To understand the effects of lower pH levels due to elevated $CO_2$ and salinity, we designed and constructed a pH-control system that included automatic $CO_2$ infusion and measured the hatching rate of a crustacean model species, Artemia franciscana. The pH-control system was cost-effective and capable of performing animal tests in which pH fluctuated around $8.0{\pm}0.1$, with the temperature around $27{\pm}0.5^{\circ}C$. Hatching rate was observed under four different pH levels (7.0, 7.3, 7.6, and untreated control) combined with three salinity ranges (15, 25, and 35 ppt). The results demonstrated that lower pH levels led to decreased hatching rates regardless of salinity, and the minimum hatching rate was detected at pH 7.0 compared to the control (pH $8.0{\pm}0.1$), supporting the idea that OA has adverse effects on hatching rates and increases the risk of juveniles being introduced in the ecosystem. In contrast, salinity changes exhibited no synergistic effects with pH and had independent effects.
Pacific herring Clupea pallasii eggs were attached to the gill net in Korean coastal waters off Busan. To conservation and management the eggs attached to the gill net, we followed the natural hatching in coastal waters from five days after fertilization to the hatching finished, where the temperature was $9^{\circ}C$. The diameter of fertilized eggs was 1.24-1.55 mm (n= 50), and had a segmented pale yellow yolk, no oil globule. Natural hatching had started by 10 days after fertilization. Mass hatching occurred around 11-12 days after fertilization, most of eggs separated from the gill net. Therefore, when the Pacific herring eggs attached in gill net, should be natural hatching-induced in coastal waters during 12-14 days.
This study was performed to investigate the effect of laser-assisted hole in the zona pellucida (ZP) of frozen-thawed ICR mouse embryos on the process of hatching that is critical for expanded blastocysts to implant into endometrium, Vitrification medium, composed of ethylene glycol and sucrose supplemented with 7.5% (w/v) PVP, was used to freeze $2{\sim}4$ cell stage embryos recovered from oviducts of superovulated and mated female mice before storing them in $LN_2$. Right after thawing them, a laser beam was shot to make a hole in ZP followed by culturing in KSOM for $96{\sim}120\;hr$ and examining development to blastocyst and hatching every 12 hr. Laser-treated embryos showed significantly higher hatching rate compared to control (92.9% vs. 22.1%, p<0.05). From around Day 4, blastocysts developed from laser-treated embryos started hatching while the blastocysts of control group failed to hatch showing a lot of shrinkage. This study shows that a laser-assisted hole in ZP improves the hatching rate of blastocysts developed from frozen-thawed, in vitro cultured ICR mouse embryos.
염산 제조과정에서 생성될 가능성이 있는 협잡물이나 침산과정에서 혼합될 수 있는 혼합물이 침산방법에 의한 가잠의 인공부화에 어떠한 영향을 미치는 가를 조사한 결과 철, 수은, 연, 비색 등은 부화에 별다른 영향이 없었으나 아황산(SO$_3$)과 유리염소(Cl)는 대단히 유해한 것으로 밝혀졌다. 따라서 침산시 염산을 5$0^{\circ}C$로 가열하여 각종 유해 개스를 제거할 후 사용하는 것이 좋으며 보다 안전한 인공부과를 기하기 위해서는 여러가지 염산표준액을 만들어 예비침산을 행한 후 본침산을 하는 것이 바람직하다.
Lee, Young Seok;Park, Min Jung;Park, Sea Hee;Koo, Ja Seong;Moon, Hwa Sook;Joo, Bo Sun
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제42권2호
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pp.51-57
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2015
Objective: This study aimed to examine the effect of laser-assisted zona thinning (LAZT) at one or four-points on the blastocyst formation and hatching process in mice with respect to female age. Methods: Eight-cell or morula embryos collected from superovulated C57BL female mice with different ages (6-11 and 28-31 weeks) were treated with LAZT at one-point (LAZT1) or four-points (LAZT4). The zona pellucida was thinned to more than 70% of its initial thickness by making two holes of $15-20{\mu}m$. Results: In the young mice, LAZT resulted in a significant increase in early hatching and hatching rates compared to the control group (p<0.05). However, in the old mice, LAZT significantly increased blastocyst formation as well as early hatching and hatching compared to the controls (p<0.05). These effects were more remarkable in LAZT4 than in LAZT1 and in aged mice than in young ones. Conclusion: These results show that multi-point LAZT leads to a significant improvement of blastocyst formation and hatching in mice compared to controls.
한국산 rotifer, Brachionus plicatilis 내구란의 부화에 미치는 온도($24\~36^{\circ}C$)와 염분($5{\~}30$ ppt)의 영향을 조사하였다. 가장 높은 내구란의 부화율은 $28^{\circ}C$, 15 ppt에서 $85.7{\%}$로 나타났다. 온도 $32^{\circ}C(42.6\~60.5\%)$와 $36^{\circ}C(52.0\~61.4\%)$에서는 염분과 수온에 따른 부화율은 유의적인 차이를 보이지 않았다. 부화시간은 온도가 높을수록 짧게 나타났다. $5^{\circ}C$ 암흑상태로 내구란을 보존할 경우 2일 동안 일시적으로 부화하였다. 그러나 $28^{\circ}C$ 내구란을 보존한 경우, 14일 동안 산발적으로 부화하였다. 또한 부화율은 $28^{\circ}C(58.1\%)$가 $5^{\circ}C(40.2\%)$ 보다 높게 나타났다. 내구란의 건조온도가 시간에 따른 부화율은 $30^{\circ}C$에서 1시간동안 건조한 내구란이 $46.4{\%}$로 가장 높은 부화율을 보였다.
대구 부화자어 대량방류를 위한 기초 연구로서 대용량 부화기를 이용한 대구 수정란 부화 방법을 검토하였다. 기존의 용량 15L와 시험용 42L인 부화기에 수정란을 수용한 결과 9일째 생존율이 48.3%와 50.4%로 나타나 부화기 용량차이에 따른 생존율은 유의한 차이가 없었다. 제작한 실험 부화기와 기존의 원형수조에서 수정란 생존율을 비교한 결과 40.0~71.2%로 부화기에서 높아 대구 수정란 부화에 실험 부화기가 효율적인 것으로 사료된다. 또한 42 L 부화기에 수정란 5,000 mL (약 825만 개)를 수용하여도 높은 부화율을 유지하였다. 결과적으로 대구 수정란 부화 시 대용량 부화기를 이용할 경우, 고밀도로 수용하여도 높은 수정란 생존율 유지가 가능하고 사육 공간과 인력 및 경비를 절감할 수 있을 것으로 생각된다. 또한 원형수조에 비하여 사육수 절약 (6,700 mL/min)과 수정란 그룹별 수용이 가능하다는 장점이 있다.
부화 및 착상에서 prostaglandins의 역할에 대한 연구는 많으나 배아단계에 따라 포배의 팽창과 부화에 미치는 영향에 대한 연구는 미미하다. 따라서 본 실험에서는 다양한 농도의 prostaglandins를 발생단계에 따라 처리하거나, indomethacin과 prostaglandins의 양 변화를 통해 팽창과 부화에 미치는 영향을 알아보고, 배아 단계별 PG $E_2$와 PG $F_2$$_{\alpha}$의 생합성양 변화양상을 알아보았다. 100$\mu$M이 상 농도의 PG $E_2$처리시 거의 모든 상실배가 퇴화하는 유해성을 보이나 PG $F_2$$_{\alpha}$에 있어서는 관찰되지 않았다. PG $E_2$나 PG $F_2$$_{\alpha}$ 모두에서 배아의 부화를 억제하지만 팽창포배로의 발생은 대조군과 유사하였다. hCG 주사 후 84시간과 96시간 단계 배아에 처리한 경우 부화율이 전반적으로 감소하는 경향을 보였으나 팽창포배로의 발생은 대조군과 유사하였고 PG $E_2$에 의한 세포독성은 발생단계가 높을수록 감소되었다. 한편 배아 단계와 관련없이 PG $F_2$$_{\alpha}$의 농도가 높아짐에 따라 부화가 억제되었다. Indomethacin과 PG $E_2$나 PG $F_2$$_{\alpha}$를 함유한 배양액에서 각 단계의 배아를 배양할 경우 prostaglandins를 단독으로 처리한 경우보다 부화율이 증가하였다. 한편 PG $E_2$의 경우 낮은 농도에서 부화율이 대조군 수준으로 증가하였다. 한편 PG $E_2$ 합성은 발생단계에 따라 급격히 증가한 반면 PG $F_2$$_{\alpha}$는 점진적인 증가를 보였다. 이상의 결과에서 PG $E_2$에 의한 세포독성은 배아 단계가 높아질수록 감소하고, 고농도의 PG $F_2$$_{\alpha}$는 배아의 부화를 억제하였으며, 발생 단계에 따라 prostaglandins의 요구 양이 다름을 알 수 있다. 또한 상실기 이후 배아에서 합성되며, 발생시기에 따라 그 영향이 다르고 팽창과 부화에 관여하는 것으로 사료된다.생 단계에 따라 prostaglandins의 요구 양이 다름을 알 수 있다. 또한 상실기 이후 배아에서 합성되며, 발생시기에 따라 그 영향이 다르고 팽창과 부화에 관여하는 것으로 사료된다.
Exposure experiments during the egg development were conducted to assess the influences of 5 different concentrations (0, 25, 50, 75 and 100%) of water-soluble fraction (WSF) of Kuwait crude oil on the eggs and larvae of black seabream (Acanthopagrus schlegeli), red seabream (Pagrus major) and olive flounder (Paralichthys olivaceus). All experiments were triplicated. Hatching time and hatching rate were examined on the eggs. The median lethal time ($LT_{50}$), morphological abnormality and swimming activity (swimming frequency and speed) of larvae were also investigated. The time and rate of egg hatching were not significantly influenced by WSF on the eggs of the fishes. The larvae exposed to WSF during the egg development were also not significantly influenced on the $LT_{50}$ and swimming activity. But the higher morphological abnormalities of notochord were observed from the larvae in 100% WSF exposure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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