The objective of this study was to identify proteins in the m. longissimus dorsi between early (12 months of age) and late (27 months of age) fattening stages of Hanwoo (Korean cattle) steers. Using two-dimensional electrophoresis and mass spectrometry, 8 proteins of 11 differentially expressed spots between the 12 and 27 month age groups were identified in the loin muscle. Among those that were differentially expressed, zinc finger 323 and myosin light chain were highly expressed in late-fattening stage, and two catabolic enzymes, triosephosphate isomerase (TPI) and succinate dehydrogenase (SDH) were expressed more in the early versus the late-fattening stage. In particular, the quantification of TPI and SDH by immunoblotting correlated well with fat content. Our data suggested that TPI and SDH are potential candidates as markers and their identification provides new insight into the molecular mechanisms and pathways associated with intramuscular fat contents of bovine skeletal muscle.
Molecular targeting for the altered signaling pathways has been proven to be effective for the treatment of many types of human cancer, including colorectal cancer (CRC). The dual phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K) and mammalian target of rapamycin (mTOR) inhibitor BEZ235 has shown to exhibit potent antitumor activity against solid tumors. Autophagy is a cellular lysosomal catabolic process to maintain metabolic homeostasis, which has been known to be induced in response to many therapeutic agents in cancer cells. This process is negatively regulated by mTOR and often acts as prosurvival or prodeath mechanism following cancer therapeutics. The current study was designed to investigate the antiproliferation activity of BEZ235 and to evaluate the role of autophagy induced by BEZ235 using HCT15 CRC cells bearing ras oncogene mutation. We found that BEZ235 decreases cell viability, which was mostly dependent on $G_1$ arrest of cell cycle via suppression of cyclin A expression. BEZ235 affects PI3K/Akt/mTOR signaling pathway by increasing the phosphorylation of AKT at $Ser^{473}$ and RAS/RAF/MEK/ERK pathway by decreasing the phosphorylation of ERK at $Tyr^{204}$. BEZ235 also stimulated autophagy induction as evidenced by the increased expression of LC3-II and abundant acidic vesicular organelles (AVOs) in the cytoplasm. In addition, the combination of BEZ235 with autophagy inhibitor chloroquine, a known antagonist of autophagy, counteracted the antiproliferation effect of BEZ235. Thus, our study indicates that autophagy induced in response to BEZ235 treatment appears to act as cell death mechanism in HCT15 CRC cells.
Dried fruits of Schizandra chinensis Baillon, Fructus Schisandrae, have been widely used for many years to prevent and treat various diseases in Asian countries including Korea and Russia. It has recently been reported that extracts of Fructus Schisandrae are effective for controlling muscle and skeletal diseases. In this study, we investigated the efficacy of ethanol extract of Fructus Schisandrae (EEFS) on apoptosis and inflammatory response in gastrocnemius muscle of dexamethasone-induced catabolic muscle atrophy mice as part of natural substance discovery and functional analysis for improving muscle function. According to the results of this study, EEFS supplementation attenuated body weight gains and suppressed calf thickness loss in dexamethasone-induced muscle atrophic mice. Gastrocnemius muscle immunohistochemistry showed that expression of caspase-3 and poly(ADP-ribose) polymerase, which are representative apoptotic markers, was markedly increased in dexamethasone control mice; however, their expression was effectively reduced in the EEFS-fed mice. EEFS supplementation also prevented dexamethasone-induced increases in immunoreactivity of muscle fibers for myostatin, an important negative regulator of skeletal muscle mass. In addition, EEFS significantly normalized the increased numbers of nitrotyrosine, 4-hydroxynonenal and inducible nitric oxide synthase-positive muscle fibers compared to that found in dexamethasone control mice. These results suggest that EEFS protects dexamethasone-induced muscular atrophy by decreasing apoptosis and inflammatory responses, and EEFS is more likely to be developed as a muscle strengthening agent.
Listeria monocytogenes is a gram-positive, facultative anaerobe food pathogen responsible for the listeriosis that mostly occurs during the low-temperature storage of a cold cut or dairy products. To understand the systemic response to a wide range of growth temperatures, L. monocytogenes were cultivated at a different temperature from 10℃ to 42℃, then whole cell proteomic analysis has been performed both exponential and stationary cells. The specific growth rate increased proportionally with the increase in growth temperature. The maximum growth rate was observed at 37℃ and was maintained at 42℃. Global protein expression profiles mainly depended on the growth temperatures showing similar clusters between exponential and stationary phases. Expressed proteins were categorized by their belonging metabolic systems and then, evaluated the change of expression level in regard to the growth temperature and stages. DnaK, GroEL, GroES, GrpE, and CspB, which were the heat&cold shock response proteins, increased their expression with increasing the growth temperatures. In particular, GroES and CspB were expressed more than 100-fold than at low temperatures during the exponential phase. Meanwhile, CspL, another cold shock protein, overexpressed at a low temperature then exponentially decreased its expression to 65-folds. Chemotaxis protein CheV and flagella proteins were highly expressed at low temperatures and stationary phases. Housekeeping proteins maintained their expression levels constant regardless of growth temperature or growth phases. Most of the growth related proteins, which include central carbon catabolic enzymes, were highly expressed at 30℃ then decreased sharply at high growth temperatures.
Kwak, Ju Young;Park, Jun Young;Nam, Kyung A;Son, Sang Hi;Seo, Son Sang
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.48
no.5
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pp.561-564
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2005
Isolated deficiency of 3-methylcrotonyl CoA carboxylase is a rare disorder of the catabolic pathway for leucine and many patients have mild symptoms or no symptom. However, the introduction of tandem mass spectrometry in newborn screening has revealed an unexpectedly high incidence of this disorder. We report an asymptomatic premature infant with isolated 3-methylcrotonyl CoA carboxylase deficiency detected by newborn screening program using tandem mass spectrometry. She was born at preterm, 36 weeks of gestation and her birth weight was 1,912 gm. She was delivered by Cesarian section due to maternal preeclampsia and oligohydramnios. An elevation of 3-hydroxyisovalerylcarnitine in a blood sample obtained at Seven days was detected by tandem mass screening. Massively elevated excretion of 3-hydroxyisovalerate and 3-methylcrotonylglycine was detected in the urine collected at 15 days. L-carnitine(100 mg/kg/day) was administrated orally to correct sencondary carnitine deficiency. Carnitine is conjugated with metabolites, to decrease the potential toxic effects. She is asymptomatic to date, and her growth and development are within normal limits.
Park Mi-So;Bae Jong-Won;Han Ju-Hee;Lee Eun-Yeol;Lee Sun-Gu;Park Sung-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.7
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pp.1032-1040
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2006
Some Pseudomonas species can grow on styrene as a sole carbon and energy source. From the new isolate Pseudomonas putida SN1, the genes for styrene catabolism were cloned and sequenced. They were composed of four structural genes for styrene monooxygenase (styA and styB), styrene oxide isomerase (styC), and phenylacetaldehyde dehydrogenase (styD), along with two genes for the regulatory system (styS and styR). All the genes showed high DNA sequence (91% to 99%) and amino acid sequence (94% to 100%) similarities with the corresponding genes of the previously reported styrene-degrading Pseudomonas strains. A recombinant Escherichia coli to contain the styrene monooxygenase from the SN1 was constructed under the control of the T7 promoter for the production of enantiopure (S)-styrene oxide, which is an important chiral building block in organic synthesis. The recombinant E. coli could convert styrene into an enantiopure (S)-styrene oxide (ee >99%) when induced by IPTG The maximum activity was observed as 140 U/g cell, when induced with 1 mM IPTG at $15^{\circ}C$.
Adrenal glucocorticoids, secreted by the stimulus of adrenocorticotropic hormone (ACTH), are catabolic hormones in the pig. The present study was conducted to find whether active immunization against ACTH would suppress cortisol secretion accompanied by an increased growth rate in growing-finishing barrows. ACTH was conjugated to keyhole limpet hemocyanin or human histone using glutaraldehyde or 3-maleimidobenzoic acid N-hydroxysuccinimide, under a 2 (ACTH vs no hapten)${\times}$2 (carrier)${\times}$2 (crosslinker) factorial arrangement of treatments. Cross-bred barrows weighing approximately 25 kg were injected with an ACTHcarrier or carrier only conjugate every 4th wk and slaughtered at approximately 110 kg body weight. Antibodies against ACTH were detected in serum, as determined by $[^{125}I]$ACTH-binding activity, in most animals immunized against the ACTH conjugate, but not in carrier only-injected animals, except for the animals which had received the hapten conjugated to histone via glutaraldehyde. The $[^{125}I]$ACTH-binding activity of serum increased after the second booster injection, but overall ACTH antibody titer was very low. Main effect was not detected not only for the carrier and crosslinker but for the hapten in serum cortisol concentration, ADG, loin muscle area, backfat thickness and longissimus muscle composition including fat and protein. In addition, bound $[^{125}I]$ACTH percentage had no relation to cortisol concentration or to any of the above growth-related variables. Results suggest that ACTH or its conjugates used in the present study were not immunogenically potent enough to affect the glucocorticoid secretion and thus the growth of the immunized pigs.
Background: Preoperative blocking of surgical nociceptive inputs may prevent sensitization of CNS and reduce postoperative pain. The stress responses to surgical trauma consist of increase in catabolic hormones and decrease in anabolic hormones. We studied whether preoperative intravenous morphine could affect postoperative pain and change plasma cortisol and serum glucose levels. Methods: Thirty eight patients undergoing total abdominal hysterectomy were randomly assigned to one of three groups. Control group (n=11) did not received intravenous morphine, preoperative group (n=13) received intravenous morphine (0.1 mg/kg as a bolus 10 min before operation and followed by 1.5 mg/hr for 10 hours), postoperative group (n=14) received the same doses and method of intravenous morphine of preoperative group postoperatively. Postoperative pain relief was provided with i.v. fentanyl through Patient-Controlled-Analgesia Pump. Postoperative visual analogue scores (VAS), analgesic requirement (first request time, total amounts used), side effects, plasma cortisol and serum glucose levels were compared. Results: VAS were different between control group and the other two goups, but were not different between preoperative and postoperative group. Total amounts of used fentanyl were not different among groups, but first request time were significantly delayed in the preoperative group compared with the other two groups ($66.2{\pm}33.9$ vs $39.0{\pm}15.4$ and $45.0{\pm}14.9$ min respectively, p<0.05). Plasma cortisol and serum glucose levels were not different among groups. Conclusions: Above dosage of preoperative and postoperative morphine has analgesic effect, but could not block surgical stress induced plasma cortisol and serum glucose increase.
Objectives: Malaria has been a major global health problem in recent times with increasing mortality. Current treatment methods include parasiticidal drugs and vaccinations. However, resistance among malarial parasites to the existing drugs has emerged as a significant area of concern in anti-malarial drug design. Researchers are now desperately looking for new targets to develop anti-malarials drug which is more target specific. Malarial parasites harbor a plastid-like organelle known as the 'apicoplast', which is thought to provide an exciting new outlook for the development of drugs to be used against the parasite. This review elaborates on the current state of development of novel compounds targeted againstemerging malaria parasites. Methods: The apicoplast, originates by an endosymbiotic process, contains a range of metabolic pathways and housekeeping processes that differ from the host body and thereby presents ideal strategies for anti-malarial drug therapy. Drugs are designed by targeting the unique mechanism of the apicoplasts genetic machinery. Several anabolic and catabolic processes, like fatty acid, isopenetyl diphosphate and heme synthess in this organelle, have also been targeted by drugs. Results: Apicoplasts offer exciting opportunities for the development of malarial treatment specific drugs have been found to act by disrupting this organelle's function, which wouldimpede the survival of the parasite. Conclusion: Recent advanced drugs, their modes of action, and their advantages in the treatment of malaria by using apicoplasts as a target are discussed in this review which thought to be very useful in desigining anti-malarial drugs. Targetting the genetic machinery of apicoplast shows a great advantange regarding anti-malarial drug design. Critical knowledge of these new drugs would give a healthier understanding for deciphering the mechanism of action of anti-malarial drugs when targeting apicoplasts to overcome drug resistance.
Soil is a dynamic biological system, in which it is difficult to determine the composition of microbial communities. Knowledge of microbial diversity and function in soils are limited because of the taxonomic and methodological limitations associated with studying the organisms. In this review, approaches to measure microbial diversity in soil were discussed. Research on soil microbes can be categorized as structural diversity, functional diversity and genetic diversity studies, and these include cultivation based and cultivation independent methods. Cultivation independent technique to evaluate soil structural diversity include different techniques such as Phospholipid Fatty Acids (PLFA) and Fatty Acid Methyl Ester (FAME) analysis. Carbon source utilization pattern of soil microorganisms by Community Level Physiological Profiling (CLPP), catabolic responses by Substrate Induced Respiration technique (SIR) and soil microbial enzyme activities are discussed. Genetic diversity of soil microorganisms using molecular techniques such as 16S rDNA analysis Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE) / Temperature Gradient Gel Electrophoresis (TGGE), Terminal Restriction Fragment Length Polymorphism (T-RFLP), Single Strand Conformation Polymorphism (SSCP), Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) / Amplified Ribosomal DNA Restriction Analysis (ARDRA) and Ribosomal Intergenic Spacer Analysis (RISA) are also discussed. The chapter ends with a final conclusion on the advantages and disadvantages of different techniques and advances in molecular techniques to study the soil microbial diversity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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