Novel H5N6 highly pathogenic avian influenza viruses (HPAIVs) were isolated from duck farms and migratory bird habitats in South Korea in November to December 2017. Genetic analysis demonstrated that at least two genotypes of H5N6 were generated through reassortment between clade 2.3.4.4 H5N8 HPAIVs and Eurasian low pathogenic avian influenza virus in migratory birds in late 2017, suggesting frequent reassortment of clade 2.3.4.4 H5 HPAIVs and highlighting the need for systematic surveillance in Eurasian breeding grounds.
Background: Sperm quality and the number of sperm introduced into the uterus during artificial insemination (AI) are pivotal factors influencing pregnancy outcomes. However, there have been no reports on the relationship between sperm concentration at AI and sperm quality in Hanwoo cattle. In this study, we examined sperm quality and pregnancy rates after AI using sperm inseminated at different concentrations. Methods: We evaluated the motility, viability, and acrosomal membrane integrity of sperm at different concentrations (10, 15, 18, and 20 million sperm/straw) in 0.5-mL straws. Subsequently, we compared the pregnancy rates after AI with different sperm concentrations. Results: After freeze-thawing, sperm at the assessed concentrations showed similar viability and acrosomal membrane integrity. After AI, cattle in the 10 million group had significantly lower pregnancy rates compared to those in the 18 and 20 million groups. Conversely, there were no statistically significant variances observed between cattle in the 10 and 15 million groups. Conclusions: Sperm at concentrations of 10, 15, 18 and 20 million per straw exhibited comparable motility, viability, and acrosomal membrane integrity. However, a concentration of at least 18 million sperm per straw is required to achieve a consistent rate of pregnancy rate in Hanwoo cattle after AI.
Recently, poly-γ-glutamic acid synthetase A (pgsA) has been applied to display exogenous proteins on the surface of Lactobacillus casei or Lactococcus lactis, which results in a surface-displayed component of bacteria. However, the ability of carrying genes encoded by plasmids and the expression efficiency of recombinant bacteria can be somewhat affected by the longer gene length of pgsA (1,143 bp); therefore, a truncated gene, pgsA, was generated based on the characteristics of pgsA by computational analysis. Using murine IL-10 as an exogenous gene, recombinant Lactobacillus plantarum was constructed and the capacity of the surface-displayed protein and functional differences between exogenous proteins expressed by these strains were evaluated. Surface expression of IL-10 on both recombinant bacteria with anchorins and the higher expression levels in L. plantarum-pgsA'-IL-10 were confirmed by western blot assay. Most importantly, up-regulation of IL-1β, IL-6, TNF-α, IFN-γ, and the nuclear transcription factor NF-κB p65 in RAW264.7 cells after stimulation with Poly(I:C) or LPS was exacerbated after co-culture with L. plantarum-pgsA. By contrast, IL-10 expressed by these recombinant strains could reduce these factors, and the expression of these factors was associated with recombinant strains that expressed anchorin (especially in L. plantarum-pgsA'-IL-10) and was significantly lower compared with the anchorin-free strains. These findings indicated that exogenous proteins could be successfully displayed on the surface of L. plantarum by pgsA or pgsA', and the expression of recombinant bacteria with pgsA' was superior compared with bacteria with pgsA.
Tissue plasminogen activator (tPA) plays important roles in the brain after excitotoxic injury. This study was conducted to produce transgenic pig harboring human tissue plasminogene activator (htPA) gene. Recombinent htPA(rhtPA) genes containing bovine-β-casein promoter (bBC) were prepared for microinjection and testified the expression level of htPA protein from the Chinese hamster ovary (CHO) cell lines before NDA microinjection into the porcine pronuclei. (omitted)
Transgenic animals are produced primarily by microinjecting exogenous DNA into the male pronuclei of a zygote. Microinjection method for gene transmitting is successful in mice but not efficient in farm animals, limiting it's general utility such as a large scale facility and labour. Based on our finding that sperm cells bind with exogenous DNA, sperm was used as a vector for producing transgenic animals to introduced green fluorescence protein(GFP) gene. (omitted)
Hyaluronic acid (HA) is one of the most abundant glycosaminoglycans (GAGs) in the female reproductive tract such as uterine, oviductal and follicular fluids in mouse, pig, cattle and human. CD44 is the principal cell membrane receptor for HA, expressed from the 1-to 8-cell stage in human embryos, during post-implantation mouse and bovine embryogenesis and on the surface of differentiated embryonic stem cells. (omitted)
DNA barcoding without assessing reliability and validity causes taxonomic errors of species identification, which is responsible for disruptions of their conservation and aquaculture industry. Although DNA barcoding facilitates molecular identification and phylogenetic analysis of species, its availability in clariid catfish lineage remains uncertain. In this study, DNA barcoding was developed and validated for clariid catfish. 2,970 barcode sequences from mitochondrial cytochrome c oxidase I (COI) and cytochrome b (Cytb) genes and D-loop sequences were analyzed for 37 clariid catfish species. The highest intraspecific nearest neighbor distances were 85.47%, 98.03%, and 89.10% for COI, Cytb, and D-loop sequences, respectively. This suggests that the Cytb gene is the most appropriate for identifying clariid catfish and can serve as a standard region for DNA barcoding. A positive barcoding gap between interspecific and intraspecific sequence divergence was observed in the Cytb dataset but not in the COI and D-loop datasets. Intraspecific variation was typically less than 4.4%, whereas interspecific variation was generally more than 66.9%. However, a species complex was detected in walking catfish and significant intraspecific sequence divergence was observed in North African catfish. These findings suggest the need to focus on developing a DNA barcoding system for classifying clariid catfish properly and to validate its efficacy for a wider range of clariid catfish. With an enriched database of multiple sequences from a target species and its genus, species identification can be more accurate and biodiversity assessment of the species can be facilitated.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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