구름버섯의 균사체배양액과 자실체로부터 높은수율의 단백다당체를 얻기 위하여 균주 및 배지별에 따른 차이와 폐기물을 이용한 균배양에 대하여 실험을 실시한 결과를 요약하면 다음과 같다. 계통이 다른 4종의 균주 중에서 16002 균주가 0.58%로 가장 높은 수율을 보였으며 나머지 3균주 간에는 큰 차이가 없었다. 평판배지상에서 균사의 생장이 양호했던 배지들 중 액내 배양하여 단백다당체를 추출한 결과 CVT-III가 0.51%로 가장 양호했으며 각 배지간에는 큰 차이를 보였다. 약재추출박과 구름버섯의 자실체 추출박을 배지의 성분으로 이용했을 때 구름버섯의 추출박을 이용한 배지에서는 대조군에 비해 대등한 수율을 나타냈으며 인삼추출박을 첨가했을 때는 11.4-48%의 수율증가를 보였다. 인공재배를 한 자실체간에 있어 단백다당체의 수율을 비교했을 때 균사배양액에서와 같은 경향을 보였으며 높은 수율의 단백다당체를 얻기 위해서는 어린시기에 자실체를 수확하는 것이 효과적이었다.
To find pharmacologically active components of Agrocybe cylin(Iracea, its basidiocarps were extracted with water. The extracts were separated by DEAE cellulose column chromatography, Sepharose CL-4B gel filtration, and Concanavalin A-Sepharose 4B affinity chromatography. Among the obtained fractions from A, cylinclracea, fraction IN which was the neutral proteinbound-polysaccharide fraction exhibited a marked antitumor activity and it was tentatively named "Cylindan". It showed about 70% of tumor inhibition against the solid form of sarcoma 180 when a dose of 30 mg/kg/day was intraperitoneally injected into ICR mice. When each fraction was examined by chemical analysis, Cylindan consisted of 85% polysaccharide, 3% protein and 1% hexosamine. Its polysaccharide moiety contained glucose, mannose, fucose and galactose and its protein moiety contained the comparatively large amounts of aspartic acid and glycine, and other 11 amino acids.
Inonotus obliquus mushroom, which is a fungus belonging to Hymenochaetaceae family, is known to grow on birth trees in colder northern climates and to be a fungal parasite that draws nutrients out of living trees rather than from the ground. For the separation of protein-bound polysaccharide (PBP) from the culture broth and mycelium of Inonotus obliquus, three well known extraction methods namely hot water, ultrasound and microwave were used. The best extraction conditions to separate the PBP (64.94 mg/g) from mycelium by microwave were found to be for 1 hour and $150^{\circ}C$. The possibility for concentration of extracted PBP solution by using membrane was also studied. The extracted PBP solution was concentrated effectively by using an ultrafiltration membrane and the molecular weight cut off (MWCO) is 30 KDa. It was observed that a concentration by the ultrafiltration membrane is essential not only for the development of clean separation technology but also for enhanced production of PBP. As a result, we have shown that PBP in the final concentrated solution showed approximately 10 times higher than that in the crude solution by application of the developed separation systems. The separation yield of PBP was about 89.79% by gel filtration of purification steps and the purified product was confirmed to be PBP by using FT-IR.
구름버섯 배양균사체와 야생 구름버섯 자실체로부터 얻은 protein-bound polysaccharide의 당과 단백질 함량을 비교하였을 때 배양균사체인 경우보다 야생 자실체의 경우가 당 함량이 더 높게 나타났으며 단백질 함량은 더 적게 나타났다. 구름버섯에서 부터 얻은 시료를 methanolysis시킨 후 HPLC로 분석하였을 때 배양균사체인 경우 4종류의 단당이 경출되었고 그중 mannose가 가장 함량이 많은 반면 야생 자실체인 경우 3종류의 단당이 경출되었으며 그중 glucose가 가장 많이 존재하였다. 구름버섯에서부터 얻은 시료에 lactose가 혼합되었을 경우 HPLC로 구별할 수 있었다. 구름버섯에서 얻은 시료의 구성 아미노산을 분석하였을 때 시료 모두에서동일한 17종의 아미노산이 검출되었다.
상황버섯 자실체의 열수 및 알칼리 추출다당류에 대한 약리 효과는 다음과 같다. 1. 분자량은 10kD 부근에서 주를 이루고 있었으며, IR은 다당류의 전형적인 peak 흡수대를 나타냈다. 2. 항암 활성과 보체 활성에 있어서는 열수추출 다당류에서 높게 나타났으며, 지질 과산화 저해능은 알칼리 추출 및 열수 추출 분획에서 각각 71.3%와 55.8%의 저해율을 나타내었다. 상기와 같은 결과를 종합하여 볼 때 상황버섯 자실체의 열수 및 알칼리 추출물은 당과 단백질로 구성된 단백 다당류였으며, 열수 추출과 알칼리 추출에 의한 약리활성 정도는 유사한 것으로 조사되었다.
Kim, Byong-Kak;Shim, Mi-Ja;Kim, Ha-Won;Woo, Myoung-Sik;Choi, Eung-Chil
Archives of Pharmacal Research
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제10권3호
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pp.179-183
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1987
To investigate antitumor constituents of higher fungi, the carpophores of Polyporus giganteus Pers. ex. Fr. (81 g, dry weight) which were collected in Indiana, U. S. A. were examined for antitumor activity. Two protein-bound-polysaccharide fractions (I and II) were prepared from the hot water extract and one fraction (III) from the 0.1 N NaOH extract of the carpophores. The antitumor effect of each fraction was tested against sarcoma 180 implanted subcutaneously in female ICR mice. Of three fractions, Fraction II showed 85.2% inhibition ratio at the dose of 20 mg/kg/day for 10 days and was named gigantan. Gigantan was found to contain 59% polysaccharide and 27% protein. Its polysaccharide moity was a heteroglycan that consisted of mainly glucose (89.3%), galactose (7.7%), minaose (2.0%) and fructose (1.0%).
Antitumor effect of LC43, a protein-bound ploysaccharide (M.W. 43 kDa) that was purified from intergeneric protoplast fusant of Lentinus edodes and Coriolus versicolor, was elucidated against mouse sarcoma 180 cell in vitro and in vivo. By injecting LC43 into ICR mice bearing solid or ascitic sarcoma 180, tumor regression and survival rates were investigated. To examine the effects of LC43 on immunopotentiation activity. immunoorgan weight, B cell differentiation, T cell activity and macrophage activation were determined. LC43 showed antitumor effects against both solid tumor and ascitic tumor of sarcoma 180. It did not change significantly the immunoorgan weight but potentiated immune responses such as B cell differentiation and the release of superoxide anion from macrophages. These results suggest that the protein-bound polysaccharide of LC43 exhibited antitumor activities through the activation of immune-related cells and acted as an immunmodulator.
In this study, in an attempt to search for functional cosmetic ingredients from higher fungal, we have produced exopolysaccharides (GF-l, approximately carbohydrate 75%, protein 25%) and polysaccharide (GF-2) of mycelium extract, by submerged culture of Grifolafrondosa. For applications in anti-aging cosmetic field, we investigated the diverse biological activities. Antioxidant activity and inhibition of Matrixmetalloproteinases (MMPs) were investigated enzymatic assays by measuring the superoxide scavenging activity using xanthine-xanthine oxidase system and the proteolytic activity of MMPs using EnzChek Collagenase/Gelatinase kits, respectively. GF-l polysacchairde showed inhibition of superoxide radical by 90% at a concentration of 0.2% (w/v) and inhibition of collagenase by 45% at 0.2% (w/v). GF-2 polysaccharide of mycelium extract also exhibited good antioxidant activity. However, MMPs inhibition activity was relatively lower level compared to GF-l polysaccharides. The treatment of human dermal fibroblast (HDF) with GF-l and GF-2 polysaccharides increased the proliferation of fibroblast by approximately 23-25% at a concentration of 0.5% (w/v), also showed collagen synthesis increase in HDF by about 50% at 0.5% (w/v) compared to that of untreated control. We also report the moisturizing effects of polysaccharides in cosmetic products (O/W emulation) and its own ingredient, in vitro and in vivo. The GF-1 polysaccharide showed higher moisturizing ability than sodium hyaluronate, which is the most commonly used moisturizers ingredient. These results suggest the GF-l polysaccharide, protein-bound polysaccharide, may be used as an ingredient for new moisturizing and anti-aging cosmeceuticals.
분자량에 따라 다양한 생리활성을 나타내는 아가리쿠스 버섯에서 분리한 단백다당류를 이용하여 이들의 유동특성을 비교하였다. 막분리 및 분무건조된 단백다당류의 절대분자량은 SEC/MALLS로 분석하였는데, Cumulative weight fraction이 50%인 지점에서의 분자량은 SD-1,2와 3이 각각 $8.2{\times}10^3,\;9.6{\times}10^4\;5.9{\times}10^6 g/mol$로 나타났다. 분자량이 다른 SD-1, 2, 3용액 $3{\sim}7%$에 대하여 전단응력을 측정한 결과, 전단속도가 증가함에 따라 전단응력이 직선적으로 증가하였고, 농도가 증가할수록 비례적으로 전단응력이 높았으며 항복력은 거의 나타나지 않아의가소성 유체특성을 나타냄을 알 수 있었다. 분자량에 따른 영향을 비교해 볼 때 유동지수는 분자량이 증가함에 따라 감소하였으며, 점조도 지수는 분자량이 증가함에 따라 증가함을 알 수 있었다. 겉보기 점도의 온도의존성에 대한 활성화 에너지는 SD-2는 $3{\sim}5%$에서는 $16.61{\sim}18.87 kJ/kg.mol$로 증가하였고, $5{\sim}7%$에서는 $18.87{\sim}16.41 kJ/kg.mol$로 감소하였으며 SD-1과 3보다 활성화 에너지가 상대적으로 높았는데, 농도에 의한 의존성 보다는 온도에 의한 의존성이 큰 물질임을 알 수 있었다. 겉보기 점도에 대한 농도의 영향은 SD-1, 2와 3 모두에서 온도가 증가함에 따라 상수 $K_1$은 감소하였고, 기울기 A의 경우 SD-1과 3에서는 각각 $0.065 %^{-1}$에서 $0.036 %^{-1}$로, $0.081 %^{-1}$에서 $0.070 %^{-1}$로 감소하여 측정온도가 높아질수록 농도의존성은 낮아짐을 알 수 있었으며, 겉보기 점도에 대한 농도의 영향은 SD-3이 가장 크다는 사실을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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