Rajkamal, G.;Suresh, K.;Sugunadevi, G.;Vijayaanand, M.A.;Rajalingam, K.
BMB Reports
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제43권10호
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pp.664-669
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2010
The present study aimed to investigate the membrane stabilizing effect of Thymoquinone (TQ) on cell surface glycoconjugates and cytokeratin expression against DMBA induced hamster buccal pouch carcinogenesis. 0.5% DMBA painting (three times per week) in hamster buccal pouches for 14 weeks resulted in the formation of well developed oral squamous cell carcinoma. We observed 100% tumor formation with marked abnormalities of glycoconjugates status in tumor bearing hamsters as compared to control animals. Oral administration of TQ at a dose of 30 mg/kg body weight, to DMBA painted hamsters on alternate days for 14 weeks, reduced the tumor formation as well as protected the levels of cell surface glycoconjugates in DMBA painted hamsters. The present study thus suggests that TQ has potent chemopreventive efficacy as well as protected the abnormalities on cell surface glycoconjugates during DMBA induced hamster buccal pouch carcinogenesis.
본 논문에서는, MGrid 시스템과 이를 통한 응용 어플리케이션으로서 Glycoconjugates 시뮬레이션 데이타베이스 구축에 대한 연구를 소개한다. MGrid 시스템은 분자 시뮬레이션 계산 및 분석에 대한 그리드 서비스를 상호 운용 가능한 방법으로 제공하는 그리드 시스템이다. e-Glycoconjugates는 당접합체류의 분자 시뮬레이션을 수행하는 그리드 포털이다. 이 프로젝트는 MGrid 시스템을 통해 PDB와 같은 단백질 구조 데이타베이스 상에서 지금까지 알려진 2000 여개의 glycan chain들과 100 여개의 당접합체류에 대한 분자 시뮬레이션 데이타베이스 구축을 목표로 하고 있다. 본 논문에서는, MGrid 시스템의 목표와 시스템 아키텍처, 현재 시스템의 구현과 e-Glycoconjugates의 초기 결과를 기술하고자 한다.
Yi Zheng;Yunlong Si;Xuejiao Xu;Hongming Gu;Zhen He;Zihan Zhao;Zhangkai Feng;Jiyong Su;Kevin H. Mayo;Yifa Zhou;Guihua Tai
Journal of Ginseng Research
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제48권2호
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pp.202-210
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2024
Background: Panax ginseng Meyer polysaccharides exhibit various biological functions, like antagonizing galectin-3-mediated cell adhesion and migration. Galectin-8 (Gal-8), with its linker-joined N- and C-terminal carbohydrate recognition domains (CRDs), is also crucial to these biological processes, and thus plays a role in various pathological disorders. Yet the effect of ginseng-derived polysaccharides in modulating Gal-8 function has remained unclear. Methods: P. ginseng-derived pectin was chromatographically isolated and enzymatically digested to obtain a series of polysaccharides. Biolayer Interferometry (BLI) quantified their binding affinity to Gal-8, and their inhibitory effects on Gal-8 was assessed by hemagglutination, cell migration and T-cell apoptosis. Results: Our ginseng-derived pectin polysaccharides consist mostly of rhamnogalacturonan-I (RG-I) and homogalacturonan (HG). BLI shows that Gal-8 binding rests primarily in RG-I and its β-1,4-galactan side chains, with sub-micromolar KD values. Both N- and C-terminal Gal-8 CRDs bind RG-I, with binding correlated with Gal-8-mediated function. Conclusion: P. ginseng RG-I pectin β-1,4-galactan side chains are crucial to binding Gal-8 and antagonizing its function. This study enhances our understanding of galectin-sugar interactions, information that may be used in the development of pharmaceutical agents targeting Gal-8.
실내 환경 오염원으로 각종 암 발병과 관련이 있는 흡연이 피부 피지샘의 glycoconjugates에 미치는 영향을 lectin 조직화학으로 연구하였다. Sprague-Dawley계 수컷 흰쥐에 1일 1회 10분간 1일군, 2일군, 3일군 및 5일군으로 나누어 직?간접 흡연 방법으로 폭로시켜 피지샘 형태는 PAS 염색, 피지샘의 glycoconjugates 양상을 9종의 biotinylated lectin (DBA, SBA, PNA, BSL-1, WGA, RCA-1, UEA-1, Con A 및 LCA)으로 연구하였다. 대조군에 비해 흡연군에서는 피지샘꽈리의 크기 감소, 피지샘꽈리 상부의 파괴, 중앙부 피지세포의 공포화 및 미성숙 피지샘꽈리가 관찰되었다. 대조군에서 피지샘 glycoconjugates에는 염색성에 차이가 있으나 기저세포는 BSL-1, PNA 및 WGA에만 반응하고 BSL-1의 반응이 더 강하며, 피지세포는 PNA, WGA, Con A, BSL-1 및 SBA에만 반응하고 PNA 및 Con A의 반응이 더 강했다. 흡연군의 렉틴 반응에서 특이적인 변화가 관찰되었다. 흡연군의 피지샘 기저세포의 PNA 반응은 증가되었고, BSL-1는 감소되었다가 회복되었으며, WGA는 소실되었다. 피지세포의 Con A는 증가하였으나 PNA, BSL-1, WGA 및 SBA는 감소 또는 소실되었다. 대조군에 관찰되지 않던 흡연군의 미성숙 샘꽈리 PNA, on A 및 BSL-1이 반응하였으며 PNA 및 Con A의 반응이 더 현저하였다. 결론적으로 흡연은 피지샘의 형태 및 glycoconjugates 대사에 심한 영향을 미치는 것으로 사료된다.
발암물질인 NDMA 17m/kg을 경구 투여했을 때 흰쥐설 von Ebner선과 설 점액선의 glycoconjugates에 미치는 영향을 prelectin 조직화학법인 PAS반응, AB pH 2.5 염색법, AB pH 0.4 염색법, AB pH 2.5 -PAS 염색법, AF pH 1.7-AB pH 2.5 염색법 및 HID-AB pH 2.5 염색법으로 연구하였다. NDMA 투여군의 설 von Ebner선의 형태적인 주된 변화는 장액선포의 위축 및 파괴, 장액세포의 세포질 과립의 감소 및 소실, 세포질의 공포변성 그리고 도관상피세포의 점액화였으며 NDMA 투여후 12시간군부터 72시간군까지 현저하였다. NDMA 투여군의 설점액선의 주된 형태적 변화는 점액선포의 확장, 융합, 파괴 및 점액세포의 세포질의 과립 소실 및 공포변성, 도관상피의 점액화 등이었으며 NDMA 투여후 12시간군부터 72시간군까지 현저하였다. 설 von Ebner선의 neutral glycoconjugates가 대조군에 비해 NDMA 투여후 12시간군과 72시간군에서 현저히 감소되었으며 NDMA 투여후 96시간군후에 회복되는 경향을 나타내었다. 대조군에서 나타나지 않던 acidic glycoconju-gates가 NDMA 투여후 6시간군부터 48시간군, 그리고 120시간군에서 약간의 장액세포들에서 나타났다. 설 점액선의 neutral glycoconjugates와 acidic glycocon-jugates가 대조군에 비해 NDMA 투여후 3시간군, 24시간군, 48시간군에서 다같이 현저히 감소되었으며, 후자는 NDMA 투여후 72시간군에 아주 현저히 감소하였다. Aci-dic glycoconjugates중 sulfated glycoconjugates는 대조군에 비해 NDMA 투여후 감소하는 경향을 나타내며 NDMA 투여후 72시간군에 가장 현저한 감소를 나타내는데 비해 sialic glycoconjugates는 NDMA 투여후 3시간군, 12시간 군 및 48시간군에서 증가하는 경향을 나타내었다.
Ulex europaeus agglutinin I(UEA I), succinylated wheat germ agglutinin(sWGA), Griffonia simplicifolia lectin-I(GSL-I)을 이용하여 생쥐 부정소 조직내 당쇄의 분포를 조사하였다. 당쇄의 측쇄 말단의 $\alpha$-L-fucose 잔기에 특이적으로 결합하는 UEA I은 체부 및 미부 부정소를 제외한 두부 부정소 선단의 세정관 상피를 강하게 표지하였으나 관강은 중간 정도의 강도로 모두 표지되어 $\alpha$-L-fucose 잔기를 갖는 부정소 항원들은 부정소 선단부에서 주로 합성된 후 분비되는 것으로 추정된다. 이와 반대로 당쇄 말단의 $\alpha$-D-galactose 잔기에 특이적으로 결합하는 GSL-I은 두부 부정소를 제외한 체부와 미부 부정소 상피의 투명세포의 세포질과 섬모 및 기저세포를 표지하였다. 다당 사슬 및 복잡한 구조를 갖는 glycan의 당쇄의 N-acetyl-giucosamine 잔기에 특이적으로 결합하는sWCA는 부정소 부위별로 커다란 차이를 보이지 않았으나, 체부와 미부 부정소의 투명세포는 주세포에 비해 더 강하게 표지되어 sWGA 표지는 투명세포 기능분화의 표식자로 추측된다. UEA I 및 sWGA에 의한 관강의 표지 강도는 체부보다는 미부에서 약하게 관찰되어 미부 부정소 관강내에 $\alpha$-L-fucose 및 N-acetyl-glucosamine 잔기의 절단과 관련된 효소활성이 존재하는 것으로 추정된다. 요약하면 $\alpha$-L-fucose, $\alpha$-D-galactose, N-acetyl-glucosamine 잔기를 갖는 당쇄의 분포가 상피세포의 종류 및 부정소의 길이를 따라 차이를 보임을 확인하였다. 이는 정자의 성숙을 조절하는 부정소 각 절편 및 특정 절편 내 소관상피 세포의 기능적 분화를 대변하는 것으로 사료된다.
Luteolin (LUT), a bioflavonoid has been used as a chemopreventive agent world-wide against chemically induced cancer. Hence we designed an experiment to assess chemopreventive action of LUT on lipid peroxidation (LPO) and glycoconjugates in azoxymethane (AOM)-induced colon carcinogenesis. Colon cancer was induced by 15 mg/body kg. body weight of AOM and administration of LUT (at the dose of 1.2 mg/kg. body weight) was till end of the study. Analysis of lipid peroxidative end products such as protein carbonyl (PC), malonadehyde (MDA) and conjucated dienes (CD) demonstrated significant increase in in AOM-induced animals with reduction by LUT (p<0.05). Increased levels of glycoconjugates such as hexose, hexosamine, sialic acid, fucose and mucoprotein were analyzed in serum and colon tissues examined histopathologically by periodic acid Schiff's (PAS) staining were also reversed by LUT l(p<0.05). The secondary marker of colon cancer mucin depleted foci (MDF) was assessed in control and experimental group of animals. A characteristic increase of MDF was observed in AOM-induced colon cancer animals. Treatment with LUT decreased the incidence of MDF. These results suggest that LUT alters the expression of glycoconjugates and suppress colon cancer. Hence, we speculate that LUT can be used as a chemopreventive agent to treat colon cancer.
Lee, Jong Hwa;Choi, Eun Sili;Oh, Kyu Seon;Lee, Dong Wook;Chang, Jeong Hyun;Um, Kyung Il
Animal cells and systems
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제4권3호
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pp.293-297
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2000
The present investigation was performed to elucidate the effect of pretreatment with low dose ultraviolet radiation (UV) and ethyl methanesulfonate (EMS) on cell survival by trypan blue dye exclusion method and plasma membrane glycoconjugates by lectin-cytochemistry in sarcoma 180 (S180) cells. Pretreatment with 2 J/$m^2$ UV or 2 mM EMS increased the percentage of survival of cells subsequently treated with high dose UV (10 or 20 J/$m^2$) or EMS (10 or 20 mM), respectively. Staining intensity of concanavalin A (Con A) of the cells pretreated with 2J/$m^2$ UV or 2 mM EMS and subsequently treated with 10 or 20 mM EMS was stronger than that of the cellstreated with 10 or 20 mM EMS. These results suggest that there is an adaptive response on cell survival to EMS or UV in S180 cells. And the results show a change in mannose-containing glycoconjugates of plasma membrane in S180 cells pretreated with EMS or UV and subsequently treated with EMS.
Arabinogalactans have diverse biological properties and can be used as pharmaceutical agents. Most arabinogalactans are composed of β-(1→3)-galactan, so it is particularly important to identify β-1,3-galactanases that can selectively degrade them. In this study, a novel exo-β-1,3-galactanase, named PoGal3, was screened from Penicillium oxalicum sp. 68, and hetero-expressed in P. pastoris GS115 as a soluble protein. PoGal3 belongs to glycoside hydrolase family 43 (GH43) and has a 1,356-bp gene length that encodes 451 amino acids residues. To study the enzymatic properties and substrate selectivity of PoGal3, β-1,3-galactan (AG-P-I) from larch wood arabinogalactan (LWAG) was prepared and characterized by HPLC and NMR. Using AG-P-I as substrate, purified PoGal3 exhibited an optimal pH of 5.0 and temperature of 40℃. We also discovered that Zn2+ had the strongest promoting effect on enzyme activity, increasing it by 28.6%. Substrate specificity suggests that PoGal3 functions as an exo-β-1,3-galactanase, with its greatest catalytic activity observed on AG-P-I. Hydrolytic products of AG-P-I are mainly composed of galactose and β-1,6-galactobiose. In addition, PoGal3 can catalyze hydrolysis of LWAG to produce galacto-oligomers. PoGal3 is the first enzyme identified as an exo-β-1,3-galactanase that can be used in building glycan blocks of crucial glycoconjugates to assess their biological functions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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