This study was undertaken to develop an efficient propagation technique for mature Betula davurica. Using aseptic materials taken from in vitro culture, the effects of media and plant growth regulators on shoot proliferation and rooting were investigated. DKW medium turned out to be the best in shoot proliferation among the media tested. Whereas axillary buds were better culture material than apical buds in proliferation of shoots, apical buds were slightly better than axillary buds on shoot elongation. Neither 1 /2 MS nor WPM medium seemed to be suitable for shoot multiplication or elongation. When the explants were cultured on 1/2 MS medium, shoot elongation was retarded by forming big callus at the base. In the case of WPM, shoots could be formed normally, but they exhibited slow growing. NAA was so effective on in vitro rooting that more than 80% rooting could be achieved on half-strength DKW medium supplemented with 1.0 mg/L NAA after 4 weeks in cultures. Ex vitro rooting using elongated shoot was also applicable to rooting and acclimatization. Rooted plantlets were successfully acclimatized in an artificial soil mixture and grew normally. The results demonstrate that efficient mass propagation of mature B. davurica can be done through tissue culture.
The effect of auxins and cytokinins on the formation of adventitious shoots, adventitious roots, trichomes, and calli in MS basal medium was investigated in leaf segments from ecotype Columbia of Arabidopsis thaliana. Adventitious shoots, adventitious roots, trichome, and calli were formed from leaf segments by a wide range of hormone concentrations and combinations. Adventitious shoots were formed respectively in treatment with 0.1mg/L IAA and 10 mg/L BA. Adventitious roots were formed in treatments with low concentration of IAA and NAA. Trichomes and calli were formed by increasing the concentration of IAA and NAA. The optimal combination was 0.5mg/L NAA and 0.1mg/L BA for trichome formation, 10mg/L NAA and 10mg/L BA for calli formation. When NAA was treated alone in culture media, adventitious roots were formed in 0.1mg/L, trichomes were formed in 2.0mg/L, and calli were formed in 10mg/L. Inductive time for formation of adventitious roots, trichomes and calli were determined at 6,7 and 18 days respectively by periodical transfer of leaf segments from NAA containing medium to NAA free medium.
Hormonal requirements inducing different regeneration pathways with particular emphasis on somatic embryo-genesis in Alhagi graecorum were studied. While combination of 0.5 $\mu{M}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), 2.5 $\mu{M}$ 6-benzylaminopurine (BAP) and 5 $\mu{M}$ 1-naphthaleneacetic acid (NAA) in MS medium induced callus formation and callus maintenance from internodal explants, each alone or in combination with other induced distinct regeneration pathway. Adventitious bud formation was induced on MS medium supplemented with 2.5 $\mu{M}$ BAP. It was improved when 2.5 $\mu{M}$ BAP was used in combination with 5 $\mu{M}$ NAA. MS medium containing 0.5 $\mu{M}$ 2,4-D or 5 $\mu{M}$ NAA induced the formation of abnormal direct somatic embryos. While increase of 2,4-D concentration (1.125-9) resulted in the formation of viable embryogenic mass, increase of NAA did not change its effect. NAA should be used in combination with 2,4-D even at low concentration (0.5 $\mu{M}$) to form embryogenic mass. In A. gaecorum, the role of 2,4-D as trigger of somatic embryogenesis and BAP as trigger of adventitious bud formation was deduced, but for maximum yield certain auxin-cytokinin ratio should be applied. Embryogenic masses characterized by high water content, low peroxidase activity, and low number of peroxidase and glutamate oxaloacetate transaminase bands in comparison with calli obtained under conditions stimulating adventitious bud formation. The resulted differential gene expression, which could be detected by native-PAGE patterns, could be used as marker for organogenic pathway in A. graecorum.
Kinetin(KN) is an inducer of rice(Oryza sativa L.) defense/stress responses, as evidenced by the induction of inducible secondary metabolite and defense/stress protein markers in leaf. We show a novel light-dependent effect of KN-triggered defense stress responses in rice leaf. Leaf segments treated with KN(100 ${\mu}M$) show hypersensitive-like necrotic lesion formation only under continuous light illumination. Potent accumulation of two phytoalexins, sakuranetin and momilactone A(MoA) by KN that peaks at 48 h after treatment under continuous light is completely suppressed by incubation under continuous dark. Using two-dimensional gel electrophoresis we identified KN-induced changes in ribulose-1, 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase, energy- and pathogenesis-related proteins(OsPR class 5 and 10 members) by N-terminal amino acid sequencing and mass spectrometry. These changes were light-inducible and could not be observed in the dark(and control). Present results provide a new dimension(light modulation/regulation) to our finding that KN has a potential role in the rice plant self-defense mechanism.
Bacteria from the Methylobacterium genus, called pink-pigmented facultative methylotrophic bacteria (PPFMs), are common inhabitants of plants, potentially dominating the phyllosphere population, and are also encountered in the rhizosphere, seeds, and other parts of plants, being versatile in nature. The consistent success of the Methylobacterium plant association relies on methylotrophy, the ability to utilize the one-carbon compound methanol emitted by plants. However, the efficiency of Methylobacterium in plant growth promotion could be better exploited and thus has attracted increasing interest in recent years. Accordingly, the present study investigated the inoculation effects of Methylobacterium sp. strains CBMB20 and CBMB 110 on seed imbibition to tomato and red pepper on the growth and accumulation of phytohormone levels under gnotobiotic conditions. Seeds treated with the Methylobacterium strains showed a significant increase in root length when compared with either the uninoculated control or Methylobacterium extorquens $miaA^-$ knockout mutanttreated seeds. Extracts of the plant samples were used for indole-3-acetic acid (IAA), trans-zeatin riboside (t-ZR), and dihydrozeatin riboside (DHZR) assays by immunoanalysis. The treatment with Methylobacterium sp. CBMB20 or CBMB 110 produced significant increases in the accumulation of IAA and the cytokinins t-ZR and DHZR in the red pepper extracts, whereas no IAA was detected in the tomato extracts, although the cytokinin concentrations were significantly increased. Therefore, this study proved that the versatility of Methylobacterium as a plant-growth promoting bacteria could be better exploited.
Salas-Marina, Miguel Angel;Silva-Flores, Miguel Angel;Cervantes-Badillo, Mayte Guadalupe;Rosales-Saavedra, Maria Teresa;Islas-Osuna, Maria Auxiliadora;Casas-Flores, Sergio
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.7
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pp.686-696
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2011
To deal with pathogens, plants have evolved sophisticated mechanisms including constitutive and induced defense mechanisms. Phytohormones play important roles in plant growth and development, as well as in the systemic response induced by beneficial and pathogen microorganisms. In this work, we identified an Aspergillus ustus isolate that promotes growth and induces developmental changes in Solanum tuberosum and Arabidopsis thaliana. A. ustus inoculation on A. thaliana and S. tuberosum roots induced an increase in shoot and root growth, and lateral root and root hair numbers. Assays performed on Arabidopsis lines to measure reporter gene expression of auxin-induced/ repressed or cell cycle controlled genes (DR5 and CycB1, respectively) showed enhanced GUS activity, when compared with mock-inoculated seedlings. To determine the contribution of phytohormone signaling pathways in the effect elicited by A. ustus, we evaluated the response of a collection of hormone mutants of Arabidopsis defective in auxin, ethylene, cytokinin, or abscisic acid signaling to the inoculation with this fungus. All mutant lines inoculated with A. ustus showed increased biomass production, suggesting that these genes are not required to respond to this fungus. Moreover, we demonstrated that A. ustus synthesizes auxins and gibberellins in liquid cultures. In addition, A. ustus induced systemic resistance against the necrotrophic fungus Botrytis cinerea and the hemibiotrophic bacterium Pseudomonas syringae DC3000, probably through the induction of the expression of salicylic acid, jasmonic acid/ethylene, and camalexin defense-related genes in Arabidopsis.
The study was carried out to establish an efficient protocol for shoot organogenesis and plant regeneration from stem explant cultures of Lycopersicon esculentum cv. Micro-Tom. The regenerated shoots obtained from stem explant cultures on solid MS medium containing the different concentrations of BAP. The highest number of shoots (5.3) per explant and shoot growth (0.7 cm) was obtained on MS medium containing 4.0 mg/L BA. The additions of AgNO$_3$ and putrescine substantially improved the shoot regeneration frequency, at the optimal concentration of 7 mg/L and 50 mg/L respectively. The regenerated shoots (about 1 cm) were normal and could be easily rooted with 0.1 mg/L IBA treatment. The rooted plants were hardened and transferred to vermiculite with a 92% survival rate where they grew normally.
Kim, Jin-Ho;Oh, Hye Jin;Kim, Su Hyun;Kim, Sang Yong;Suh, Gang Uk
Korean Journal of Plant Resources
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v.34
no.2
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pp.166-171
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2021
This research was conducted to investigate the effect of foliar application of 6-benzylaminopurine (BA), sprayed weeks after pinching (SWP), on ornamental usage of Veronica longifolia L, which is native to Korea. Foliar application of 0, 500, 1,000, and 2,000 mg/L BA on 10 cm long V. longifolia L. plant was evaluated at 0, 7, and 14 days after pinching for growth and flowering. The maximum result of multiple shooting was seen in the 2,000 mg/L BA at 1 week after pinching, and almost all the treatments showed dwarf growth in V. longifolia L. The number of days to flowering was delayed by BA treatments. Moreover, the length and the number of flowers decreased with high concentrations of BA. Thus, foliar application of BA via pinching technique can improve the ornamental usage of V. longifolia L. by controlling the plant type.
When effects of exogenous hormone on hairy root cultures of Raphanus sativs cv. Chungpihongsim examined, the highest anthocyanin synthesis and disorganization were observed when 2, 4-D was supplemented to the culture medium Cytokinins showed early weak induction after transfer and ABA showed inhibitory effect and GA3 showed no effects in anthocyanin synthesis. Hormones except for 2, 4-D in 1 mg/$\ell$ concentration did not induce disorganization of hairy root and retarded growth of hairy root. Time-course changes in anthocyanin synthesis, phenylalanine ammonia-lyase activity and chalcone synthase activity were examined in culture condition contalning 2, 4-D and kinetin. In a medium containing 2, 4-D, anthocyanin synthesis began to increase on the 9th day and reaching maxima on the 18th day after transfer. Maximum peak of PAL activity appeared on the 3-9th day and another minor peak appeared on the 18th day. CHS activity increased from 9th day, reaching maximum on the 18th day and remained at a relatively high level for culture period. In a medium containing kinetin, anthocyanin synthesis increased temporarily on the 6-9th days, early days after transfer and maintained at a low level for remaining culture period. Peak of PAL activity appeared on the 6th day and CHS activity increased from the 6th days, reaching maxima about 18th day and remained at a relatively high level. In particular, addition of kinetin after preculture in hormone free medium for 2 weeks which was thought of wound healing period showed no effects in anthocyanin synthesis. This results showed that stimulation of anthocyanin synthesis by 2, 4-D and kinetin was meaningfully connected with changes of PAL, CHS activity, and then suggested rate-limiting role of CHS on anthocyanin synthesis in that there is close correlation between anthocyanin synthesis and changes of CHS activity in time-course. Besides, it is considered that cytoklnins involving kinetin stimulated anthocyanin synthesis be due to "wound response" by cutting of young roots, and that difference in time-course peak and PAL, CHS activities expressed by 2, 4-D and kinetin result from occurrence of isozyme which have different regulatory mechanism.mechanism.
The objective of this study was carried out to investigate the proper plant growth regulator for increasing the number of flower, fruit set, and to enlarge the size of the berries in Ardisia pusilla. Flower bud formation was used rooted cutting, and fruit set, enlargement, and coloration of fruit were used with two years-old. $GA_3$ concentrations were treated with 0, 100, 200, or $400mg{\cdot}L^{-1}$. Flower bud formation was effective in $400mg{\cdot}L^{-1}$$GA_3$ and it was 1.8 times greater than control. Plant growth regulators were applied by foliar spray at full bloom stage to increase the fruit set. As a result, $GA_3$ was the most effective for increasing fruit set. Also, auxins of 4-CPA (Tomatotone, Donbu hitech Co., Korea) and dichloprop triethanol amine (Antifall, Bayer Crop Science Co., Ltd., Korea) were effective. When $GA_3$ concentrations of 0.5 and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ were used, fruit set (%) reached to 70% and 77%, respectively. Effectiveness of $GA_3$ was 1.8 times greater than control. Also, auxins, dichloprop triethanol amine increased to about 7-12% during fruit setting, but cytokinin and anti-gibberellin were ineffective. To investigate the fruit enlargement and coloration, $GA_3$ was treated with 0.3, 0.6, and $1.2mg{\cdot}L^{-1}$. Fruit enlargement was achieved to about 15% by $GA_3$$0.6mg{\cdot}L^{-1}$ when $GA_3$ was treated 3 times at the interval of 1 month per treatment when fruit size was about 2-3mm (after full-blooming two months). But anthocyanin contents for coloration of fruit skin were not significant according to $GA_3$ concentration. The results showed that $GA_3$ enhanced bud formation, fruit set and enlargement of fruit size in Ardisia pusilla.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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