An actinobacterial strain designated Gordonia sp. MMS17-SY073 (=KCTC 49257) was isolated from a coastal soil of an island, and its complete genome was analyzed. A single contig consisting of 5,962,176 bp with the G + C content of 67.4% was obtained, and the annotation resulted in 5,201 protein-coding genes, 6 rRNA genes and 45 tRNA genes. Strain MMS17-SY073 was closest to the type strain of Gordonia soli based on the 16S rRNA gene sequence comparison, sharing 98.5% sequence similarity. A number of biosynthetic gene clusters for secondary metabolites, non-ribosomal peptide synthetase types in particular, could be identified from the genome.
A urease-positive bacterium isolated from sea water was identified as Photobacterium sp. by morphological, biochemical, and 16s rRNA gene analyses and named Photobacterium sp. strain HA-2. 2.0-fold increase enzyme activity was observed in LB medium containing 3% NaCl and 0.1% urea or not and the enzyme activity was 16.0-fold lower compared to urease-positive Vibrio parahaemolyticus AQ4673 strain when grown in the LB medium containing 3% NaCl with 0.1% urea. The cloning and sequencing of Photobacterium sp. strain HA-2 urease gene cluster is currently being analyzed in our laboratory.
Proteases catalyze hydrolytic cleavage of a peptide bond between amino acids and occupy pivotal positions in application in physiological and commercial fields. During the screening for novel bacteria producing extracellular protease, two bacterial strains, WD12 and WD32, were isolated from rotten trees and they made clear zone on LB plates supplemented with 1% skim milk. The similarities of 16S rRNA gene sequence of either WD12 or WD32 to GenBank database showed the highest to Pseuoxanthomonas mexicana as 97.8 and 99.8%, respectively. Phylogenetic analysis showed that both isolated was located within the cluster comprising P. mexicana and P. japonesis. WD12 and WD32 were catalase- and oxidase-positive, Gram-negative rod strains. In case of WD12, it could assimilate malate, but could not assimilate D-mannose, which were different characteristics from P. mexicana. Both Pseuoxanthomonas sp. WD12 and WD32 optimally produced extracellular protease at $35-37^{\circ}C$, and maximal activity showed as 656 unit/ml and 267 unit/ml, respectively.
The objective of this study was to investigate differences in the faecal microbial composition among Lantang, Bama, Erhualian, Meishan, Xiaomeishan, Duroc, Landrace, and Yorkshire sows and to explore the possible link of the pig breed with the gut microbial community. Among the sows, the Meishan, Landrace, Duroc, and Yorkshire sows were from the same breeding farm with the same feed. Fresh faeces were collected from three sows of each purebred breed for microbiota analysis and volatile fatty acid (VFA) determination. Denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) analysis revealed that samples from Bama, Erhualian, and Xiaomeishan sows, which from different farms, were generally grouped in one cluster, with similarity higher than 67.2%, and those from Duroc, Landrace, and Yorkshire sows were grouped in another cluster. Principal component analysis of the DGGE profile showed that samples from the foreign breeds and the samples from the Chinese indigenous breeds were scattered in two different groups, irrespective of the farm origin. Faecal VFA concentrations were significantly affected by the pig breed. The proportion of acetate was higher in the Bama sows than in the other breeds. The real-time PCR analysis showed that 16S rRNA gene copies of total bacteria, Firmicutes and Bacteroidetes were significantly higher in the Bama sows compared to Xiaomeishan and Duroc sows. Both Meishan and Erhualian sows had higher numbers of total bacteria, Firmicutes, Bacteroidetes and sulphate-reducing bacteria as compared to Duroc sows. The results suggest that the pig breed affects the composition of gut microbiota. The microbial composition is different with different breeds, especially between overseas breeds (lean type) and Chinese breeds (relatively obese type).
Duroc is widely used to improve the meat quality and productivity. To elucidate the phylogenetic relation and the sequence specificity for the maternal property, the complete sequence of mitochondrial genome was determined and the population diversity of Duroc was investigated in this study. The length of mtDNA tested is 16,584-bp. There are several insertion/deletion mutations in the control region and coding regions for tRNA and rRNA, respectively, but not in peptide-coding regions. Four peptide-coding genes(COⅡ, COⅢ, ND3 and ND4) showed incomplete termination codon sequences such as T--, and two(ND2 and ND4L) did alternative initiation codons(AIC), respectively. Especially, the initiation codon sequences of ND2 gene were polymorphic in this population. Polymorphisms were detected in 11-bp duplication motif within control region as well as ND2 and CYTB. Variation patterns observed from the tests on three mtDNA regions were linked completely and then two haplotypes obtained from combining the data dividing this population. Duroc mtDNA is observed at the European pig cluster in the phylogenetic tree, however, the results from the population analyses supported previous opinions. This study suggests that the breed Duroc was mainly originated from the European pig lineage, and Asian lineage was also used to form the pig breed Duroc as maternal progenitors.
ZHAO XIN QING;KIM KYOUNG ROK;SANG LI WEI;KANG SUK HO;YANG YOUNG YELL;SUH JOO WON
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.2
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pp.346-353
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2005
A 50-kb chromosome DNA region was isolated from Streptomyces kanamyceticus by screening the fosmid genomic library, using the 16S rRNA methylase gene (kmr) as a probe. Sequence analysis of this region revealed 42 putative open reading frames (ORFs), which included biosynthetic genes such as genes responsible for 2-deoxystreptamine (2DOS) biosynthesis as well as genes for resistance and regulatory function. Also, the kanamycin acetyltransferase gene (kac) was characterized by in vitro enzyme assay, which conferred E. coli BL21 (DE3) with 10, 50, and 80-times higher resistance to kanamycin A, tobramycin, and amikacin, respectively, than the control strain had, thus strongly indicating that the isolated gene cluster is very likely involved in kanamycin biosynthesis. This work provides a solid basis for further elucidation of the kanamycin biosynthesis pathway as well as the productivity improvement and construction of new hybrid antibiotics.
Ten Leonid N.;Liu, Qing-Mei;Im Wan-Taek;Aslam Zubair;Lee, Sung-Taik
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.11
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pp.1728-1733
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2006
A Gram-negative, strictly aerobic, nonmotile, and nonspore-forming bacterial strain, designated $T5-12^T$, was isolated from compost and characterized using a polyphasic taxonomical approach. The isolate was positive for catalase and oxidase tests. It could degrade DNA, but was negative for degradation of macromolecules such as casein, collagen, starch, chitin, cellulose, and xylan. The DNA G+C content was 36.0 mol%. The predominant isoprenoid quinone was menaquinone 7 (MK-7). The major fatty acids were $iso-C_{15:0}$ (45.6%), $iso-C_{17:0}$ 3OH (17.2%), and summed feature 4 ($C_{16:0}\;{\omega}7c$ and/or $iso-C_{15:0}$ 2OH, 14.9%). Comparative 16S rRNA gene sequence analysis showed that strain $T5-12^T$ fell within the radiation of the cluster comprising members of the genus Sphingobacterium. Strain $T5-12^T$ exhibited lower than 94% of 16S rRNA gene sequence similarity with respect to the type strains of recognized Sphingobacterium species. On the basis of its phenotypic properties and phylogenetic distinctiveness, strain $T5-12^T$ ($=KCTC\;12578^T=LMG\;23401^T=CCUG\;52467^T$) should be classified in the genus Sphingobacterium as the type strain of a novel species, for which the name Sphingobacterium composti sp. novo is proposed.
This study was conducted to investigate the phenotypic and genotypic characteristics of Korean isolates of Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakii). A total of 43 Cronobacter spp., including 5 clinical isolates, 34 food isolates, 2 environmental isolates, and 2 reference strains (C. sakazakii ATCC 29004 and C. muytjensii ATCC51329) were used in this study. Korean isolates of Cronobacter spp. were divided into 11 biogroups according to their biochemical profiles and 3 genomic groups based on the analysis of their 16S rRNA gene sequences. Biogroups 1 and 2 contained the majority of isolates (n=26), most of which were contained in 16S rRNA cluster 1 (n=34). Korean isolates of Cronobacter spp. showed diverse biochemical profiles. Biogroup 1 contained C. sakazakii GIHE (Gyeonggido Research Institute of Health and Environment) 1 and 2, which were isolated from babies that exhibited symptoms of Cronobacter spp. infection such as gastroenteritis, sepsis, and meningitis. Our finding revealed that Biogroup 1, C. sakazakii, is more prevalent and may be a more pathogenic biogroup than other biogroups, but the pathogenic biogroup was not represented clearly among the 11 biogroups tested in this study. Thus, all biogroups of Cronobacter spp. were recognized as pathogenic bacteria, and the absence of Cronobacter spp. in infant foods should be constantly regulated to prevent food poisoning and infection caused by Cronobacter spp.
Two strains of cyanobacteria were isolated from the soil of Seodaemun-gu, Seoul and from the gravel of the Ansung Stream, Gyeonggi Province, Korea, respectively. They were identified as Pantanalinema rosaneae and Alkalinema pantanalense under the Leptolyngbyaceae through the morphological, ecological, and molecular analyses and first reported in Korea. Belonging to the Leptolyngbya morphotypes, they are thin filamentous cyanobacteria and morphologically indistinguishable cryptic species. The strains of P. rosaneae and A. pantanalense isolated in Korea revealed the same cluster as their type species in the phylogenetic analysis using the 16S rRNA gene sequences, and similarities in the secondary structures of 16S-23S ITS sequences. Although both P. rosaneae and A. pantanalense were collected from water samples in the Pantanal wetland of Brazil, the P. rosaneae obtained in Korea, was soil-dwelling subaerophytic species whereas A. pantanalense was epilithic species living on gravel in the freshwater. Therefore, they are considered to have an extensive habitat.
The identity of toxin producers remains only hypothesis unless there were identified by strain isolation and analytical confirmation of both the cyanotoxin production and the genetic identity of the monoculture. The purposes of this study were to identify a morphologic and phylogenetic classification in Aphanizomenon flos-aquae strains isolated from the Nakdong River and to investigate the potential ability of the strains to produce toxins such as saxitoxin and cylindrospermopsin using target genes. The 16S rRNA and sxtA, sxtI, cyrA, cyrJ genes were analyzed on two strains (DGUC001, DGUC003) isolated from the Nakdong River. Morphological features of the strains were observed a shape of aggregated trichomes in parallel fascicles which can reach up to macroscopic size and a hyaline terminal cell without aerotope. In addition, the 16S rRNA phylogenetic analyses showed that the strains were identified as the same species with high genetic similarity of 98.4% and grouped within a monospecific andsupported cluster I of Aphanizomenon flos-aquae selected from GenBank of the NCBI. The cyrA and cyrJ genes encoding for the cylindrospermopsin-biosynthesis were not detected in the present study. The sxtA gene was in detected both the two strains, whereas the sxtI gene which had been suggested as a suitable molecular marker to detect saxitoxin-producing cyanobacteria was not found both the strains. Thus, the two strains isolated from Nakdong River were identified as the same species of Aphanizomenon flos-aquae Ralfs ex Bornet et Flahault 1888, the two strains were confirmed as potential non-producing strains of the saxitoxin and cylindrospermopsin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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