Virus-induced gene silencing (VIGS) is an attractive reverse-genetics tool for studying gene function in plants. We showed that silencing of a phytoene desaturase (PDS) gene is maintained throughout TRV-PDS-inoculated tomato plants as well as in their flowers and fruit and is enhanced by low temperature ($15^{\circ}C$) and low humidity (30%). RT-PCR analysis of the PDS gene revealed a dramatic reduction in the level of PDS mRNA in leaves, flowers and fruits. Silencing of PDS results in the accumulation of phytoene, the desaturase substrate. In addition, the content of chlorophyll a, chlorophyll b and total chlorophyll in the leaves of PDS-silenced plants was reduced by more than 90%. We also silenced the LeEIN2 gene by infecting seedlings, and this suppressed fruit ripenning. We conclude that this VIGS approach should facilitate large-scale functional analysis of genes involved in the development and ripening of tomato.
Kim, Dalsoo;Lee, Jaeho;Choi, Woobong;Hwang, Changil;Cho, Namgyu;Choi, Sang-Bong
Research in Plant Disease
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v.25
no.1
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pp.29-32
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2019
Burcucumber (Sicyos angluatus) is a representative ecosystem-disturbing plant in Korea and currently widely spread throughout the country. A sclerotia-forming fungus with moderate host selectivity, Sclerotinia trifoliorum BWC98-105, was tested in the laboratory, green house and natural habitat for its pathogenicity to burcucumber. When mycelial culture fragment was inoculated to burcucumber seedlings under the green house condition, mycelial growth was observed in the following day, and then resulted in the onset of wilting from 5 days after inoculation (DAI). Its characteristic sclerotia as a sign was observed from 7 DAI, and thus plants turned into dark-brown color at the bottom of stem of burcucumber that was eventually blighted at 14 DAI. Similar visible symptoms were observed in natural habitat. Based on the results of showing typical blight symptom to burcucumber and the sign of sclerotia, we report S. trifoliorum BWC98-105 causing stem blight against burcucumber. Its globular pellet was considered of having quite potential as a bioherbicide to control burcucumber in Korea.
Shinhwa Kim;Soo Yeon Choi;Hyunjung Chung;Nak Jung Choi;Bo Yoon Seo;Sang-Min Kim
The Korean Journal of Mycology
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v.52
no.1
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pp.55-60
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2024
In August 2023, leaf spot disease was observed in peanuts in Cheongju-si, Korea. Leaf spots occurred at the leaf margins and the lesions gradually expanded. Diseased leaf areas were light or dark brown and irregular in shape. A fungal isolate was obtained from symptomatic leaf and cultured on potato dextrose agar (PDA) medium at 25℃. An isolate was identified as Colletotrichum sojae based on morphological characteristics and sequences of the internal transcribed spacers, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, chitin synthase-1, actin, and 𝛽-tubulin genes. Pathogenicity tests were performed on peanut seedlings in a conidial suspension (1×106 conidia/mL). Lesions were observed on the peanut leaf 5 d after inoculation. The pathogen was re-isolated from the lesions of the inoculated leaves. To the best of our knowledge, this is the first report of anthracnose on peanut caused by C. sojae in Korea.
The objective of this study was to elucidate the tolerance of woody plants to simulated acid rain in relation to mycorrhizal inoculation. Germinating seedlings of Robinia pseudoacacia were planted in 1I pots with autoclaved soil mixture of vermiculite, sand and nursery soil at 1:1:1 ratio. Each pot was inoculated with both crushed root nodules from a wild tree of the same species and commercial arbuscular mycorrhizal inoculum of Glomus intraradices at the time of planting the seedlings. Simulated acid rains at pH 2.6, 3.6, 4.6, and 5.6 were made by mixing sulfuric acid and nitric acid at 3: 1 ratio. Each pot received nutrient solution without N and P, and was also supplied with 180 ml of the one pH level of the acid rains once a week for 50 days. The plants were grown in the green house. At the end of experimental period, plants were harvested to determine contents of chlorophyll, mineral nutrients and net photosynthesis in the tissues, dry weight of the plants, and mycorrhizal infection in the roots. Mycorrhizal infection rate was significantly reduced only at pH 2.6, which meant vitality of G intraradices was inhibited at extremely low pH. Height growth, dry weight production, nodule production and chlorophyll content were increased by mycorrhizal infection in all the pH levels except pH 3.6. Particularly, mycorrhizal inoculation increased root nodule production by 85% in pH 5.6 and 45% in 4.6 treatments. But the stimulatory effect of mycorrhizal inoculation on nodule production was reduced at pH 3.6 and 2.6. Net photosynthesis was increased by mycorrhizal infection in all the pH levels. The phosphorus(P) content in the tissues was increased by 43% in average by mycorrhizal inoculation, which was statistically significant except in pH 2.6. It was concluded that mycorrhizal inoculation of Robinia pseudoacacia would enhance growth and resistance of the plants to acid rain by improving the photosynthesis, phosphorus nutrition, and more nodule production.
Lee, Won Jeong;Lee, Ji Hyun;Jang, Kyoung Soo;Choi, Yong Ho;Kim, Heung Tae;Choi, Gyung Ja
Horticultural Science & Technology
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v.33
no.1
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pp.70-82
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2015
This study was conducted to establish an efficient screening system to identify melon resistant to Fusarium oxysporum f. sp. melonis. F. oyxsporum f. sp. melonis GR was isolated from infected melon plants collected at Goryeong and identified as F. oxysporum f. sp. melonis based on morphological characteristics, molecular analyses, and host-specificity tests on cucurbits including melon, oriental melon, cucumber, and watermelon. In addition, the GR isolate was determined as race 1 based on resistance responses of melon differentials to the fungus. To select optimized medium for mass production of inoculum of F. oxysporum f. sp. melonis GR, six media were tested. The fungus produced the most spores (microconidia) in V8-juice broth. Resistance degrees to the GR isolate of 22 commercial melon cultivars and 6 rootstocks for melon plants were investigated. All tested rootstocks showed no symptoms of Fusarium wilt. Among the tested melon cultivars, only three cultivars were susceptible and the other cultivars displayed moderate to high resistance to the GR isolate. For further study, six melon cultivars (Redqueen, Summercool, Superseji, Asiapapaya, Eolukpapaya, and Asiahwanggeum) showing different degrees of resistance to the fungus were selected. The development of Fusarium wilt on the cultivars was tested according to several conditions such as plant growth stage, root wounding, dipping period of roots in spore suspension, inoculum concentration, and incubation temperature to develop the disease. On the basis of the test results, we suggest that an efficient screening method for melon plants resistant to F. oxysporum f. sp. melonis is to remove soil from roots of seven-day-old melon seedlings, to dip the seedlings without cutting in s pore s uspension of $3{\times}10^5conidia/mL$ for 30 min, to transplant the inoculated seedlings to plastic pots with horticulture nursery media, and then to cultivate the plants in a growth room at 25 to $28^{\circ}C$ for about 3 weeks with 12-hour light per day.
A new resistant cabbage variety 'CT-171' to Fusarium wilt was bred by crossing $A337MSBC_5$ with resistance to the disease and 397-$G_6$ with good density and color. 'CT-171' was selected after combining ability, seed gathering and regional adaptability test in 2008. For breeding of resistant varieties, we investigated the development of Fusarium wilt on cabbage seedlings inoculated with Fusariumoxysporum f. sp. conglutinans by root dipping inoculation method. As a result, 'CT-171' showed higher resistance to Fusarium wilt than 'Asiaball' used as control. The maturity of new variety was 58 days and was faster than control and well suited for autumn cultivation because of cold resistance. The anthocyanin pigment of plant was not revealed. The weight, height and width of head were 1.5 kg, 14 cm and 15 cm, respectively and the core size was 5.7 cm and stable in various cultivation environments. 'CT-171' which showed good agricultural character and resistance to Fusarium wilt filed for variety protect right in Korea Seed & Variety Service on February 2013. The new variety will be appropriate for export and domestic consumption.
To research the effect of chemotaxis of Rhizobia toward the root exudate on nitrogen fixing ability in soybean Rhizobia symbiosis system. Root exudate from seedlings of Glycine max. L was collected aseptic conditions. B. japonicum KCTC 2422 induced the formation of symbiotic nitrogen fixing nodules on the root of soybean plant and possessed motility and chemotaxis toward the 2mM proline. LPN-100 mutant was $Nod^-$, $Che^+$, and LPN-101 was $Che^-$, $Nod^+$ strains. Physiological properties of mutants were similar to parent strain. The crude root exudate was tested for its chemotactic ability using the capillary tube method. Chemotactic responses of RCR 3407 toward crude root exudate were 2.2, 2.6, 2.9, those of KCTC 2422 were 2.3, 2.9, 3.0, respectively. The crude root exudate was fractionated into neutral, cationic and anionic fractions. Chemotactic responses of KCTC 2422 was least with anionic fraction, most with neutral and intermediate with cationic fraction. B. japonicum KCTC 2422 was attracted by carbohydrates, amino acids and carboxylic acid. Carbohydrates and amino acids were good chemoattractants and carboxylic acids were intermediate chemoattractants. The peak concentration was $10^{-3}M$ for ribose, glucose, glutamine, aspartic acid and carboxylic acids, with exception of xylose, arabinose, tryptophan, which elicited maximum responses at $10^{-4}M$. The formation of nodules and nitrogenase activity of soybean inoculated with KCTC 2422 was determined in 7days after inoculation, and those of LPN-101 was detected in 15days after inoculation, but LPN-100 didn't form of nodules in soybean plants.
The growth of germ tube of Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum was remarkably inhibited on the water agar treated with 100ppm of Fe-EDDHA, a synthetic iron chelating agent, whereas germination rate of microconidia did not show much differences compare with that of non treated water agar. Both of the germination and the germ tube elongation of microconidia were suppressed significantly in King's B agar by the bacterial siderophores produced by Pseudomonas putida. The highest germination of the chlamydospores was obtained in the soil added with $0.25\%$ of glucose plus $0.05\%$ of asparagine. The chlamydospores of cucumber wil fungus germinated about $14\%$ in rhizosphere soil of 2 day-old cucumber seedlings within 48 hours, and the germination was enhanced notably in rhizosphere soil of 10 day-old seedling. But the rates of germination was not increased according to cucumber growth age after 10 day-old seedling. The effect of P. putida and Fe-EDDHA on the germination on chlamydospores in conducive soil was not pronounced in the non-rhizosphere soil added with nutrient. However, the germination was suppressed significantly both in rhizosphere soil and in rhizosphere soil added with nutrient. The suppression of chlamydospore germination was greater in the bacteria inoculated soil than that in Fe-EDDHA treated soil.
Anthracnose disease caused by Colletotrichum orbiculare, induces severe damage to cucurbits worldwide. Resistance of 112 commercial cultivars of cucurbits to C. orbiculare was evaluated. Seedlings of each cultivar at 2- to 3-leaf stage were inoculated with C. orbiculare KACC 40809 by spraying spore suspension of the fungus at a concentration of $4.0{\times}10^5$ spores/mL. Among the 36 cultivars of cucumber, 'Asiastrike', 'Tongilbaedadagi', 'Daeseon', 'Cheongrokmatjjang', 'Nokyacheongcheong', and 'Asianogak' were moderately resistant and the others were susceptible. All the tested cultivars of melon (33) and watermelon (4) showed highly susceptible response to C. orbiculare. On the other hand, the squash cultivars (17) represented less susceptibility to the fungus than the other cucurbits. Of the squash cultivars, 'Gammirak' and 'Teotbat' were resistant and 12 cultivars were moderately resistant. Among the rootstocks for cucurbits, ten cultivars including 'JjeuyakaEX', 'Nunbusyeo', 'Union', 'RS111', 'Ganggeuntoza', 'Hwangjaetoza', 'NO.8', 'Shintoza', 'Bulpaetoza', and 'Newtype' showed high resistance to the anthracnose pathogen. From the results, the resistant cultivars could be used as sources of resistance to cucurbits anthracnose (C. orbiculare) in the future breeding programs.
An isolate of the indigenous fungus Pythium myriotylum was isolated from Monochoria vaginalis in Yusung, Korea in year 2000 and evaluated potential as a biocontrol agent in laboratory and greenhouse. P. myriotylum MD2 grew in a wide range of temperature regimes and the optimal growth temperature was $35^{\circ}C$. The fungus was highly pathogenic to Monochoria vaginalis at 30 to $35^{\circ}C$. Several weeds such as Rotala, indica, Lindernia procumbens, Ludwigia prostrata, Cyperus difformis, Scirpus juncoides, Aneilema keisak were also susceptible to the fungus, but Echinochloa crus-galli was not. The fungus affected the growth of rice seed germinated, but not to rice seedlings of 1- to 3-leaf stage. A total of 12 rice cultivars (3- to 4-leaf stage) tested showed no disease symptoms when inoculated with the fungus. Eleven crops, including Chinese cabbage, corn, soybean except wheat were immune to the infection of the fungi. These data suggest that P. myriotylum MD2 has a potential as a mycoherbicide to control weeds in paddy fields.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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