such as B7-1, B7-2 and CD40 also confirmed that acharan sulfate could induce maturation of immature DCs. These results suggest that that the antitumor activity of acharan sulfate is at least in part due to activation adn induction of differentiation of professinal antigen presenting cells. (omitted)

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진균류 균사체의 고체발효 커피생두로부터 조제한 원두커피의 생리활성 (Pharmacological Activities of Coffee Roasted from Fermented Green Coffee Beans with Fungal Mycelia in Solid-state Culture)

  • 신지영;김훈;김동구;백길훈;정헌상;유광원
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제42권3호
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    • pp.487-496
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    • 2013
  • 커피의 생리활성을 증진시키기 위해 고체발효를 이용하여 인도네시아산 Mandheling 커피생두에 3종의 버섯 균사체(Phellinus linteus, PL; Hericium erinaceum, HE; Ganoderma lucidum, GL) 및 2종의 홍국균 균사체(Monascus purpureus, MP; Monascus ruber, MR)를 배양하였다. 균사체-고체발효 커피생두를 로스팅하여 얻은 원두커피는 decoction법에 의한 열수추출물과 reflux에 의한 에탄올추출물로 조제하였는데, 열수추출물(HW, 수율 17.7~25.3%)은 에탄올추출물(EE, 9.5~12.2%)보다 더 높은 수율을 나타내었다. 2종의 홍국균 균사체-고체발효 커피생두로부터 조제된 원두커피 열수추출물(MP-CB-HW, MR-CB-HW)은 비발효 원두커피 또는 3종 버섯 균사체-고체발효 원두커피 열수추출물보다 높은 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량과 DPPH 자유라디칼 소거능을 나타내었다. 또한, 홍국균 균사체-고체발효 원두커피 중에서도 MR-CB-HW는 가장 높은 마크로파지 활성과 마이토젠 활성을 나타내었다(CB-HW의 1.32배와 1.40배). MP-CB-EE와 MR-CB-EE는 $100{\mu}g/mL$의 시료농도에서 세포에 대한 독성을 나타내지 않으면서도 LPS로 유도된 RAW 264.7 세포의 산화질소(NO)의 생성을 효과적으로 억제하였다(LPS 처리군의 38.6과 37.0%). 한편, 홍국균 균사체를 이용한 고체발효는 카페인 함량에 영향을 주지 않으면서 클로로겐산을 유의적으로 증가시켰다($76.21{\sim}76.73{\mu}g/mL$). 결론적으로 원두커피의 생리활성은 M. purpureus 또는 M. ruber와 커피생두의 고체발효에 의해서 증진되었으며 이러한 결과는 홍국균-고체발효 원두커피가 기능성 커피음료의 소재로 이용될 가능성을 제시하는 것으로 사료된다.

Apios fortunei, Colubrina arborescens, Croton caudatus, Osmanthus matsumuranus, 그리고 Schima noronhae를 포함하는 5종 식물 추출물의 항산화 활성 (Anti-oxidative Activity of Five Plant Extracts including Apios fortune, Colubrina arborescens, Croton caudatus, Osmanthus matsumuranus and Schima noronhae)

  • 이수현;진경숙;권현주;김병우
    • 생명과학회지
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    • 제28권9호
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    • pp.1092-1099
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    • 2018
  • 본 연구에서는 식물자원으로부터 생리활성을 보유한 새로운 기능성 소재를 찾고자 하였다. 이를 위해 수종의 식물 추출물을 분석하여 강한 항산화능을 보유한 5종(Apios fortunei Maxim., Colubrina arborescens Sarg., Croton caudatus Geiseler, Osmanthus matsumuranus Hayata 그리고 Schima noronhae Reinw.)을 선별하고, 각 추출물의 항산화 활성을 시험관 분석법, 세포실험 모델계, 대상 단백질 발현 분석 등을 통해 평가하였다. 먼저 각 추출물의 항산화 활성을 DPPH 라디칼 소거능을 통해 분석한 결과 모두 양성 대조군으로 사용한 아스코르빈산과 유사한 정도의 높은 활성을 보여 각 소재가 매우 강한 항산화능을 보유함을 확인하였다. 또한 RAW 264.7 세포주에서 $H_2O_2$에 의해 유도된 ROS에 대한 각 추출물의 소거능을 분석한 결과에서도 농도의존적인 강한 소거능을 보였다. 뿐만 아니라 대표적인 항산화효소 중 하나로 항산화능 보유 천연물에 의해 발현이 유도되는 HO-1 및 그 전사인자인 Nrf2의 단백질 발현이 각 추출물의 처리에 의해 증가됨을 보였다. 이러한 결과를 통해 5종 식물 추출물의 강한 항산화 활성을 처음으로 확인하였으며 향후 기능성 소재로서 유용하게 활용될 수 있을 것으로 판단된다.

찔레나무뿌리(Rosa multiflora root)의 항산화 및 항염증효과 (Anti-Oxidant and Antiinflammatory Effects of Rosa multiflora Root)

  • 박근혜;이진영;김동희;조영제;안봉전
    • 생명과학회지
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    • 제21권8호
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    • pp.1120-1126
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    • 2011
  • 찔레나무뿌리를 열수, 에탄올, 메탄올, 아세톤에서 추출하여 항산화 및 항염증 효능효과를 확인하였다. 그 결과 아세톤추출물에서 가장 많은 67.05${\pm}$0.56 mg/g의 폴리페놀 함량을 확인하였으며, SOD 유사활성능을 제외한 DPPH, ABTS, superoxide anion 라디컬소거능 확인 결과 우수한 항산화 효과를 확인하였다. 찔레나무뿌리 추출물의 HAase 저해능을 측정한 결과 에탄올, 메탄올, 아세톤 추출물 500 ${\mu}g/ml$ 에서 60% 이상의 높은 HAase 저해 효과를 확인할 수 있었다. NO 생성량을 확인한 결과, RAW 264.7 cell에서 LPS에 의해 유도된 NO 생성을 농도의존적으로 뚜렷하게 감소시키는 것을 확인하였으며, 에탄올 추출물에서 NO 생성억제 효과가 가장 우수한 것을 확인할 수 있었다. 위의 사실에 기초하여 NO 생성저해의 기전을 알아보기 위하여 iNOS의 발현을 분석한 결과, 에탄올추출물 100 ${\mu}g/ml$에서 40%의 iNOS protein 발현 감소를 확인하였으며, iNOS의 발현억제가 NO생성억제와 유사한 경향을 나타냄으로 NO생성억제는 iNOS의 발현저해를 경유한 것임을 확인할 수 있었다. 이러한 결과들은 찔레나무뿌리 추출물이 항산화 및 항염증 연구의 기초 자료로 활용될 것으로 예상된다. 또한 추후 산업적 응용도 가능함으로 기능성화장품의 가능성을 제시하고 있다.

Inhibition of LPS-induced nitric oxide production by transduced Tat-arginine deiminase fusion protein in Raw 264.7 cells

  • Lee, Min-Jung;Kim, Dae-Won;Lee, Yeom-Pyo;Jeong, Hoon-Jae;Kang, Hye-Won;Shin, Min-Jae;Sohn, Eun-Jeong;Kim, Mi-Jin;Jang, Sang-Ho;Kang, Tae-Cheon;Won, Moo-Ho;Min, Bon-Hong;Cho, Sung-Woo;Lee, Kil-Soo;Park, Jin-Seu;Eum, Won-Sik;Choi, Soo-Young
    • BMB Reports
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    • 제42권5호
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    • pp.286-292
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    • 2009
  • Arginine deiminase (ADI), an arginine-degrading enzyme, has anti-proliferative and anti-tumor activities and is capable of inhibiting the production of nitric oxide (NO). Modulation of nitric oxide (NO) production is considered a promising approach for the treatment of various diseases including cancer, inflammation and neuronal disorders. In this study, an ADI gene was fused with an HIV-1 Tat peptide in a bacterial expression vector to produce an genetic in-frame Tat-ADI fusion protein. When added exogenously to the culture media, the expressed and purified Tat-ADI fusion proteins were efficiently transduced into macrophage Raw 264.7 cells in a time- and dose-dependent manner. Furthermore, transduced Tat-ADI fusion proteins markedly increased cell viability in cells treated with lipopolysaccharide (LPS). This increase in viability was mediated by an inhibition of NO production. These results suggest that this Tat-ADI fusion protein can be used in protein therapies of NO-related disorders such as cancer, inflammation and neuronal diseases.

녹차종자 메탄올추출물의 생리활성 (Biological Activities of Methanol Extracts from Green Tea Seed)

  • 양희선;김재용;김홍출;노일섭;서권일
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제13권6호
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    • pp.769-773
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    • 2006
  • 녹차종자를 기능성 식품소재로서 이용하기 위하여 녹차 종자메탄올추출물의 생리활성을 녹차 메탄올추출물의 생리활성과 비교하였다. 녹차 메탄올추출물기 수소공여능은 $100{\mu}g/mL$ 농도 이상에서 50% 이상의 활성을 나타내었으나, 녹차종자 메탄올추출물은 $1000{\mu}g/mL$ 농도에서 21.86%의 활성을 나타내었다. 또한 녹차종자 및 녹차 메탄올추출물이 $1000{\mu}g/mL$ 농도로 처리된 흰쥐의 간 균질물에서 MDA의 생성량이 대조구의 86 Mol/g에 비하여 각각 60 및 50 Mol/g로 낮게 나타내어 이들 추출물은 항산화효과가 있음을 알 수 있었다. 녹차종자 및 녹차 메탄올추출물은 $1000{\mu}g/mL$ 농도에서 A549 및 SW480 세포에 대하여 각각 20%, 50% 이상의 성장 억제율을 나타내었다. 또한 녹차종자 메탄을 추출물이 $500{\mu}g/mL$의 농도 처리된 암세포는 대조구에 비하여 상대적인 세포 수의 감소되었으며, 심한 형태학적인 변화를 보여주었다. 대식세포 RAW264.7에 녹차 및 녹차종자 메탄을 추출물이 1, 10, 100및 $1000{\mu}g/mL$의 농도로 처리 하였을 때, 이들 추출물은 $100 {\mu}g/mL$ 농도까지 농도 의존적으로 NO(nitric oxide)의 생성을 유도하였으며, $100{\mu}g/mL$의 농도에서 그 농도는 각각 0.77와 2.04 uM로서 녹차종자 메탄을 추출물이 녹차 메탄을 추출물보다 그 효과가 크게 나타났다.