The gastrointestinal tract of three Percida, Lateolabrax japonicus, Epinephelus septemfasciatus and Mugil cephalus, was investigated immunocytochemically for the occurrence of somatostatin-. seotonin-, gastrin-, pancreatic polypeptide(PP)-, cholecystokinin-8(CCK-8)- and glucagon-immunoreactive cells. In Lateolabrax japonicus and Epinephelus septemfasciatus, five endorcrine cell types, such as somatostatin-, serotonin-, gastrin-, PP- and CCk-8-immunoreactive cells were demonstrated. In Mugil cephalus, however, six endocrine cell types, such as somatostatin-, serotnin-gastrin-, PP-, CCK-8- and glucagon-immunoreactive cells were detected. Somatostatin- and serotonin-immunoreactive cells were detected in the gastric mucosa of all species. Glucagon-immunoreactive cells were found only in the gastric mucoas of Mugil cephalus. In the pyloric caeca, PP-and CCK-8-immnuoreactive cells fo all species. gastrin-immunoreactive cells of Epinephelus septemfasciatus and Mugil cephalus, and serotonin-immunoreactive cells of Epinephelus septemfasciatus were demonstrated. In the intestinal mucosa of all species, gastrin-, PP- and CCK-8-immunoreactive cells were detected, and in the intestinal mucosa of Epinephelus septemfasciatus serotonin-immunoreactive cells were also detected. The frequency of these immunoreactive cells differs from each portion of the gastrointestinal tract of all species.
Hormonal induction of sex reversal was examined by using sex steroid hormones in serranid fish, Epinephelus septemfasciatus. Young fish were collected from the coastal area of Cheju Island, and reared for 2 years before fish were used for the experiments. Without any hormonal treatment, gonads of fish ($1,000\~2,800$ g in body weight) were occupied by oocytes of the perinucleolus stage and bundles of protogonial cells in the area of germinal epithelium. When the induction of sex reversal was attempted by daily oral administration of $17\alpha$-methyltestosterone (0.5 mg/kg fish) for 90 days, active spermatogenesis was induced, and spermatogonia and spermatocytes and spermatids were appeared in all gonads we examined. However, after daily, oral treatment of $17\beta$-estradiol (0.5 mg/kg fish) to. 50 days with the following injection of human chorionic gonadotrophin ($1,000\~1,500$ IU/kg fish) mature oocytes were not induced in fish gonad.
이번 연구에서 바리과 어종의 새로운 교잡종을 생산하기 위한 연구의 일환으로 능성어 (Hyporthodus septemfasciatus) ♀${\times}$대왕바리 (Epinephelus lanceolatus) ♂ (CGGG)의 발생 양상, 부화율, 기형 발생률 그리고 부화 소요시간을 조사하고, 교잡종의 모계어종의 순종 (능성어 ♀${\times}$♂, CG)과 비교하였다. CGGG와 CG 수정란은 자외선 살균 해수가 채워진 5-L 용량의 비이커 9개에 3,000~5,000개/비이커의 밀도로 수용되었으며, 발생 기간 중 수온은 $23.5{\sim}24.8^{\circ}C$ 그리고 염분은 32.1~32.8 ppt 였다. CGGG의 수정률과 부화율은 각각 $69.4{\pm}1.5%$와 $59.0{\pm}5.1%$로서 CG에 비해 유의하게 낮았다 (p<0.05). CGGG는 비균등 난할, 배체 체형 기형 그리고 부화자어의 척추 기형이 높게 출현한 것을 제외하고, CG와 동일한 난발생 양상을 보였다. CGGG의 부화까지 소요 시간은 CG에 비해 약 2시간 느렸다(p<0.05). 이상의 결과에서 CGGG는 수정률, 부화율 그리고 기형률 등 발생능력이 CG에 비해 낮았지만 부화자어의 대량생산이 가능할 것으로 판단된다.
The Serranidae is high-quality fish species with good meat quality and is traded at high price, and is attracting attention in South Korea as a cultured species that creates high added value. However, the high-density fish farming for mass production increases the risk of mass mortality due to infectious diseases, leading to enormous economic losses. Therefore, in order to safely prevent and protect farmed fish from serious infectious diseases, it is necessary to conduct disease monitoring on a regular basis. In this study, Hyporthodus septemfasciatus, Epinephelus moara, and the hybrid longtooth grouper (E. moara ♀×E. lanceolatus ♂) were collected once a month from fish farm of Garorim and Aquabiotech Co., Ltd for a total of six months, from July to December 2023. We investigated infections of five species of bacterial diseases, including Flavobacterium columnare, six species of viral diseases, including LCDV (lymphocystis disease virus), and parasitic pathogens in grouper farms. As the result, Vibrio vulnificus and V. harveyi were detected in H. septemfasciatus in August, in the case of viral diseases, NNV was detected in H. septemfasciatus from July to August using RT-PCR or PCR. Finally, In the case of parasitic diseases, Tricodina sp. was detected in E. moara and the hybrid longtooth grouper from August to December.
Viral nervous necrosis (VNN) is a serious disease of sevenband grouper Epinephelus septemfasciatus in Korean aquaculture farms. However, we suggest the following preventative methods for hatcheries: 1) disinfecting rearing water, 2) selecting spawners via ELISA and PCR, 3) selecting eggs via PCR, 4) disinfecting fertilized eggs, and 5) proper facilities management. When these methods are implemented, nervous necrosis virus (NNV)-free fish are produced because vertical and horizontal transmission is prevented. However, horizontal transmission of NNV through rearing seawater sourced from the environment during grow-out stages in sea cages can still occur. Live NNV vaccines with a low rearing temperature or Poly(I:C) immunization are very effective at preventing horizontal transmission of NNV in rearing farms. Furthermore, even after VNN is contracted, fish mortality can be reduced by administering Poly(I:C).
Isolation and cloning of seven-band grouper (Epinephelus septemfasciatus) growth hormone cDNA from pituitary gland revealed an open reading frame of 612 bp coding for a pre-growth hormone of 204 amino acids with a 17 amino acid putative signal peptide. Deduced amino acid sequence showed that there was one possible N-glycosylation site at $Asn^{l84}$ and four cysteine residues $(Cys^{52},\;Cys^{160},\;Cys^{177},\;Cys^{185})$ on t e same positions as in some other species where they were involved in the stabilization of the tertiary structure. The seven-band grouper growth hormone (sbgGH) presented a $99.5\%$ amino acid sequence identity with the growth hormone of Epinephelus coioides and contained the conserved hormone domain region. Comparison of growth hormone sequences from evolutionarily diverse species revealed 25 amino acid residues conserved in jawless fishes to modern mammals. It also revealed an evolutionary trend to retain the same polypeptide sequence even in the distantly related animals while allowing alterations to occur in polypeptides of the closely related species. In order to create a recombinant system to produce high levels of the growth hormone, it was expressed in Escherichia coli (BL21) cells. The gel analysis revealed theoretically expected molecular weights for both mature and pre-sbgGHs.
In this study, we investigated safety and efficacy of a low temperature immunization protocol with NNV in red spotted grouper, Epinephelus akaara and long tooth grouper, Epinephelus bruneus and seven band grouper, Hyporthodus septemfasciatus. Further, growth rate between immunized and naïve fish was evaluated during the experiment to check side effect of immunization. Three grouper species were immunized by immersion method with live NNV at 105.0 TCID50/mL at 16.5℃ for 30 min and reared for 120 days at natural sea water temperature. To evaluate growth rate, total length and wet weight was measured 7 times after immunization. Immunized three grouper species were challenged by intramuscular inoculation with NNV at 104.2 TCID50/100 µL/fish. Immunization at low temperature with live NNV did not show any clinical symptoms of infection, mortality and inhibition of growth. After challenge, cumulative mortality of naïve seven band grouper, red spotted grouper, long tooth grouper were 45, 10, 20 %, respectively. However no mortality was observed at immunized groupers. Thus, it was demonstrated that immunization at low temperature with live NNV are able to protect three different species of groupers without inhibition of growth.
Immunoglobulin M (IgM) of sevenband grouper (Epinephelus septemfasciatus) was purified by mannan-binding protein (MBP) affinity column. The purified IgM had an apparent molecular weights of 76 (heavy chain) and 28 (light chain) kDa in sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Eight hybridoma clones secreting monoclonal antibodies (mAbs) against sevenband grouper IgM were established. Antibody detection enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with bovine serum albumin (BSA, antigen) and the 8 mAbs revealed that optical density (OD) values were clearly different between sera from BSA-immunization and non-immunization of sevenband grouper. These results suggest that the produced mAbs in this study are specifically reacted with IgM of sevenband grouper.
To infer phylogenetic relationships among Epinephelus species inhabiting coastal regions of Korean peninsula, mitochondrial cytochrome b genes from 9 species belonging to the subfamily Epinephelinae were PCR-amplified, cloned and sequenced. Aligned cytochrome b sequences of 10 species containing one additional sequence from GenBank were 1,140 base pairs in length, including 439 variable and 330 parsimony informative sites. The cytochrome b genes of 10 species, as other vertebrates studied to date, exhibit unequal base compositions: an entirely low G content ($15.2{\pm}0.3{\%}$on average) and almost equal T, C and A contents ($29.3{\pm}0.8{\%},\;30.7{\pm}1.0{\%},\;and\;24.8{\pm}0.5{\%}$ on average, respectively).In third codon positions, transitional substitutions especially between Epinephelus species and outgroup species are almost certainly saturated or near saturation. Phylogenetic analyses were performed with sequence data from 8 Epinephelus species and 2 outgroup species (Cephalopholis urodela and Vaviola louti) by using distance-based (neighbor-joining and minimum evolution) and parsimony-based (maximum parsimony) methods. The results showed that the monophyly of the genus Epinephelus was supported by relatively high bootstrap values. However, phylogenetic relationships among E. areolatus, E. moara, E. septemfasciatus, and Epinephelus sp were poorly resolved. Within the genus Epinephelus, three resolved monophyletic groups were found: clade 1 included E. akaara and E. awoara;, clade 2 included E. fasciatus and E. merra; and clade 3 included E. akaara, E. awoara, E. fasciatus, E. merra, E. areolatus, E. moara, E. septemfasciatus and Epinephelus Sp.
성전환 연구는 놀래기류의 성전환과 산란 행동에 관한 연구(Robertson and Coat, 1974)와 국내에서 자성선숙종의 놀래기류(Lee et al., 1992), 능성어, Epinephelus septemfasciatus (Lee et al., 1996), 붉바리, Epinephelus akaara (Hwang et al., 1998) 등이 있으며 웅성선숙종의 성전환에 관한 연구는 찾아보기 힘들다. (중략)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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