대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.66.3-67
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2003
Reactive oxygen species are capable of damaging biomolecules such as lipids, proteins, and DNA, which can not only lead to various diseases, but also oxidative damage resulting aging. In our previous study, Cercis chinensis (Leguminosae) showed a potent antioxidant activity. Twenty compounds including a new flavonol glycoside were isolated through antioxidant activity-guided fractionation. C. chinensis and some of the constituents exhibited a potent antioxidant activity on the free radicals and lipid peroxidation and a notable protective effect on the t-BuOOH induced oxidative damage. (omitted)
Xylella fastidiosa is the most damaging pathogen in many parts of the world. To increase diagnostic capability of X. fastidiosa in the field, the loop-mediated isothermal amplification (LAMP) and polymerase chain reaction (PCR) assay were developed to mqsA gene of citrate-synthase (XF 1535) X. fastidiosa and evaluated for specificity and sensitivity. Both assays were more robust than current published tests for detection of X. fastidiosa when screened against 16 isolates representing the four major subgroups of the bacterium from a range of host species. No cross reaction with DNA from healthy hosts or other species of bacteria has been observed. The LAMP and PCR assays could detect 10-4 pmol and 100 copies of the gene, respectively. Hydroxynaphthol blue was evaluated as an endpoint detection method for LAMP. There was a significant color shift that signaled the existence of the bacterium when at least 100 copies of the target template were present.
This study was designed to evaluate the possible DNA damaging effects of T-2 toxin using an alkaline single cell gel electrophoresis (SCGE) comet assay and also to investigate toxic effects in chickens. A total of 20 chickens were used in these experiments. Graded concentrations of dietary T-2 toxin (0, 4, 8, and $16{\mu}g/g$ of diet) were given to groups of 5 broiler chickens. In comet assay, The DNA damage was analysed by the tail extent moment (TEM) and tail length (TL), which were used as markers of DNA strand breaks in SCGE. A significant dose-dependent increase in the extent of DNA migration as well as in the percentage of cells with tails was observed after treatment with T-2 toxin (P<0.05). Treatment with the low T-2 toxin ($4{\mu}/g$ of diet) induced a relatively low level of DNA damage in comparison with the high T-2 toxin ($16{\mu}/g$ of diet) group. The growth rate was significantly reduced by concentrations of 8, and $16{\mu}/g$ of diet (P < 0.05). The feed conversion ratio were significantly affected by any concentrations (P < 0.05). The relative weight of the spleen, and lung was decreased by the growth inhibitory concentrations. The bursa of Fabricius, thymus, and kid- ney were decreased in relative weight by concentrations of $16{\mu}/g$ of diet. The relative weight of the liver and heart were unaffected. The hemoglobin (Hb), hematocrit (HCT), and mean corpuscular hemoglobin (MCH) were decreased at concentration of $16{\mu}/g$ of diet. As compared with control chickens, there was no marked change in serum components except uric acid in T-2 treated chickens. All lymphoid tissues retained atrophic and lymphoid cell depletion throughout the three weeks trial.
테이프는 납치, 강도, 폭탄제조 등 강력범죄에 사용되며, 테이프 접착면에는 지문, DNA 등 수사에 필요한 증거가 남아있을 수 있다. 이러한 증거를 수집하기 위해서는 테이프 접착면을 박리하는 과정이 선행되어야 한다. 본 연구에서는 테이프가 다공성표면에 부착되어 있는 경우에 한 가지 시약을 사용하여 테이프를 손상없이 박리하면서 동시에 다공성표면에서 지문을 현출할 수 있는 새로운 조성의 이중목적시약을 탐색하였다. 실험 결과, 새로운 조성의 1,2-IND 농축용액과 HFE-7100의 비율이 1:2인 조성의 시약이 A4 용지에 테이프가 부착되어 있는 경우 테이프 접착면에 손상이 가지 않으면서, 박리한 종이에 열을 가하여 바로 지문을 현출할 수 있었다. 따라서 테이프가 다공성 표면에 부착되어 있는 경우에 본 연구에서 제시하는 새로운 조성의 1,2-IND(HFE-7100 기반, 1:2)를 사용할 것을 권장한다.
Purpose : These experiments were undertaken to evaluate the effect of adminis tration of JokyungSan on ovarian functions and differential gene expressions related cell viabilities caspase-3, MAPK and MPG in female mice. Methods : We administered the JokyungSan to 6-week-old female ICR mice for 4, 8, or 12 days. The female mice were injected PMSG and hCG for ovarian hyperstimulation. We chose the caspase-3 for cell apoptosis, MAPK and MPG genes for cell viability and DNA repair. To compare the differences, we set a control group treated with plain water at the same volume by the same way. Results : In case of 4-day administration of JokyungSan, the mean number of total ovulated oocytes and the number of morphologically normal oocytes increased significantly compared to a control group. The administration of JokyungSan, were beneficial effect of embryonic development in preimplantation period and play a role of prevention of cell apoptosis and DNA damages and also increased cell proliferation resulted in ovarian functions. Conclusion : From our results suggested that the medication of JokyungSan has beneficial effect on reproductive functions of female mice via prevention of cell apoptosis and DNA damaging and promotion of cell proliferation.
본 연구는 5가지의 발광성 미생물을 이용하여 유해 방사선으로 알려져 있는 ${\gamma}-rays$가 여러가지 cellular stresses 중, 특히 유전자 손상과 생물막 손상을 유발하였는데, 이들의 손상 정도가 총 방사선량과 상관관계가 있음을 발생하는 bioluminescence 로써 확인하였다. 뿐만 아니라, 선량률의 변화를 통하여 방사선으로 인한 유전자 손상 및 일반적인 독성 효과가 큰 영향을 받는 것을 확인하였는데, 선량률 증가에 따라 이들 손상정도가 증가하는 것으로 보아 선량률이 genetic 및 radioprotecion에 심각한 영향을 미치는 것을 확인하였다.
Background: Cancers have dysfunctional redox regulation resulting in production of reactive oxygen species (ROS), damaging DNA, RNA and free NTPs, and causing the accumulation of oxidative nucleic acids in cytoplasm. The major types are 8-oxo-7,8-dihydroguanine(8-oxoGsn) in RNA and 8-oxo-7,8-dihydro-2' deoxyguanosine(8-oxodGsn) in Mt-DNA. The MTH1 protein sanitizes oxidized nucleotide pools from NTPs to monophosphates, preventing the occurrence of transversion mutations. This study concerned cytoplasmic 8-oxodGsn/Gsn and MTH1 expression in gastric cancer and para-cancer tissues and elucidated roles of nucleic-acid oxidation and anti-oxidation. Materials and Methods: A polymer HRP detection system was used to detect 8-oxo-Gsn/dGsn and MTH1 expression in 51 gastric cancer and para-cancer tissue samples. Analyses of patient clinical and pathological data were also performed. Results: The expression of MTH1 and the 8-oxo-dGsn/Gsn ratio were significantly higher in cancer tissues than para-cancer tissues (P<0.05). Cytoplasmic 8-oxo-Gsn and MTH1 were both found to positively correlate (P<0.05) with tumor differentiation, while no significant associations were found with gender, age, invasion depth, lymph node metastasis and clinical stage (P>0.05). Conclusions: We found 8-oxo-dGsn/Gsn and MTH1 are both highly expressed in gastric cancer tissues, especially in well differentiated lesions. In addition, oxidated mtDNA is prevalently expressed in gastric cancers, while 8-oxo-Gsn expression in cytoplasmic RNA is a bit lower, but more selectively.
Purpose : These experiments were undertaken to evaluate the effect of administration of Palmultang on ovarian functions and differential gene expressions related cell viabilities caspase-3, MAPK and MPG in female mice. Materials and Methods : We administered the Palmultang to 6-week-old female ICR mice for 4, 8, or 12 days. The female mice were injected PMSG and hCG for ovarian hyperstimulation. And then recovered ovaries were minced and extracted mRNA and analyzed cell viability related gene expression. We chose the caspase-3 for cell apoptosis, MAPK and MPG genes for cell viability and DNA repair. To compare the differences, we set a control group treated with plain water at the same volume by the same way. Results : In case of administration of Palmultang, the mean number of total ovulated oocytes and the number of morphologically normal oocytes increased significantly compared to a control group. We were also examined the embryonic developmental competence in vitro. The administration of Palmultang in a concentration with 10 and 100 mg/ml were beneficial effect of embryonic development in preimplantation period. The administration of Palmultang play a role of prevention of cell apoptosis and DNA damages and also increased cell proliferation resulted in ovarian functions. Conclusion : From our results suggested that the medication of Palmultang has beneficial effect on reproductive functions of female mice via prevention of cell apoptosis and DNA damaging and promotion of cell proliferation.
In Saccharomyces cerevisiae UV irradiation and a variety of chemical DNA -damaging agents induce the transcription of specific genes, including several involved in DNA repair. One of the best characterized of DNA -damage inducible genes is PHRI, which encodes the apoenzyme for DNA photolyase. Basal-level and damage-induced expression of PHRI require an upstream activation sequence, UASPHRI. Here we report the identification of the UlvIE6 gene of S. cerevisiae as a regulator of UASPHRl activity. Surprisingly, the effect of deletion of UME6 is growth phase dependent. In wild-type cells PHRI is induced in late exponential phase, concomitant with the initiation of glycogen accumulation that precedes the diauxic shift. Deletion of UNIE6 abolishes this induction, decreases the steady-state concentration of photolyase molecules and PHRI mRNA, and increases the UV sensitivity of a rad2 mutant. The results suggest that UM E6 contributes to the regulated expression of a subset of damage-responsive genes in yeast. Furthermore, the upstream repression sequence, URSPHRI, is required for repression and damage-induced expression of PHRl. Here we show identification of YER169W and YDR096W as putative regulators acting through $URS_{PHRI}$. These open reading frames were designated as RPHI (YERl69W) and RPH2 (YDR096W) indicating regulator of PHRI. Simultaneous disruption of both genes showed a synergistic effect, producing a four-fold increase in basal level expression and a similar decrease m the induction ratio following treatment of methyl methanesulfonate(MMS). Mutation of the sequence ($AG_4$) bound by Rphlp rendered the promoter of PHRI insensitive to changes in RPHI or RPH2 status. The data suggest that RPHI and RPH2 act as damage-responsive negative regulators of PHRI. Surprisingly, the sequence bound by Rphlp in vitro is found to be $AG_4$ which is identical to the consensus binding site for the regulators Msn2p and Msn4p involved in stress-induced expression. Deletion of MSN2 and MSN4 has little effect on the induction$.$ ratio following DNA damage. However, all deletions led to a significant decrease in basal-level and induced expression of PHRI. These results imply that MSN2 and MSN4 are positive regulators of P HRI but are not required for DNA damage repression. [Supported by grant from NIH]om NIH]
필터의 손상 없이 포집할 수 있는 필터케이스를 적용하고, 전압 제어와 압력 제어를 각각 할 수 있는 펌프 방식의 eDNA 포집 및 채수 시스템을 개발하여 집수매거 취수원을 대상으로 종래의 진공압 방식의 포집 및 추출 실험과 eDNA 농도를 비교함으로써 개발 시스템의 필터링 성능을 평가하였다. 개발된 시스템은 전압제어(Manual pump system) 방식과 압력제어(Automatic pump system) 방식으로 구분하여 필터링 시 필터기 내부 압력을 측정하고 각 시스템의 압력 변화를 비교하였다. 전압제어 방식은 필터링 초기에 65 [KPa]로 시작하여 필터링 시간이 경과함에 따라 필터에 축적되는 여과물의 양이 증가하므로 압력이 점진적으로 증가하였다. 압력제어 방식은 설계된 알고리즘에 따라 일정 압력을 유지하도록 제어한 결과, 압력 센서의 피드백 시간에 따라 필터링 과정에서 압력 변동의 폭은 차이가 있으나 목표 압력에 수렴하는 것을 확인하였다. 개발된 시스템의 필터링 성능을 확인하기 위해 eDNA 농도를 측정하고 전압제어 방식과 압력제어 방식을 대조군과 비교하였다. 전압제어 방식은 대조군과 유사한 결과를 얻을 수 있었으나 압력제어 방식은 대조군에 비해 낮게 나타났다. 압력제어 방식의 경우 필터링 시 압력 편차가 크고, 필터링 과정에서 일정한 압력을 유지하기 때문에 나타난 결과로 사료된다. 따라서 필터링 시에는 일정한 압력을 유지하는 것보다 필터링 시간 경과와 함께 여과물의 증가에 따라 압력이 점진적으로 증가하는 전압제어 방식이 eDNA를 포집하는데 적합함을 확인하였다. 정수역과 유수역의 eDNA 평균농도를 대조군으로 비교한 결과, 각각 96.2 [ng µL-1], 88.4 [ng µL-1]로 나타났으며, 펌프 방식으로 eDNA 평균농도를 비교한 결과는 각각 90.7 [ng µL-1], 74.8 [ng µL-1]로 정수역에서 필터링한 시료에서 높게 나타났다. 정수역에서 eDNA 농도가 높게 나타난 것은 잔존하는 eDNA를 비롯한 미세 유기물의 영향으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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