남조세균 Anabaena (Cyanobacteria, Nostocales)는 담수 생태계에서 녹조 현상을 유발하거나 일부 종은 간독소(hepatotoxin)를 갖고 있어 수질관리 차원에서 주목 받아 왔다. 본 연구는 Anabaena RNA polymerase beta subunit (rpoB) 유전자 염기서열을 규명하였으며, 분류학적 분자 마커로 사용하기 위하여 이들 염기서열의 특성을 평가하였다. Anabaena rpoB 유전자는 16S rRNA 유전자와 비교하여 염기 유사도가 낮으며 유전자 변이가 큰 것으로 분석되었으며, 통계적으로 유의한 차이를 보였다(Student t-test, p<0.01). Parsimony 분석을 통해 rpoB 유전자가 4.8배의 속도로 빠르게 진화하는 것으로 파악되었다. 또한 rpoB 유전자 phylogeny 분석에서 16S rRNA tree보다 높은 해상도로 Anabaena 균주를 명확하게 구분해 주었다. 본 연구 결과는 Anabaena의 종 식별, 분자계통 분류, 분자적 검출을 위해 rpoB 유전자가 매우 효과적이라는 것을 제시해 준다.
Effects of simazine [2-chloro-4,6-bis(methylamino)-s-triazine] on the photochemical reactions of isolaed spinach chloroplasts and crude thylakoids of Anabaena inequalis UTEX B-381 were compared. Simazine inhibited photosynthetic O2 evolution and increased the chlorophyll fluorescence in whole cells of Anabaena. The electron transfer from diphenylcarbazide to 2,6-dichlorophenolindophenol was inhibited by simazine treatment in spinach chloroplasts, but not in crude thylakoids of Anabaena. In spinach chloroplasts, the chlorophyll fluorescence was increased by simazine treatment in the presence of diphenylcarbazide and ferricyanide, but not in the presence of diphenylcarbazide and silicomolybdate. In crude thylakoids of Anabaena, simazine treatment did not increase the chlorophyll fluorescence in the presence of either diphenylcarbazide and silicomolybdate, or diphenylcarbazide and ferricyanide. There results suggest that the inhibitory site of simazine on photosynthetic electron transport chain of anabaena is different from that of spinach chloroplasts. And there may be a possiblity that the inhibition site of simazine in Anabaena lies on the donor side of photosystem II, before the site of electron donation by diphenylcarbazide.
Population dynamics of Anabaena and the anatoxin-a concentration were monitored with physicochemical parameters at 3 sites in the lower Naktong River from May to September in 2000. Total 4 species of Anabaena (A. flosaquae, A. smithii, A. ucrainica and A. mucosa) were identified with morphological characterisitcs. Anabaena flos-aquae was most abundant among the populations. The standing crop of Anabaena ranged from 10 to 11,220 cells · $ml^{-1}$ and biomass of Anabaena more 1,000 cells · $ml^{-1}$ was obseved once at St. Mulgeum and St. Seonam, twice at St. Hagueon out of total 9 samplings. There were not significant correlations between the standing crop of Anabaena and other physicochemical parameters such as temperature, nitrate, total nitrogen, phosphate, total phophorus and N/P ratios. The frequency of trichomes with akinetes was low and ranged from 0 to 4% in the total Anabaena population and A. smithii showed highest frequency of 2.8% among all species. The population at St. Seonam showed highest frequency of 1.4% among all sampling sties. The population in September showed the highest frequency of 3.0% among all sampling period. The frequency of trichomes with heterocysts was low and ranged from 1 to 87% inthe total Anabaena population and A. smithii showed highest frequency of 55.1% among all species. The population at St. Mulgeum showed highest frequency of 17.6% among all sampling sites. The population in August showed the highest frequency of 21.4% among all sampling period. The frequency of trichomes with akinetes and/or heterocysts was not related to all the physicochemical parameters of temperature, nitrate, total nitrogen, phosphate, total phosphorus and N/P ratios. The anatoxin-a concentations were determined in algal materials dominated by Microcystis and Anabaena from June though August by derivatization using 7-fluoro-4-nitro-2, 1,3-benzoxadiazole (NBD-F) and HPLC analysis with fluorimetric detection. All the concentrations were below the detection limit of 0.1 ㎍ · $l^{-1}$ in the present study.
대청호의 주요 정점에서 수화의 발생 및 소멸에 따른 환경요인의 변화와 시안세균, 종속영양세균, 그리고 Anabaena cylindrica 생장억제미생물 분포도의 상관관계를 확인하였다. 수온은 온대지역 수계에서 확인할 수 있는 전형적인 변화 양상을 나타내었다. pH와 용존산소량, 클로로필 a는 수화 발생기에 높고, 수화의 소멸과 함께 그 농도가 낮아졌다. 조사정점에서는 인이 1차 생산력의 제한요인으로 작용하며, 수화발생기에는 수중생물에 의해 질소고정이 이루어짐으로써 총질소의 농도가 상승하였다. 조사정점에서 시안세균은 6월 17일부터 분포하기 시작하여 11월 10일까지 Anabaena sp., Aphanizomenon spp., Microcystis spp., Oscillatoria spp., Phormidium spp. 등이 관찰되었다. Anabaena spp.는 7월 23일부터 9월 22일까지 비교적 높은 분포도를 보였고, 9월 29일 이후에는 완전히 소멸하였다. 수화발생기에 종속영양세균과 시안세균 군집은 서로 반비례적으로 변화하였다. Anabaena spp.의 개체군이 증가 또는 사멸하는 시기에 A. cylindrica 생장억제미생물의 분포도가 높았고, A. cylindrica 생장억제미생물 개체수가 감소하면서 종속영양세균의 개체수가 증가함으로써 세가지 생물군의 군집 사이에는 일정한 연관성이 있음을 확인할 수 있었다. 이상의 결과는 자연수계 분포하는 미생물은 시안세균의 생장 조절자 역할을 하며, 특히 수화의 소멸 과정에는 이들 미생물이 지대한 역할을 한다는 사실을 의미한다.
This study presents the characteristics of growth and morphology of Anabaena sp., a representative filamentous cyanobacterium, depending on temperature variation from 10 to 30 ℃. Both the filament density (or number) and its length of Anabaena were highly affected by temperature, as well as growth stage. Rapid growth at a higher temperature led to an increase in Anabaena filament density, as well as optical density at 680 nm (OD680). However, the number of vegetative cells within a single filament of Anabaena grown at 30 ℃ was smaller than those grown at lower temperatures, due to the intercalary division of the filament. Of the three different cells comprising a single Anabaena filament, the vegetative cell marginally affects the growth of Anabaena. The main dimensions of the vegetative cell, i.e., length and width, depend on the temperature and growth stage. The length-to-width (L/W) ratios of vegetative cells and akinetes were relatively consistent regardless of the temperature. However, in vegetative cells with dichotomous growth, the L/W ratio shows clear differences depending on their growth stage. It has been demonstrated that the L/W ratio could be used as an indicator to indirectly predict the growth stage of on-sit Anabaena samples.
Interactive effects of UV-B and Cd on growth, pigment, photosynthesis, and lipid peroxidation have been studied in Anabaena, Microcystis, and Nostoc; all the tested cyanobacteria showed differential sensitivity to different dosage of UV-B and Cd alone as well as in combination. Phycocyanin was severely affected by UV-B and Cd by all the strains; the degree of pigment bleaching was most pronounced in Anabaena followed by Microcystis and Nostoc. $UV-B_2+Cd_2$ produced nearly 83, 78, and 65% inhibition of phycocyanin in Anabaena, Microcystis, and Nostoc, respectively. The above treatment also significantly decreased the contents of Chl ${\alpha}$ and carotenoid. Presence of capsule in Microcystis protected the phycocyanin bleaching as compared to decapsulated cells. Laboratory-grown Microcystis revealed about 75 and 80% inhibition, following $UV-B_2+Cd_2$ treatment, respectively. in capsulated and decapsulated cells. Damage caused by Cd was more pronounced than UV-B. Inhibition of photosynthesis did occur in all the test strains, being maximum in Anabaena. PS II was the most sensitive component of the electron transport chain, showing 84, 80, and 70% inhibition in Anabaena, Microcystis, and Nostoc, respectively. As compared to control, significant lipid peroxidation (6.5-fold higher) was observed in Anabaena with $UV-B_2+Cd_2$, $^{14}C-uptake$ was more susceptible to Cd and Uv-B than oxygen-evolution. Approximately 84, 80, and 76% inhibition of $^{14}C-uptake$ was observed in Anabaena, Microcystis, and Nostoc, respectively. Similarly, $UV-B_2+Cd_2$ inhibited APT content of Anabaena by 87%. This ,study suggests that inhibition of carbon fixation was due to decreased ATP content of the test cyanobacteria by UV-B+Cd, where Anabaena was the most sensitive and Nostoc the most tolerant.
This study characterizes three $Anabaena$ strains and 5 $Trichormus$ strains isolated from Korean waters and 3 $Anabaena$$flos-aquae$ strains procured from the UTEX based on morphological features and molecular analyses. The $Anabaena$ and $Trichormus$ isolates were morphologically assigned to $A.$$variabilis$ K$\ddot{u}$tzing and $T.$$variabilis$(K$\ddot{u}$tzing ex Bornet et Flahault) Kom$\acute{a}$rek et Anagnostidis, respectively. The $Anabaena$ and $Trichormus$ strains differed significantly in the mean length of their vegetative cells. The 16S rRNA genes from the $Anabaena$ strains showed a 100% identity to that from $A.$$variabilis$ ATCC 29413, while the 16S rRNA genes from the $Trichormus$ strains showed a 99.9% identity to that from $T.$$variabilis$ GREIFSWALD. The overall topology was in agreement for the 16S rRNA gene and $cpcBA$-IGS trees in the both tree-constructing methods. In a neighbor-joining tree based on the 16S rRNA gene, the 3 $Anabaena$ strains were asso-ciated with $A.$$variabilis$, the 5 $Trichormus$ strains with $T.$$variabilis$, and the 3 $Anabaena$ (UTEX) strains were with $Nostoc$. To date, this is the first report on $A.$$variabilis$ and $T.$$variabilis$ strains originating from Korea.
2012년 북한강수계 전역에 걸쳐 대발생을 일으킨 남조 Anabaena의 분자생물학적 특성을 검토하였다. 시료는 2012년 7월 13일에 남조 Anabaena 밀도가 높았던 3개 호소- 의암호, 청평호, 팔당호에서 각각 채집하였다. 분석은 선행연구 문헌을 근거로 하는 형태학적 분석, 16S rRNA 염기서열 분석을 통한 분자계통학적 분석을 동시에 실시하였다. 결과를 종합하면 북한강수계 3개 호소에서 조류 대발생을 일으킨 남조 Anabaena는 모두 동일종 Anabaena crassa (Lemmermann) Komark.-Legn. & Cronberg이며, 동시에 출현하고 본 종과 형태 및 분자생물학적으로 매우 유사한 A. circinalis는 환경요인에 따라 형태변이가 쉽게 일으키는 동일종으로 밝혀졌다.
This study was carried out in the Bukhan River in the summer of 2014 and 2015, to identify the relationship between geosmin and the morphological changes in Anabaena. Identification of Anabaena was conducted using morphological and molecular analyses. Anabaena in this study was similar to Anabaena circinalis, A. crass, and A. spiroides with regard to regular coils, vegetative cell, akinete shape, and size, hoever, it was distinguishabl from A. crass and A. spiroides because of its larger trichome coil size. Additionally, the sequences of phycocyanin (PC) gene from Anabaena showed a 99% genetic similarity with A. circinalis NIES-1647 strain. The coil diameter of trichome ranged from 106 to $899{\mu}m$, and the diameter and abundance showed an insignificant positive correlation (r=0.544, p<0.05). The result of relationship between the coil diameter and the cell number per 360-degree rotation was kept at $33.8{\pm}5.2$ cells per $100{\mu}m$ diameter despite variable diameter. The average geosmin concentrations in 2014 and 2015 were investigated to be 99 ng/L and 35 ng/L, respectively. A. circinalis cell density contributed considerably to the change in geosmin and was positively correlated with geosmin concentration (2014; r=0.599, p<0.01, 2015; r=0.559, p<0.01). Our results suggest that geosmin and coil diameter could be estimated with the help of cell density.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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