Energy requirement of Rhode Island Red (RIR) hens was studied by comparative slaughter technique. Seventeen hens above 72 weeks of age were slaughtered in batches. Batch I consisted of 5 hens which were slaughtered initially. Batch II comprised of six hens, which were fed ad libitum broken rice (BR)-based diet for 18 days. Record of feed intake, number of eggs laid and egg weight during the period was kept. These hens were slaughtered and body energy content was determined. Egg energy was consisted as energy deposited. Batch III consisting of six hens which were fed varying quantity of diet for 15 days, were slaughtered similarly as hens of batch II. Regression equation (body weight to body energy) developed on batch I was applied to batch II and developed on batch II was applied to batch III hens, to find out initial body energy content of hens. Egg energy (EE) was calculated according to formula: EE (kcal) = -19.7 + 1.81 egg weight (g). Regressing metabolisable energy (ME) intake on energy balance (body energy change + egg energy), maintenance ME requirement of hens was found to be $119.8kcal/kg\;W^{0.75}/d$. Multiple regression of ME required for production on energy retained as protein and fat (body plus egg energy) indicated that RIR hens synthesize proteins with an efficiency of 85.5 and fat with an efficiency exceeding 100 percent on BR based diet.
In order to maximize the cell growth and the biosurfactant production by the Pseudomonas aeruginosa BYK-2(KCTC 18012P), in the fed-batch fermentation processes were performed varying the feeding medium concentrations and the feeding rate. Feel-batch culture was performed with the optimal agitation speed of 200rpm and the aeration rate of 0.67vvm in a 7L Jar fermentor containing 3L of modified medium and 2.0-2.5%(v/v) fish oil as a carbon source. Addition of fish oil(2.5mL/l00mL modified medium), when fish oil was depleted, the cell and biosurfactant concentration were 6.1g/L and 22.7g/L, respectively.
Utilization of yeast extract and formation of byproduct metabolite were investigated for hyperthermophilic archaeon Sulfolobus solfataricus (DSH 1617). In both batch and fed-batch cultivations of S. solfataricus, maximal cell density, {{{{ { NH}`_{4 } ^{ +} }}} ion production and pH change were highly dependent on the ratio of yeast extract to glucose in the medium. Variation of {{{{ { NH}`_{4 } ^{ +} }}}} ion level was identified as a major cause of pH change during cultivation, and acidification of culture broth was attributed to consumption of {{{{ { NH}`_{4 } ^{ +} }}}} ions rather than formation of acid byproducts. It was also observed that increase of {{{{ { NH}`_{4 } ^{ +} }}}} ion concentrations in the medium resulted in greater degree of growth inhibition.
To optimize the culture conditions for Beauveria bassiana 726, the effects of culture medium, pH, and temperature on mycelium and spore production were investigated. The optimum temperature and pH for the cultivation of B. bassiana 726 were 28 $^{\circ}C$ and 5.0, respectively. The optimized medium was composed of 1.0~2.0% total sugar from molasses, 0.5% corn steep liquor and 0.05% KH$_2$PO$_4$. In the cultivation of B. bassiana 726 with the optimum medium, the specific growth rate and substrate utilization were well-fitted with the proposed kinetic model in the shake flask and stirred tank reactor. When the fed-batch cultivation using carbon suorce, nitrogen source, and mineral salt as a feeding medium was compared with batch cultivation in stirred tank reactor, mycelium (12.7 g/L) and spore production (5.4$\times$$10^8/mL$) were enhanced up to 110% and 85%, respectively.
To examine the feasibility of the long-term production of the human granulocyte colony stimulating factor (hG-CSF) using the $_{L}-arabinose$ promoter system of Escherichia coli, flask relay culture and cyclic fed-batch culture were performed. In the flask relay culture, it was found that the pismid was maintained stably up to about 170 generations in an uninduced condition, whereby the cells could also maintain the capability of expressing hG-CSF expression were maintained stably up to at least 100 generations. In contrast, in the cyclid fed-batch culture, segregational plasmid instability was observed within about 4 generations after induction, even though the cell growth and hG-CSF production reached their maximum balues, 78.0 g/l of dry cell weight and 7.0 g/l of hG-CSF, respectively. It would appear that, when compared to the flask relay culture, the high-cell density and high-level expression of hG-CSF in the cyclic fed-batch cultrure led to the segregational plasmid instability; in other words, a severe metabolic burden existe on the cells due to the high-level expression of hG-CSF. Accordingly, based on these long-term cultures, the segregational and structural plasmid instability was observed and a strategy to overcome such problems could be designed.
Two low-salt complex media, bactopeptone and desalted yeast extract, were used for high density cultivation of the hyperthermophilic archaeon Sulfolobus solfataricus (DSM 1617). Bactopeptone, which has low mineral ion content among various complex media, was good for cell growth in batch cultures; the maximal cell density in bactopeptone was comparable to that in yeast extract. However, cell growth was rather poor when bactopeptone was added by the fed-batch procedure. Since several vitamins are deficient in abctopeptone, the effect of vitamins on cell growth was examined. Among the vitamins tested, pyridoxine was found to improve the growth rate of S. solfataricus. To reduce the growth inhibition caused by mineral ions, yeast extract was dialyzed against distilled water and then fed-batch cultures were carried out using a fed medium containing desalted yeast extract. Although the concentrations of mineral ions in yeast extract were significantly lowered by the dialysis whether low molecular weight solutes in yest extract are crucial for cell growth, we investigated the effect of trehalose, a most abundant compatible solute in yeast extract, on the growth pattern. Cell densities were increased and the length of the lag phase was markedly shortened by the presence of trehalose, indicating that trehalose plays an important role in the growth of S. solfataricus.
For the purpose of optimizing poly-l3-hydroxybutyrate (PHB) production from Alcaligenes eutrophus, two-stage fed-batch culture was adopted. In this system, specifk growth rate was maximized during the first stage whereas specific production rate was maximized during the second stage. The optimal concentrations of glucose and ammonium chloride were 16.6 and 0.54 g/I in the growth stage and 20.0 and 0.07 g/l in the production stage, respectively. Proportional feedback control considering time lag was suggested for PHB production process and a simulator was developed for real-time control purpose.
It has been commonly known that cell growth is inhibited by the lack of dissolved oxygen and mass transfer inhibition of nutrients at stationary phase in fed-batch culture. In this study, Pluronic F-68 and oxygen vectors were added in Angelica gigas Nakai suspension culture in order to enhance cell growth in fed-batch culture. It was observed that the addition of 6%(w/v) Pluronic F-68 promoted cell growth up to 6.1% compared to control and that the use of 4%(v/v) n-hexadecane markedly enhanced cell growth up to 11.4%.
Park, Eunhwi;Kim, Hye-Jin;Seo, Seung-Yeul;Lee, Han-Na;Choi, Si-Sun;Lee, Sang Joung;Kim, Eung-Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.31
no.9
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pp.1305-1310
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2021
Shikimate is a key high-demand metabolite for synthesizing valuable antiviral drugs, such as the anti-influenza drug, oseltamivir (Tamiflu). Microbial-based strategies for shikimate production have been developed to overcome the unstable and expensive supply of shikimate derived from traditional plant extraction processes. In this study, a microbial cell factory using Corynebacterium glutamicum was designed to overproduce shikimate in a fed-batch culture system. First, the shikimate kinase gene (aroK) responsible for converting shikimate to the next step was disrupted to facilitate the accumulation of shikimate. Several genes encoding the shikimate bypass route, such as dehydroshikimate dehydratase (QsuB), pyruvate kinase (Pyk1), and quinate/shikimate dehydrogenase (QsuD), were disrupted sequentially. An artificial operon containing several shikimate pathway genes, including aroE, aroB, aroF, and aroG were overexpressed to maximize the glucose uptake and intermediate flux. The rationally designed shikimate-overproducing C. glutamicum strain grown in an optimized medium produced approximately 37.3 g/l of shikimate in 7-L fed-batch fermentation. Overall, rational cell factory design and culture process optimization for the microbial-based production of shikimate will play a key role in complementing traditional plant-derived shikimate production processes.
Fed-batch culture of Pseudomonas oleovorans was carried out for the production of medium-chain-length polyhydroxyalkanoates (MCL-PHAs) using octanoate as a carbon source. Octanoate and the salt solution containing ammounium sulfate and magnesium sulfate were intermittently fed in the course of fermentation. Cell mass and PHA concentrations of 42.8 and 16.8g/L, respectively, could be obtained in 40 h. The PHA content and the PHA productivity were 39.2% and 0.42 g PHA/L-h, respectively. The yields of cell mass and PHA were 0.71 g dry cell mass/g octanoate and 0.28g PHA/g octanoate, respectively. Therefore, octanoate can be used for the production of MCL-PHAs to a high concentration with high productivity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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