Purpose: To evaluate the prognostic value of the expression of excision repair cross-complementation group l (ERCC1), MutS protein homolog 2 (MSH2) and poly ADP-ribose polymerase 1 (PARP1) in non-small-cell lung cancer patients receiving platinum-based postoperative adjuvant chemotherapy. Methods: Immunohistochemistry was applied to detect the expression of ERCC1, MSH2 and PARP1 in 111 cases of non-small cell lung cancer paraffin embedded surgical specimens. Through og-rank survival analysis, we evaluated the prognostic value of the ERCC1, MSH2, PARP1 and the related clinicopathological factors. COX regression analysis was used to determine whether ERCC1, MSH2 and PARP1 were independent prognostic factors. Results: In the enrolled 111 non-small cell lung cancer patients, the positive expression rate of ERCC1, MSH2 and RARP1 was 33.3%, 36.9% and 55.9%, respectively. ERCC1 (P<0.001) and PARP1 (P=0.033) were found to be correlated with the survival time while there was no correlation for MSH2 (P=0.298). Patients with both ERCC1 and PARP1 negative cancer had significantly longer survival time than those with ERCC1 (P=0.042) or PARP1 (P=0.027) positive alone. Similalry, the survival time of patients with both ERCC1 and PARP1 positive cancer was shorter than those with ERCC1 (P=0.048) or PARP1 (P=0.01) positive alone. Conclusion: Patients with ERCC1 or PARP1 negative non-small cell lung cancer appear to benefit from platinum-based postoperative adjuvant chemotherapy.
Insect-resistant transgenic rice was developed by inserting the mCry1Ac1 a modified gene from the soil bacterium Bacillus thuringiensis (Bt). For biosafety assessment, we studied the effects on survival of cantor Daphnia magna, a commonly used as a model organism in ecotoxicological studies. D. magna fed on Bt rice and its near non-genetically modified (GM) counterparts (Nakdong) grown in the same environment (100% ground rice suspension). The Bt rice was comfirmed to have the insertion of T-DNA and protein expression by the polymerase chain reaction and ELISA analysis. Feeding study showed similar cumulative immobility and abnormal response of D. magna between Bt rice and non-GM counterparts. 48 h-$EC_{50}$ values of Bt rice and non-GM rice showed 4,429 and 2,889 mg/L respectively. The rice no observed effect concentration (NOEC) values for D. magna was suggested 1,000 mg/L. We conclude that the tested Bt-rice and Nakdong similar cumulative immobility for D. magna the widely used model organism. We found out that there is strong possibility that the growth of Bt rice didn't affect to non-target insects.
Streptococcus suis is a worldwide pathogen of a variety of porcine infection and has also been described as a pathogen for humans. We studied biochemical characteristics, antimicrobial susceptibility, and identification of polymerase chain reaction (PCR) of S. suis isolated from diseased pigs in Gyeongbuk province from 2004 to 2009. Sixty-one isolates were identified as S. suis by biochemical characteristics and PCR from 40 farms. The biochemical characteristics of S. suis isolates were production of VP-negative, hippurate, esculin, and arginine decarboxylase-positive, and fermentation of carbohydrate was variable lactose, trehalose, inulin, and raffinose, which was typeable 11 phenotype. In an antimicrobial susceptibility test, the majority of isolates were highly susceptible to amoxicillin/clavulanic acid, ampicillin, cephalothin, cefoperazone and florfenicol, while being highly resistant to streptomycin, kanamycin, amikacin, neomycin, erythromycin, clindamycin, and tetracycline. The isolates were divided into 11 phenotypes of biochemistry. By using PCR, the 16S-rRNA gene DNA fragment was detected at 304 bp from all of isolates. These results may provide the basic information needed to establish strategies for the prevention of S. suis infection in pigs.
Objective: To investigate the association between endometriosis and polymorphisms of N-acetyl transferase 2 (NAT2), glutathione S-transferase M1 (GSTM1), and cytochrome P450 (CYP) 1A1 genes in Korean infertile patients. Materials and Methods: A total of 303 infertile patients who had undertaken diagnostic laparoscopy during January, 2001 through December, 2003 at Samsung Cheil Hospital enrolled in this study. The patients were grouped according to laparoscopic findings: minimal to mild endometriosis (group I: n=147), moderate to severe endometriosis (group II: n=57), normal pelvic cavity (n=99). Peripheral blood was obtained and genomic DNA was extracted. The genotypes of each genes were analyzed using polymerase chain reaction (PCR) and restriction fragment length polymorphism (RFLP). For NAT2, RFLP was used to detect the wild type (wt) and mutant (mt) alleles, enabling classification into slow (mt/mt) or fast (wt/wt or wt/mt) acetylation genotypes. For GSTM1, PCR was used to distinguish active (+/- or +/+) from null (-/-) genotypes. For CYP1A1, MspI digestion was used to detect the wild type (A1A1), heterozygote (A1A2) or mutant (A2A2) genotypes. Result: The genotype frequencies of NAT2 slow acetylator was 12.8%, 10.9%, 12.8% in group I, group II and control, respectively. The genotype frequencies of GSTM1 null mutation was 55.3%, 41.8%, 53.2% in group I, group II and control, respectively. The genotype frequencies of CYP1A1 MspI polymorphism was 16.3%, 9.1%, 18.1% in group I, group II and control, respectively. No significant difference was observed between endometriosis and normal controls in the genotype frequencies of the NAT2, GSTM1, CYP1A1 MspI polymorphism. Conclusion: The NAT2, GSTM1, CYP1A1 gene polymorphism may not be associated with the susceptibility of endometriosis in Korean women.
Purpose: To examine the prevalence of $Clostridium$$difficile$ ($C.$$difficile$) colonization (CDC) and potential neonatal determinants of CDC in hospitalized preterm infants. Methods: Fecal samples were serially collected within 72 h after birth and at 1, 2, and 4-6 weeks of age from preterm infants in the neonatal intensive care units (NICUs) of two different university hospitals. Total bacterial DNA was extracted from each fecal sample from 49 infants, and polymerase chain reaction (PCR) was performed with primers for the 16S gene of $C.$$difficile$ and the toxin A and toxin B genes. The correlation between the results of $C.$$difficile$ PCR assays and the clinical characteristics of the infants was analyzed. Results: The prevalence rates of CDC were 34.7, 37.2, 41.3, and 53.1% within 72 h after birth and at 1, 2, and 4.6 weeks of age, respectively. The toxin positivity rate was significantly higher in the infants with persistent CDC than in those with transient CDC (8/12 [66.7%] vs. 6/25 [24.5%] ($p$=0.001). Among the various neonatal factors, only the feeding method during the first week after birth was significantly associated with persistent CDC. Exclusive breast-milk feeding (EBMF) significantly decreased the risk of persistent CDC compared to formula or mixed feeding (adjusted odds ratio: 0.133, 95% confidence interval: 0.02-0.898, $p$=0.038). Conclusion: The prevalence of CDC increased with the duration of hospitalization in preterm infants in the NICU. EBMF during the first week after birth in hospitalized preterm infants may protect against persistent CDC.
Objective: Circular RNAs (circRNAs) are a newfound class of non-coding RNA in animals and plants. Recent studies have revealed that circRNAs play important roles in cell proliferation, differentiation, autophagy and apoptosis during development. However, there are few reports about muscle development-related circRNAs in livestock. Methods: RNA sequencing analysis was employed to identify and annotate circRNAs from longissimus dorsi of sheep. Reverse transcription followed by real-time quantitative (q) polymerase chain reaction (PCR) analysis verified the presence of these circRNAs. Targetscan7.0 and miRanda were used to analyse the interaction of circRNA-microRNA (miRNA). To investigate the function of circRNAs, an experiment was conducted to perform enrichment analysis hosting genes of circRNAs using gene ontology (GO) and Kyoto encyclopedia of genes and genomes (KEGG) pathways. Results: About 75.5 million sequences were obtained from RNA libraries of sheep skeletal muscle. These sequences were mapped to 729 genes in the sheep reference genome. We identified 886 circRNAs, including numerous circular intronic RNAs and exonic circRNAs. Reverse transcription PCR (RT-PCR) and DNA sequencing analysis confirmed the presence of several circRNAs. Real-Time RT-PCR analysis exhibited resistance of sheep circRNAs to RNase R digestion. We found that many circRNAs interacted with muscle-specific miRNAs involved in growth and development of muscle, especially circ776. The GO and KEGG enrichment analysis showed that hosting genes of circRNAs was involved in muscle cell development and signaling pathway. Conclusion: The study provides comprehensive expression profiles of circRNAs in sheep skeletal muscle. Our study offers a large number of circRNAs to facilitate a better understanding of their roles in muscle growth. Meanwhile, we suggested that circ776 could be analyzed in future study.
Gastric cancer (GC) is one of the most common malignancies in the world. It is the first cause of cancer deaths in both sexes In Iranian population. Circulating insulin-like growth factor-one (IGF-1) levels have been associated for gastric cancer. IGF-1 protein has central roles involved in the regulation of epithelial cell growth, proliferation, transformation, apoptosis and metastasis. Single nucleotide polymorphism in IGF-1 regulatory elements may lead to alter in IGF-1expression level and GC susceptibility. The aim of this study was to investigate the influence of IGF-1 gene polymorphism (rs5742612) on risk of GC and clinicopathological features for the first time in Iranian population. In total, 241 subjects including 100 patients with GC and 141 healthy controls were recruited in our study. Genotypes were analyzed using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) assay with DNA from peripheral blood. The polymorphism was statistically analyzed to investigate the relationship with the risk of GC and clinicopathological properties. Logistic regression analysis revealed that there was no significant association between rs5742612 and the risk of GC. In addition, no significant association between genotypes and clinicopathological features was observed (p value>0.05). The frequencies of the CC, CT, and TT genotypes were 97%, 3%, and 0%, respectively, among the cases, and 97.9%, 2.1%, and 0%, respectively, among the controls. CC genotype was more frequent in cases and controls. The frequencies of C and T alleles were 98.9% and 1.1% in controls and 98.5% and 1.5% in patient respectively. Our results provide the first evidence that this variant is rare in Iranian population and it may not be a powerful genetic predisposing biomarker for prediction GC clinicopathological features in an Iranian population.
연구배경 : 플라스미노겐 활성 억제인자-1 (plasminogen activator inhibitor-1; PAI-1)은 허혈성 뇌경색의 발생의 원인이 되는 섬유소 용해작용의 저하를 매개하는 인자로서, PAI-1의 작용이 촉진되면 섬유소 용해기능이 저하되어 관상동맥 및 뇌혈관질환의 발생을 증가시키게 된다. PAI-1 유전자의 촉진자(promoter) 영역에는 -675 4G/5G (4G/5G)와A -844G (A/G)의 두 개의 유전자 다형성이 존재하며, 이는 PAI-1의 유전자 전사과정에 영향을 미쳐 혈청 PAI-1의 농도를 증가시키고 결과적으로 허혈성 뇌경색의 발생확률을 높이는 작용을 하게 된다. 연구방법 : 허혈성 뇌경색으로 진단 받은 167명의 환자와 173명의 건강인의 말초혈액에서 DNA를 분리한 후 PAI-1의 4G/5G와 A/G 유전자 다형성에 대한 연쇄중합반응 및 제한효소 절편길이 다형성 (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism; PCR-RFLP) 방법을 이용하여 허혈성 뇌경색 발생과 유전자 다형성과의 관계를 비교 분석하였다. 결과 : 허혈성 뇌경색 환자에서의 4G/4G의 유전자형의 빈도는 15.0%으로 정상 대조군의 33.5%에 비해 현저하게 낮게 나타났다 (P < 0.0001). 각각의 유전자형과 허혈성 뇌경색의 발생 위험도 (odd ratio ; OR)와의 관계를 분석했을 때 4G/4G 유전자형을 가질 경우 위험도는 0.35배로 현저하게 낮아졌으며, (P < 0.0001), 5G/5G 유전자형을 가질 경우 위험도는 4.49배 로 현저하게 높아졌다 (P < 0.0001). 그러나, A/G 유전자 다형성과 허혈성 뇌경색의 발생과는 유의한 연관성을 발견하지 못하였다. 결론 : 이상의 결과로 볼 때 PAI-1 유전자의 4G/4G 유전자형은 허혈성 뇌경색의 발생 비율을 감소시키는 작용을 하는 것으로 여겨진다.
Backgrounds : In recent years, asthma has become recognized as a chronic inflammatory disease associated pathologically with airway epithelial inflammation and airway remodeling. Objectives : To evaluate the different effects of Hirudo depending upon pharmaceutical manufactures on the expression and the activities of IL-6 and GM-CSF in airway epithelial cells, samples of Hirudo(水蛭), Hirudo toasted with Talcum(水蛭滑石炒) and Hirudo toasted with Ephedrae Herba(水蛭麻黃炒) were tested. Methods : After inducing enhanced messenger RNA(mRNA) expression and secretion of each cytokine by tumor necrosis factor-alpha(10 ng/ml) treatment, cultured human bronchial epithelial cell line BEAS-2B was added to each sample$(l,\;10,\;100\;&\;1000\;{\mu}g/ml)$. Subsequently, DNA activities were analyzed. Specifically mRNA expression and culture supernatants(protein levels) of IL-6 and GM-CSF from BEAS-2B cells, were analyzed using luciferase reporter gene assay, reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) analysis and enzyme-linked immunosorbent assay. Results : Hirudo toasted with Ephedrae Herba(水蛭麻黃炒) and Hirudo(水蛭) inhibited IL-6 activities in BEAS-2B cells remarkably, and inhibited mRNA expression levels and protein levels in supernatant of IL-6 and GM-CSF at various concentrations, significantly(p<0.05). However, Hirudo toasted with Talcum(水蛭滑石炒) had no effect on mRNA expression levels and showed a slight inhibitory effect on GM-CSF protein levels in supernatant of culture medium. Conclusions : These results strongly suggest that Hirudo toasted with Ephedrae Herba(水蛭麻黃炒) and Hirudo(水蛭) would be serve as effective medicaments in the treatment of airway inflammation and remodeling of asthmatic patients.
Objective : It has been reported that two-repeats ($IL1RN^{\ast}2$) of interleukin-1 receptor antagonist (IL-1Ra) gene is associated with ischemic stroke, and that Ala allele of the common Pro12Ala polymorphism in $PPAR-{\gamma}2$ isoform is associated with reduced risk for type 2 DM and its complications. The aim of the present study is to assess the association of IL-1Ra and $PPAR-{\gamma}2$ Pro12Ala polymorphism with the presence of ischemic stroke in the case of diabetic and non-diabetic patients. Methods : Genomic DNA was obtained from 373 healthy subjects, 157 DM subjects without ischemic stroke (known DM duration ${\ge}10$ years) and 302 ischemic stroke patients (including with DM). IL-1Ra polymorphism was analysed by polymerase chain reaction (PCR), and $PPAR-{\gamma}2$ polymorphism by restriction fragment length polymorphism after PCR. Results : $IL1RN^{\ast}1/IL1RN^{\ast}2$ genotype was associated with significantly increased risk for DM (OR=2.86, P = 0.0008) and ischemic stroke (OR=2.74, P = 0.0016). Pro/Ala genotype was associated with the reduced risk for DM (OR=0.53, P = 0.0491) and ischemic stroke (OR=0.38, P = 0.0039). They were also associated with the reduced risk for ischemic stroke in the DM patients compared with DM without ischemic stroke (OR=0.25, P = 0.0321). Conclusions : $IL1RN^{\ast}2$ allele could be an accelerating factor, not a predictive marker for ischemic stroke in type 2 DM. The Pro/Ala genotype of $PPAR-{\gamma}2$ Pro12Ala polymorphism may be associated with reduced risk for ischemic stroke with type 2 DM. Therefore it could be a useful predictive marker for ischemic stroke in Korean type 2 DM.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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