Oxidative stress and methylglyoxal (MG), a reactive dicarbonyl metabolites produced by enzymatic and non-enzymatic reaction of normal metabolism, induced aldose reductase (AR) expression in rat aortic smooth muscle cells (SMC). AR expression was induced in a time-dependent manner and reached at a maximum of 4.5-fold in 12 h of MG treatment. This effect of MG was completely abolished by cyclohemide and actinomycin D treatment suggesting AR was synthesized by de novo pathway. Pretreatment of the SMC with N-acetyl-L-cysteine significantly down-regulated the MG-induced AR mRNA. Furthermore, DL-Buthionine-(S,R)-sulfoximine, a reagent which depletes intracellular glutathione levels, increased the levels of MG-induced AR mRNA. These results indicated that MG induces AR mRNA by increasing the intracellular peroxide levels. Aminoguanidine, a scanvenger of dicarbonyl, significantly down-regulated the MG-induced AR mRNA. In addition, the inhibition of AR activities with statil, an AR inhibitor, enhanced the cytotoxic effect of MG on SMC under normal glucose, suggesting a protective role of AR against MG-induced cell damages. These results imply that the induction of AR by MG may contribute to an important cellular detoxification of reactive aldehyde compounds generated under oxidative stress in extrahepatic tissues.
International Journal of Vascular Biomedical Engineering
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제2권2호
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pp.1-9
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2004
The history of studies in biology regarding reactive oxygen species (ROS) is approximately 40 years. During the initial 30 years, it appeared that these studies were mainly focused on the toxicity of ROS. However, recent studies have identified another action regarding oxidative signaling, other than toxicity of ROS. Basically, it is suggested that ROS are reactive, and degenerate to biomolecules such as DNA and proteins, leading to deterioration of cellular functions as an oxidative stress. On the other hand, recent studies have shown that ROS act as oxidative signaling in cells, resulting in various gene expressions. Recently ROS emerged as critical signaling molecules in cardiovascular research. Several studies over the past decade have shown that physiological effects of vasoactive factors are mediated by these reactive species and, conversely, that altered redox mechanisms are implicated in the occurrence of metabolic and cardiovascular diseases ROS is a collective term often used by scientist to include not only the oxygen radicals($O2^{-{\cdot}},\;{^{\cdot}}OH$), but also some non-radical derivatives of oxygen. These include hydrogen peroxide, hypochlorous acid (HOCl) and ozone (O3). The superoxide anion ($O2^{-{\cdot}}$) is formed by the univalent reduction of triplet-state molecular oxygen ($^3O_2$). Superoxide dismutase (SOD)s convert superoxide enzymically into hydrogen peroxide. In biological tissues superoxide can also be converted nonenzymically into the nonradical species hydrogen peroxide and singlet oxygen ($^1O_2$). In the presence of reduced transition metals (e.g., ferrous or cuprous ions), hydrogen peroxide can be converted into the highly reactive hydroxyl radical (${^{\cdot}}OH$). Alternatively, hydrogen peroxide may be converted into water by the enzymes catalase or glutathione peroxidase. In the glutathione peroxidase reaction glutathione is oxidized to glutathione disulfide, which can be converted back to glutathione by glutathione reductase in an NADPH-consuming process.
The purpose of this study was to investigate the effect of dietary sea-tangle extracts on blood glucose levels, serum lipid levels, thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) and glutathione enzymes in diabetic rats treated with streptozotocin (STZ) Four groups of rats (Sprague-Dawley male rats, 180 - 200g) were consisted of normal rats fed control diet (C), diabetic rats fed control diet (CD), normal rats fed sea-tangl extracts diet (E), and diabetic rats fed sea-tangle extracts diet (ED). Diabetes was induced by single injection of streptozotocin (60 mg/kg B.W.). After 7 weeks, rats were sacrificed, serum glucose, serum total cholesterol, triglyceride levels and glutathione enzymes were measured. Urine was significantly higher in CD and ED groups than those of others (p < 0.05). Levels of amylase, calcium, uric acid, hemoglobin, cholesterol and low density lipoprotein (LDL)-cholesterol were different among four groups. But high density cholesterol (HDL)-cholesterol of ED group was significantly higher (p < 0.05) than other groups (C and E group) And the weekly change of serum glucose was decreased in the 3th,4th and 5th weeks. But serum triglyceride (TG) of diabetic rats fed sea-tangle extracts diet (ED) was lower than diabetic rats fed control diet (CD). Activity of hepatic microsomal G6Pase was significantly increased CD and ED groups higher than C and E group, but kidney was decreased ED group. Hepateic glutathione S-transferase (GST) of CD and ED group were significantly lower than C and E group (p<0.05), glutathione peroxidase (GPX) of E and ED group were significantly higher than C and CD group (p<0.05), glutathione reductase (GR) activities of ED group was significantly lower than other groups, malondialdehyde (MDA) of ED was lower than E and CD group, but kidney was increased significant in ED group compared to liver. These results suggested that dietary sea-tangle extracts reduce .hepatic disorders such as oxidant than kidney. In conclusion, dietary sea-tangle extracts groups reduced blood TG and hepatic MDA levels in STZ-induced diabetic rats.
The objectives of present study were to investigate the effects of benzo[a]pyrene(BaP) on cytotoxicity, lipid peroxidation and antioxidant enzymes in rat hepatocyte primary culture. Primary cultures of rat hepatocytes were incubated for 24 hr, 48 hr or 72 hr in the presence of various concentrations (0, 10, 20, 30, 50 or 100 $\mu.$ M) of BaP. Cytotoxicity and cell viability were determined by measuring glutamic oxaloacetic transaminase(GOT) activity, lactate dehydrogenase(LDH) activity and 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide(MIT) value. Lipid peroxidation was evaluated using thiobarbituric acid reactive substances(TBARS) assay. Effects on antioxidant system were determined by measuring glutathione peroxidase(GPx) activity, glutathione reductase(GR) activity and glutathione concentration. Activities of GOT and LDH, MTT value as well as TBARS concentration were not affected by up to 100 $\muM$ of BaP for 24 hr incubation. However, BaP at the concentration of 50 $\muM$ for 48 hr incubation or at the concentration of 30 $\muM$ for 72 hr incubation began to increase LDH activity and TBARS concentration but decrease MTT value, representing that BaP caused cytotoxicity and decreased cell viability in dose- and time-dependent manners. GPx activity began to be decreased by BaP at the concentration of 50 $\muM$ for 72 hr incubation. Whereas, GR activity began to be decreased by BaP at the concentration of 20 $\muM$ for 72 hr incubation. Glutathione concentration began to be decreased by BaP at the concentration of 20 $\muM$ for 72 hr incubation and was further reduced to 90% by 100 $\muM$ of BaP. These results demonstrate that BaP caused cytoctoxicity and decreased cell viability by increasing lipid peroxidation and decreasing glutathione concentration as well as activities of GPx and GR.
γ-Glutamylcysteine synthetase (Gcs1) and glutathione reductase (Glr1) activity maintains minimal levels of cellular methylglyoxal in Candida albicans. In glutathione-depleted Δgcs1, we previously saw that NAD(H)-linked methylglyoxal oxidoreductase (Mgd1) and alcohol dehydrogenase (Adh1) are the most active methylglyoxal scavengers. With methylglyoxal accumulation, disruptants lacking MGD1 or ADH1 exhibit a poor redox state. However, there is little convincing evidence for a reciprocal relationship between methylglyoxal scavenger genes-disrupted mutants and changes in glutathione-(in)dependent redox regulation. Herein, we attempt to demonstrate a functional role for methylglyoxal scavengers, modeled on a triple disruptant (Δmgd1/Δadh1/Δgcs1), to link between antioxidative enzyme activities and their metabolites in glutathione-depleted conditions. Despite seeing elevated methylglyoxal in all of the disruptants, the result saw a decrease in pyruvate content in Δmgd1/Δadh1/Δgcs1 which was not observed in double gene-disrupted strains such as Δmgd1/Δgcs1 and Δadh1/Δgcs1. Interestingly, Δmgd1/Δadh1/Δgcs1 exhibited a significantly decrease in H2O2 and superoxide which was also unobserved in Δmgd1/Δgcs1 and Δadh1/Δgcs1. The activities of the antioxidative enzymes erythroascorbate peroxidase and cytochrome c peroxidase were noticeably higher in Δmgd1/Δadh1/Δgcs1 than in the other disruptants. Meanwhile, Glr1 activity severely diminished in Δmgd1/Δadh1/Δgcs1. Monitoring complementary gene transcripts between double gene-disrupted Δmgd1/Δgcs1 and Δadh1/Δgcs1 supported the concept of an unbalanced redox state independent of the Glr1 activity for Δmgd1/Δadh1/Δgcs1. Our data demonstrate the reciprocal use of Eapx1 and Ccp1 in the absence of both methylglyoxal scavengers; that being pivotal for viability in non-filamentous budding yeast.
대두에서 수분스트레스시의 생화학적 변화를 확인하기 위하여 수분의 부족과 담수시의 항산화효소의 활성도 변화를 조사한 결과는 다음과 같다. Ascorbate peroxidase(APOX)의 활성은 수분부족 처리시에 은하콩에서는 4일째 까지는 완만한 증가를 보이다가 그 이후에는 급격히 감소하였고, 큰올콩에서는 완만한 감소를 보였다. 담수처리시 은하콩이 2일째까지 활성이 50%이상 증가하다가 점차 감소하는 경향이었다. 수분부족 처리시에 glutathione reductase 활성은 은하콩과 큰올콩 모두 급격한 감소를 보였으며, 처리후 5일째에 90%이상 감소하였고, 담수처리시에는 초기 4일(日)까지 계속적인 감소를 보이다가 그 이후에는 일정한 수준을 유지하였다. Dehy-drascorbate reductase 활성은 두품종 공히 4일(日) 이후에 급격하게 감소하는 경향이었으나 담수처리시 은하콩에서 2일째에 70%이상 증가하다가 그 이후에는 거의 일정(一定)한 수준을 유지하였다. Monodehydroascorbate reductase 활성은 은하콩의 경우는 4일째와 2일째에 각각 급격한 감소를 보이다가 그 이후에는 거의 일정하게 유지되었으며, 큰올콩은 수분부족 처리시에 완만한 감소를 보이나 담수처리시에는 활성변화가 거의 없었다. 아스코브산과 환원형 글루타치온의 함량은 수분부족 처리시 대조구에 비해 두 품종 모두 감소하였고, 담수 처리시는 4일째까지는 담수처리가 수분부족 처리보다 더 크게 감소하다가 그 이후에는 회복되었다.
Chitooligosaccharide (COS), as antioxidant, extensively applied to food and juice preservation. In the present study, influences of COS on vase life and ornamental value of cut roses were investigated. Results showed that vase life of cut roses treated by COS was longer 6.4 days than one of control and ornamental character of cut roses was improved effectively by COS. The increase of vase life and ornamental value were chiefly governed by that COS improved water absorption capacity of cut roses. Besides that, COS decreased the contents of superoxide anion and hydrogen peroxide and lowered the levels of malondialdehyde in turn during the senescence process of cut roses. That was because that COS not only enhanced activities of antioxidant enzymes glutathione reductase, but also improved reduced glutathione contents in petals of cut rose. Therefore, COS could be used in commercial preservatives to improve the longevity of cut roses.
Thioltransferase, also known as glutaredoxin, was purified from Chinese cabbage (Brassica campestris ssp. napus var. pekinensis) by a combination of ion-exchange chromatography and gel filtration. Its purity was confirmed by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and its molecular weight was estimated to be about 12,000 which is comparable with those of most known thioltransferases. The enzyme utilizes 2-hydroxyethyl disulfide, S-sulfocysteine, ${\alpha}-chymotrypsin$, insulin, and trypsin as substrates in the presence of reduced glutathione. The enzyme has Km values of 0.03-0.97 mM for these substrates. It appeared to contain dehydroascorbate reductase activity. The pH optimum of the enzyme was 8.5, when 2-hydroxyethyl disulfide was used as a substrate. It was greatly activated by reduced glutathione. Its activity was not significantly lost when stored at high temperature, indicating its thermostable character. It may play an important role in thiol-disulfide exchange in plant cells.
Melatonin, a chemical mediator produced in the mammalian pineal gland and several other organ, is a ubiquitously acting antioxidant. It has been shown to scavenge the hydroxyl radical (ㆍOH), singlet oxygen ($^1$O$_2$) and the peroxynitrite anion (ONOO-). In addition, melatonin reportedly stimulates a number of antioxidative enzymes including glutathione peroxidase, glutathione reductase and glucose-6-phosphate dehydrogenase. Antioxidative effect of melatonin in pharmacological and physiological level was investigated using hepatocarcinogen 2-nitropropane (2-NP) and pinealectornized (Px) rats, respectively. Lipid peroxidation (LPO) as indicated by malondialdehyde and 4-hydroxyalkenals and DNA damage as indicated by 8-hydroxydeoxyguanosine (8-OH-dG) induced by 2-NP were prevented by melatonin. The degree of LPO and DNA damage in Px rats were higher than those of intact old and young ones suggesting the removal of pineal gland resulted in higher accumulation of oxidative damage.
Antidiabetic treatment with tubers of Asparagus racemosus (Liliaceae) extract (l00 and 250 mg/kg body weight) for three weeks showed significant reduction in thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and glutathione reductase (GSH-R) in both liver and kidney. The treatment with A. racemosus significantly altered the glutathione (GSH) and GSH-R to be comparable with the control group. A. racemosus and glibenclamide treated rats showed decreased lipid peroxidation that is associated with increased activity of superoxide dismutase (SOD) and Catalase (CAT). The ability of A. racemosus on tissue lipid per oxidation and antioxidant status in diabetic animals has not been studied before. The result of this study thus shows that though, A. racemosus possesses moderate antidiabetic activity, but it exhibits potent antioxidant potential in diabetic conditions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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