The production of 8-ketotrichothecenes, deoxynivalenol (DON), nivalenol (NIV), and their monoacetyl derivatives was studied in rice and corn cultures using 8 isolates of Fusarium graminearum which were obtained from corn and barley samples. Higher concentrations of trichothecenes were produced on rice than corn, and production of the toxins on rice was enhanced by growing the fungi at $25^{\circ}C$. The isolates were used for evaluation of toxin production and pathogenicity after artificial inoculation to 5 corn and 3 barley cultivars. The kinds and the relative amounts of trichothecenes produced in cultures were consistent with those in infected kernels of corn and barley with some exceptions. As for DON chemotypes, the ratios of 15-acetyl-DON to 3-acetyl-DON were varied among the pathogen-cultivar interactions. The corn and barley cultivars showed the significant differences of resistance to the Fusarium isolates in disease severity and seedling blight, and resistance ranking to the different isolates was varied. However, significant correlations were observed between the total concentrations of trichothecenes in infected kernels of corn and barley and pathogenicities of the Fusarium isolates to the hosts.
The principal objective of this study was to estimate the measurement uncertainty associated with determination of deoxynivalenol (DON), a mycotoxin generated by Fusarium strain, in food. In service of this goal, wheat as a food matrix was analyzed via high performance liquid chromatography-ultraviolet (HPLC-UV) detection using an immunoaffinity column for clean-up. The uncertainty sources in the measurement process were identified by sample weight, final volume, and sample concentration in extraction volume with components including standard stock solution, working standard solution, 5 standard solutions, calibration curve, matrix, and instrument. The expanded uncertainty for DON at a concentration of 300 ${\mu}g/kg$ was estimated as 71.62 ${\mu}g/kg$ using a coverage factor of two, which provides a confidence level of approximately 95%. The most influential component in the uncertainty sources was the recovery of the wheat matrix, followed by the calibration curve. These results indicate that all efforts may be directed toward reducing the uncertainties of the recovery of the wheat matrix and the calibration curve to obtain a reliable HPLC-UV method for DON analysis in wheat.
Mucosal epithelia sense external stress signals and transmit them to the intracellular cascade responses. Ribotoxic stress-producing chemicals such as deoxynivalenol (DON) or other trichothecene mycotoxins have been linked with gastrointestinal inflammatory diseases by Fusarium-contamination. The purpose of this study was to test the hypothesis that DON evokes the epithelial sentinel signals of RNA-dependent protein kinase (PKR) and early growth response gene 1 (EGR-1), which together contribute to the pro-inflammatory cytokine interleukin 8 (IL-8) in human intestinal epithelial cells. PKR suppression by the dominant negative PKR expression attenuated DON-stimulated interleukin-8 production. Moreover, 1L-8 transcriptional activation by DON was also reduced by PKR inhibition in the human intestinal epithelial cells. Treatment with the PKR inhibitor also suppressed EGR-1 promoter activity, mRNA and protein induction, although mitogen-activated protein (MAP) kinases such as extracellular signal-regulated protein kinases (ERK) 1/2, p38, c-Jun N-terminal Kinase (INK) were little affected or even enhanced in presence of a PKR inhibitor. These patterns were also compared in the EGR-1-suppressed cells, which showed much more suppressed production of 1L-8. All things taken into consideration, DON-activated sentinel signals of EGR-1 via PKR mediated interleukin-8 production in human intestinal epithelial cells, which provide insight into the possible general mechanism associated with mucosal inflammation as an intestinal toxic insult by ribotoxic trichothecene mycotoxins.
Kim, Jin-Cheol;Park, Ae-Ran;Lee, Yin-Won;Youn, Hee-Ju;Cha, Seung-Hee
Korean Journal of Microbiology
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v.31
no.4
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pp.312-317
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1993
A total of 110 Fusarium graminearum isolates were obtained from corn and barley samples which were collected from Kangwon province and the southern part of Korea, respectively. The isolates were tested for trichothecene and zearalenone (ZEA) production in rice culture. The incidences of trichothecene production by 51 isolates of F. graminearum from corn were 64.7% for deoxynivalenol (DON), 7.8% for 3-acetyldeoxynivalenol (3-ADON),33.3% for 15-acetylde-oxynivalenol (15-ADON), 21.6% for invalenol (NIV), and 13.7% for 4-acetylnivalenol (4-ANIV). DON producers frequently co-produced 15-ADON rather than 3-ADON. On the other hand, the incidences of trichothecene production by 59 isolates of F. graminearum from barley were 71.2% for NIV, 61.0% for 4-ANIV, and only one isolate produced DON and 3-ADON. The incidences and mean levels of ZEA producers were 32.0% and 71.$\mu$g/g for the isolates from corn, and 29.0% and 74 .$\mu$g/g for the isolates from barley. There was a great regional difference in trichothecene production of F. graminearum isolates between Kangwon province and the southern part of Korea.
면역분석법(immunoassay)은 aflatoxin류, deoxynivalenol(DON), zearalenone(ZEA), fumonisin류 등을 포함하는 다양한 진균독소분석에 적용되고 있다. 이들 분석법을 이용하여 여러 종류의 matrix내에 존재하는 물질들을 분석할 수 있다. 그리고 많은 시료를 빨리 분석해야 하는 경우에 이 방법이 적용되고 있다. 상업적인 면역화학적 분석키트들은 흔히 검출감도(sensitivity), 특이성(specificity), 재현성(reproducibility), 비용(cost), 안정성(stability), 편리성(ease of use)등의 관점에서 평가된다. 실험실적으로 품질보증을 위하여 표준곡선과 양성대조구 등에 대한 사전 검토가 필수적이다. 또한 높은 농도의 분석물의 경우에는 matrix에서 기인한 간섭때문이 아닌지를 구분하는 것도 중요하다. 본문에서 곡류와 곡류가공품 및 특정의 감시대상물 질내 aflatoxin류, DON, ZEA 그리고 fumonisin류와 같은 진균독소의 분석에 면역화학적 방법을 사용하여 얻어진 공동연구의 결과에 대한 해석기준이 제시된다. 또한 yes/no로 구분해야 하는 정성시험의 결과해석에 필요한 기준이 제시된다. 진균독소의 면역분석법을 평가하기 위한 몇몇기준들과 그 방법들을 감시도구로 사용하는 예는, 식품중의 잔류농약을 검출하기 위한 접근방법과 유사한 모델로서 활용될 수 있을 것이다.
Fifty-three isolates of Fusarium graminearum were obtained from corn and barley samples in several provinces of Korea. Gas chromatography-mass spectrometric analysis of trichothecenes produced by these isolates revealed that 37 and 16 isolates were nivalenol (NIV)- and deoxynivalenol (DON)-chemotypes, respectively. Two hundred and seventy-five nitrate-nonutilizing (nit) mutants were obtained from the isolates. Of these mutants, 187 were identified as nit1, nit3, or NitM, but 88 could not be identified as one of these classes. The highest frequency of nit mutant was nit1 (65%), followed by nit3 (20%) and NitM (15%). Higher frequency of NitM was observed in DON-chemotypes than in NIV-chemotypes. The mutants were used for vegetative compatibility group (VCG) analysis by examining heterokaryosis using complementary mutant pairs. No heterokaryon formation was observed among all 1,248 pairwise combinations, suggesting that all isolates tested belong to different VCGs. Higher frequency of self-incompatibility was observed in NIV-chemotypes than in DON-chemotypes. These results suggest that the like-lihood of asexual genetic recombination may be very low I F. graminearum under the field condition.
Fusarium species are worldwide causal agents of Fusarium head blight (FHB) in cereals such as barley and wheat. Their toxigenic potential is a health risk for both humans and animals. To survey the natural occurrence of FHB and mycotoxins produced by Fusarium, total 126 barley or wheat grains grown in 2009-2010 season in Korea were collected. The incidence of FHB was 30.7% in silage barley, 26.9% in wheat, 20.7% in naked barley, 19.4% in malting barley, 16.4% in unhulled barley. Overall FHB incidence of barley and wheat in 2010 was 23.0% and 10% higher than that of 2009. The incidences and level of deoxynivalenol (DON), nivalenol (NIV), and zearalenone (ZEA) were 34%, 0.89 mg/kg, 84.9%, 1.86 mg/kg, and 10.3%, 0.06 mg/kg respectively. The both levels and incidences of NIV were found to be highest in barley, whereas the level of DON was found to be highest in wheat. Incidences of DON and NIV and the level of NIV in the samples from southern regions of Korea were higher than those from central region, whereas the level of DON from central region was higher than that from southern regions. This is the first paper demonstrating regional difference in natural occurrence of DON and NIV in wheat and barley.
To investigate Fusarium mycotoxin contamination in rice samples from rice processing complexes (RPCs), paddy rice and rice-milling products such as husks, brown rice, blue-tinged rice, broken rice, rice bran, discolored rice, and polished rice were collected from nationwide in 2012. Three hundred seventy one samples of rice and its by-products were analyzed for three trichothethenes including nivalenol (NIV), deoxynivalenol (DON), and zearalenone (ZEA) by LC/MS. Discolored rice samples were found to have the highest contamination of DON, NIV or ZEA, followed by broken rice. Polished rice samples were largely free from mycotoxins, except three samples which were contaminated with NIV or DON at safety level. The rice byproduct samples were contaminated at higher level and frequencies than polished rice samples.
We performed diagnostic PCR assays and a phylogenetic analysis using partial sequences of TEF1 (translation elongation factor-1) to determine the trichothecene chemotypes and genetic diversity of F. graminearum isolates from maize and rice samples collected in 2009 in Korea. PCR using a species-specific primer set revealed a total of 324 isolates belonging to the putative F. graminearum species complex. PCR with trichothecene chemotypespecific primers revealed that the nivalenol (NIV) chemotype was predominant among the fungal isolates from rice (95%) in all provinces examined. In contrast, the predominant chemotype among the corn isolates varied according to region. The deoxynivalenol (DON) chemotype was found more frequently (66%) than the NIV chemotype in Gangwon Province, whereas the NIV chemotype (70%) was predominant in Chungbuk Province. Phylogenetic analysis showed that all DON isolates examined were clustered into lineage 7, while the NIV isolates resided within lineage 6 (F. asiaticum). Compared with previous studies, the lineage 6 isolates in rice have been predominantly maintained in southern provinces, while the dominance of lineage 7 in maize has been evident in Gangwon at a slightly reduced level.
The occurrence of Fusarium mycotoxins was surveyed in 68 corn samples imported from China. Four 8-ketotrichothecenes including deoxynivalenol (DON), 15-acetyldeoxynivalenol (15-ADON), 3-acetyldeoxynivalenol (3-ADON), and nivalenol (NIV) were detected in corn. In addition, the corn samples were contaminated with zearalenone (ZEA), fumonisin $B_1$, $(FB_1)$, fumonisin $B_2$, and fumonisin $B_3$. DON, 15-ADON, 3-ADON, ZEA, and $FB_1$ were major contaminants in corn, with mean levels of 277, 34, 37, 39, and 123 ng/g, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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