본 실험에서 Lilium oriental hybrid 'Casa Blanca'. asiatic hybrid 'Mona'와 longiflorum hybrid 'Hinomoto'의 기내 인편으로부터의 자구 형성 및 비대를 위해 MS 배지 내 무기물 농도를 0.5∼2배로, 배지 내 총 질소 농도를 30∼120 mM로 달리하여 자구 형성과 생장을 조사한 결과 인편으로부터의 자구 형성수는 0.5와 1배의 MS 배지 무기물 농도 또는 30 mM의 총 질소 농도에서 'Mona' 품종이 다른 품종에 비해 가장 많았다. 'Casa Blanca'와 'Hinomoto'에서는 0.5배 MS 무기물 농도 또는 30 mM의 질소 농도가 자구 형성에 가장 효과적이었다. 자구 비대는 2배 MS 무기물 농도 또는 120 mM 총질소 농도에서 3품종 모두 양호하였다.
LC-MS/MS를 이용하여 혈장과 소변 중 에르타페넴의 신속하고 정확한 분석법을 개발하고 이 분석법에 대한 검증을 수행하였다. 혈장과 소변 분석을 위하여 내부 표준 물질인 세프타지딤을 첨가한 후 메탄올로 단백질을 침전시키고, 그 상층액을 취하여 메탄올로 희석하여 LC-MS/MS로 분석하였다. MS/MS의 MRM (multiple reaction monitoring) 방법을 이용하여 혈장과 소변 중의 에르타페넴을 어떠한 분석의 방해물 없이 선택적으로 검출할 수 있었다. 혈장 중 에르타페넴의 표준 검량선은 1~100 ${\mu}g/mL$의 농도 범위에서 우수한 직선성($r^2$ = 0.9996)을 보였으며, 일내, 일간 재현성은 변동계수 8.9% 이하, 정확성은 97.2~106.2% 이었다. 또한 소변 중 에르타페넴의 분석 결과는 좋은 상관관계($r^2$ = 0.9992)를 보였고, 일내, 일간 재현성이 변동계수 7.2% 이하, 정확성이 97.9~111.6% 이었다. 결과적으로 에르타페넴의 약동학 연구에 적용되기에 충분한 감도와 특이성, 직선성, 정밀성 및 정확성을 가지고 있음을 확인하였다.
High performance liquid chromatography (HPLC) and liquid chromatography mass spectrometry (LC/MS) have been widely used to quantify aflatoxins in food, but these methods are expensive, time-consuming, unsuitable for analysis of the routine screening of large sample numbers and require derivatization and high level techniques to perform. The objective of this study is to detect aflatoxins in a large number of foods by a high efficient analytical system of combined enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for screening and LC/MS/MS for confirmation. The samples spiked individually with aflatoxin $B_1$ (0.5 and 1.0 ng/g) and total aflatoxins (10 ng/g) were analyzed by ELISA and LC/MS/ MS, and the recoveries for ELISA and LC/MS/MS were 71.8~119.2% and 70.8~135.3%, respectively. A total of 378 samples (grains, nuts, soybean and fermented soybean foods, pepper and fermented pepper foods) were purchased from the six major cities in Korea and analyzed by ELISA-LC/MS/MS system. Twenty two (5.8%; peanut: 11, pistachio: 2, walnut: 6, almond: 1, pepper powder: 1, pepper paste: 1) out of 378 samples were screened as aflatoxin B1 positive by ELISA, but, 4 (1.1%; peanut: 2, pistachio:1, pepper powder: 1) out of the 22 samples screened were confirmed as aflatoxins positive at levels of 1.02~52.79 ng/g by LC/MS/MS. ELISA-LC/MS/MS system provides a more rapid, accurate and cost-effective method for the detection of aflatoxins in large number of samples.
폭심(phoxim)은 널리 사용되고 있는 구충제인 동물용의약품이다. 본 논문에서는 소와 돼지 근육에 잔류하는 폭심을 분석하기 위해서, 실리카 고체상과 아세토니트릴을 사용하여 추출/정제하였다. 분석을 위해서 LC/ESI-MS/MS 방법이 사용되었다. HPLC에서 $C_{18}$ 컬럼($2.1{\times}100\;mm$, $3.5\;{\mu}m$)이 사용되었으며, 이동상으로는 0.1% formic acid와 물이 사용되었다. 소(0.0048~2.0 mg/kg)와 돼지(0.0055~2.0 mg/kg)에 소량첨가하여 얻은 검정곡선은 좋은 직선성($r^2$=0.995)을 나타내었다. 소와 돼지의 매트릭스에 대해서 0.0048~0.2 mg/kg범위에서 68.2~106.9%의 정확도를 나타내었으며, LOD는 0.0014~0.0017 mg/kg, LOQ는 0.0048~0.0055 mg/kg범위에 있었으며, 11.2%의 상대표준편차를 나타내었다.
1. 지황의 잎조직과 줄기조직을 생산조절물질이 첨가된 MS배지에 치상하였을 때 Quincrac, NAA, 2.4-D에서 보다 TDZ에서 더 많은 신초분화가 일어났다. 뿌리분화는 신초분화가 잘되었던 TDZ에서와는 달리 NAA가 첨가된 배지에서 잎조직을 치상했을 때 분화가 많이 일어나TEk. 2. 지황의 잎조지과 줄기조직을 $B_5$배지에 치상하였을 때 Quinerac, NAA, 2.4-D에서보다 TDZ에서 신초분화가 많이 일어났다. $B_5$배지에서는 Quincrac, NAA, 2.4-D 모두 0.01mg/l에서 분화가 일어났다. 뿌리의 분화에서 $B_5$배지에서는 NAA, TDZ 모두 분화가 잘 되었다. $B_5$배지에서는 Quincrac과 2.4-D에서도 뿌리분화의 효율이 높았다. 3. 2.4-D와 TDZ 생장조절물질을 조합처리한 MS배지에 지황의 잎과 줄기조직을 치상한 결과 신초수와 길이는 2.4-D 0.01mg/l와 TDZ 0.01, 0.1, 2(${\mu}M$)의 조합처리에서 가장 많은 신초분화수와 길이를 나타냈다. 2.4-D와 TDZ을 조합처리한 $B_5$배지에 지황의 잎과 줄기조직을 치상한 결과 신초수와 길이는 MS배지에 치상했을 때와 마찬가지로 2.4-D 0.01mg/l와 TDZ 0.1, 2.0(${\mu}M$)의 조합처리에서 신초분화가 일어났다.
This study was conducted to improve the analysis method used for N-nitrosamines and to investigate the occurrences of N-nitrosamines in tributaries of the Han-river, intake stations, water treatment plants and tap water used within the city of Seoul. The samples were pretreated through a solid phase extraction and analyzed using a gas chromatography tandem mass spectrometer (GC-MS/MS). The GC-MS/MS in CI mode was compared with the GC-MS/MS in EI mode by the method detection limits (MDLs). MDLs by GC-CI/MS/MS and GC-EI/MS/MS were 0.2 ~ 1.1 ng/L and 0.2 ~ 1.4 ng/L, respectively. Samples were collected from ten tributaries of the Han-river (T1 ~ T10), six intake stations (I1 ~ I6), six water treatment plants (P1 ~ P6) and 25 taps in Seoul city. The maximum levels of N-nitrosodimethylamine (NDMA) were 0.013 μg/L, 0.008 μg/L, 0.006 μg/L and 0.002 μg/L in tributary water, raw water, finished water and tap water samples, respectively. Detected levels were much lower than 0.1 μg/L corresponding to the guideline value of WHO.
설사성패류독의 신속정밀 분석조건 확립을 위하여 LC-MS/MS를 사용하여 이동상, 분석용 column 및 collision energy 등을 변화시키면서 시험하였다. 50 mM formic acid와 2 mM ammonium formate가 함유된 acetonitrile 수용액을 이동상으로 사용하였을 때 OA와 DTX1이 검출되었다. Collision energy는 독소 성분에 따라 달리하는 것이 다성분 동시분석에 적합하였으며 OA와 DTX1 고유의 fragment ion들은 48 V 정도에서 최적의 intensity로 확인되었다. Column의 종류에 따라서는 $C_8$ column의 경우 OA, DTX1, DTX3, PTX2 및 YTX 모두 검출 가능하였으나 실제 검출 대상이 OA와 DTX1인 경우에는 일반적으로 사용되는 $C_{18}$ column도 적합한 것으로 확인되었다. 본 연구에서 확립한 LC-MS/MS 분석 조건의 검출한계는 OA와 DTX1 모두 1 ng/g, 정량한계는 각각 3 ng/g이었고, 표준독 성분을 첨가한 시료에서 process efficiency는 굴의 경우 91-118%, 진주담치에서는 96-117%이었고, matrix의 영향은 거의 없었다. 마우스 시험에서 양성을 나타낸 시료를 LCMS/MS법으로 분석한 결과, 일부 시료에서만 OA 및 DTX1이 검출되어 두 시험법의 독성은 일치하지 않았으며 LC-MS/MS법은 마우스 시험법보다 하루 이상 분석시간을 단축할 수 있었다.
본 연구에서는 LC - MS/MS를 이용해 혈장과 뇨중에서 반코마이신을 신속하게 정량분석하는 방법을 개발하였다. 크로마토그래피는 $C_{18}$ XTerra MS 컬럼 ($2.1{\times}30mm$, $3.5{\mu}m$)을 사용하여 분석하였다. 이동상으로는 0.25% 초산이 섞인 10% 아세토니트릴 용액을 사용하였으며, 유속은 $250{\mu}L/min$이다. 반코마이신과 카페인 (내부표준물질)은 multiple reaction monitoring (MRM) 방법을 사용하여 검출하였으며 반코마이신은 precursor ion m/z 725.0 ( $[M+2H]^{2+}$)와 product ion m/z 100.0을 사용하였다. 혈장에서 반코마이신의 검출한계는 1 nM이며 좋은 정확성과 정밀성을 보여주었다. 또한 혈장중에서 반코마이신의 정량범위는 $0.01{\mu}M$ - $100{\mu}M$이다. 혈장과 뇨중에서 반코마이신을 정량하는 이 분석방법은 약물동력학연구 및 관련연구에 성공적으로 적용되었다.
Sri Rachma Aprilita Bugiwati, T.D.;Harada, H.;Fukuh, R.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제13권1호
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pp.1-5
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2000
Studies on the genetic and environmental effects on M.longissimus thoracis area (MLTA), fat thickness (SFT), rib thickness (RT) and marbling score (MS) were conducted on 21,086 steers and 7,151 heifers of Japanese Brown breed. All carcass traits were affected significantly (p<0.01) by sire, sex and initial year effects. Both of the MLTA and MS of steers were greater than heifers. Their differences were $1.4cm^2$ for MLTA and 0.05 for MS, respectively. Cattle started for fattening in winter tend to have higher of MLTA and MS and thicker of SFT and RT than those in other seasons. MLTA increase from 1987 to 1989 (about $1.9cm^2$) and decrease until 1994 (about $2.4cm^2$) and then increase again up to 1995 (about $1.5cm^2$). MS were nearly equal from 1987 to 1991 (about "1") and then decrease up to 1995 (about "1"). Heritability estimates of MLTA, RT, SFT and MS were ranged from 0.22 to 0.36. Genetic and phenotypic correlations of MLTA, RT, SFT and MS were positive and ranged from 0.05 to 0.62 and from 0.03 to 0.32 except SFT with MLTA was negative (-0.14 and -0.03).
Pelargonium aridum과 P. zonale의 자엽과 유식물의 절편체를 2 mg/L NAA와 0.2 mg/L BA를 첨가한 MS배지에서 배양하였을 때 캘러스를 형성하였다. 이들 캘러스는 동일배지에서 계대배양양하였다. 계대배양된 캘러스는 P. aridum의 경우 0.1∼l mg/L NAA와 0.25∼2 mg/L BA에서, P. zonale의 경우 0.1∼0.5 mg/L NAA와 1∼2 mg/L BA를 첨가한 MS 배지에 옮겨주었을 때 가장 많은 shoot를 형성하였다(P. aridum은 explant당 0.78개, P.zonale은 0.65개). 대부분의 shoot은 1/2 MS기본배지에서 배양하였을 때 발근하였다. 이들 재분화 개체들은 화분으로 옮겨진 추 온실에서 발육하여 개화하였다
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[게시일 2004년 10월 1일]
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